怀头鲇（silurus soldatovi）幼鱼消化酶活性的研究

论文摘要

怀头鲇是我国新开发的一种养殖鱼类，由于其生长速度快，肉质鲜美而受到养殖业者和消费者的普遍欢迎。对于新开发的养殖对象，全面了解其消化生理特征，尤其是了解幼鱼消化酶的种类性质、时间分布及活性变化，对全面了解幼鱼的食性转化、营养生理特点以及研制开口饲料具有重要的意义。本论文研究了pH值、温度、底物浓度等理化因素对怀头鲇幼鱼体内主要消化酶(蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶)活性的影响；同时，研究了怀头鲇仔、稚鱼期消化酶及碱性磷酸酶活性的分布和变化趋势，探讨了摄食前后怀头鲇幼鱼消化酶活性的变化等。结果如下：1．怀头鲇幼鱼胃蛋白酶作用的适宜pH为2.6左右：肠蛋白酶作用的适宜pH为9.8～10.3；胃淀粉酶作用的适宜pH为6.0，肠淀粉酶作用的适宜pH为7.0～7.4。胃蛋白酶作用的最适温度为35℃左右，肠蛋白酶作用的最宜温度为40～45℃；胃淀粉酶作用的最宜温度为45℃，肠淀粉酶作用适宜温度为40～45℃。胃和肠蛋白酶作用适宜底物浓度都为0.5％干酪素；胃淀粉酶作用适宜底物浓度为0.5％可溶性淀粉。2．在怀头鲇早期发育过程中，消化酶活性随日龄增加依酶类不同呈现不同变化趋势，并表现一定波动性。自孵化后2d龄起，仔鱼的各种消化酶活性开始上升，其酸性蛋白酶活性呈由弱渐强缓慢上升趋势，碱性蛋白酶活性随日龄增加上升较快，3～10d龄期间，仔鱼的碱性蛋白酶活性均明显高于酸性蛋白酶，在5d龄时即达到较高值，而酸性蛋白酶在10d龄达到峰值。脂肪酶活力的波动相对平稳，酶活力在4d龄最高，而淀粉酶活性在仔鱼摄食初期活性很高，之后随日龄增加明显下降。在4d龄和8d龄时，碱性蛋白酶和淀粉酶活力均有不同程度下降，而脂肪酶均在此期间有所升高，显示出鱼类早期发育阶段中消化酶的变化与消化生理特点。消化酶的变化与仔鱼营养和食性转化密切相关，推测怀头鲇约在8d龄时完成由内源至外源营养的机能转换。碱性磷酸酶与蛋白酶的变化趋势相近，随着怀头鲇的生长发育活性一直缓慢上升。3．摄食后幼鱼胃蛋白酶活性下降，随后开始快速上升至摄食后3h酶活性达到最高值，与摄食前相比差异显著(P＜0.05)；而肠蛋白酶活性一直保持上升趋势，摄食后3h酶活性达到最高值。胃淀粉酶活性在摄食1h后明显的降低(P＜0.05)，但很快又迅速上升，到摄食后3 h达到最高值；肠淀粉酶在摄食后表现为先降低后增加的趋势，摄食后5 h达到最高值。同时发现，摄食前后胃中脂肪酶活性变化较为剧烈，摄食后3 h达到最高峰，而肠道中脂肪酶活性的变化较为缓慢，说明摄食对胃中脂肪酶活性影响较大。

论文目录

• 摘要
• 英文摘要
• 1 引言
• 1.1 怀头鲇的生物学
• 1.2 鱼类消化酶研究进展
• 1.2.1 有关鱼类蛋白酶的研究
• 1.2.2 有关鱼类淀粉酶的研究
• 1.2.3 有关鱼类脂肪酶的研究
• 1.2.4 鱼类消化酶和食性的关系
• 1.2.5 消化酶活性与环境条件的关系
• 1.2.6 鱼类消化酶酶促反应和酶动力学等方面的研究
• 1.2.7 胚后发育阶段消化酶的发生和演化
• 1.2.8 天然饵料中的消化酶及外源消化酶在鱼类消化过程中的作用
• 1.2.9 饲料种类与消化酶
• 1.3 碱性磷酸酶的研究
• 1.4 消化酶研究的前景
• 1.5 本研究的目的与意义
• 1.6 研究内容
• 2 材料与方法
• 2.1 实验动物及饲养管理
• 2.2 实验设备和试剂
• 2.2.1 实验设备
• 2.2.2 蛋白浓度测定试剂
• 2.2.3 蛋白酶测定试剂
• 2.2.4 淀粉酶测定试剂
• 2.2.5 脂肪酶和碱性磷酸酶测定试剂
• 2.2.6 实验药品
• 2.3 理化因素对消化酶活性影响的实验
• 2.3.1 温度梯度的设定
• 2.3.2 pH梯度的设定
• 2.3.3 底物浓度的设定
• 2.3.4 酶分析样品的制备
• 2.3.5 消化酶活性的测定
• 2.4 消化酶及碱性磷酸酶活性变化
• 2.4.1 样品采集
• 2.4.2 酶分析样品的制备
• 2.4.3 消化酶活性的测定
• 2.5 怀头鲇幼鱼摄食时间与消化酶活性变化的实验
• 2.5.1 样品采集
• 2.5.2 酶分析样品的制备
• 2.5.3 消化酶活性的测定
• 2.6 数据分析
• 3 实验结果
• 3.1 理化因素对消化酶活性的影响
• 3.1.1 pH对胃蛋白酶活性的影响
• 3.1.2 pH对肠蛋白酶活性的影响
• 3.1.3 pH对胃淀粉酶活性的影响
• 3.1.4 pH对肠淀粉酶活性的影响
• 3.1.5 温度对胃蛋白酶活性的影响
• 3.1.6 温度对肠蛋白酶活性的影响
• 3.1.7 温度对胃淀粉酶活性的影响
• 3.1.8 温度对肠淀粉酶活性的影响
• 3.1.9 底物浓度对胃蛋白酶活性的影响
• 3.1.10 底物浓度对肠蛋白酶活性的影响
• 3.1.11 底物浓度对胃淀粉酶活性的影响
• 3.2 仔稚期消化酶活性变化
• 3.2.1 仔稚期蛋白酶活性变化
• 3.2.2 仔稚期淀粉酶活性变化
• 3.2.3 仔稚期脂肪酶活性变化
• 3.2.4 仔稚期碱性磷酸酶活性变化
• 3.2.5 仔稚期消化酶活性的比较
• 3.3 摄食前后消化酶活性变化
• 3.3.1 摄食前后胃和肠道中蛋白酶活性变化
• 3.3.2 摄食前后胃和肠道中淀粉酶活性变化
• 3.3.3 摄食前后胃和肠道中脂肪酶活性变化
• 4 讨论
• 4.1 pH对鱼类消化酶活性的影响
• 4.1.1 pH对胃蛋白酶活性影响
• 4.1.2 pH对肠蛋白酶活性影响
• 4.1.3 pH对淀粉酶活性影响
• 4.2 反应温度对怀头鲇幼鱼消化酶活性的影响
• 4.3 底物浓度对怀头鲇幼鱼消化酶活性的影响
• 4.4 仔稚幼鱼期消化酶及碱性磷酸酶活性变化
• 4.5 摄食时间对消化酶活性和分泌的影响
• 4.5.1 摄食前后胃肠道中蛋白酶活性变化
• 4.5.2 摄食前后胃肠道中淀粉酶和脂肪酶活性变化
• 5 结论
• 5.1 pH值、温度和底物浓度对消化酶活性的影响
• 5.2 怀头鲇仔稚鱼期各种酶活性变化与分布
• 5.3 摄食前后消化酶活性变化
• 致谢
• 参考文献
• 攻读学位期间发表的学术论文