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金银花多糖的分离纯化与生物活性研究

2020-12-06阅读(476)

金银花多糖的分离纯化与生物活性研究

论文摘要

金银花为忍冬科植物忍冬（Loniccra japonica Thunb）、红腺忍冬（Lhypoglauca Miq）、山银花（L confusa DC）或毛花柱忍冬（L dasystyla Rchd）的干燥花蕾,其味甘,性寒,归肺,心,胃经。清热解毒,疏散风热,具有抗病原微生物,抗毒,抗炎,解热等作用。目前对于金银花活性成分的研究仅限于小分子物质,而对于极具开发前景的活性多糖的研究报道较少。为了进一步开发利用金银花资源,本课题选取金银花为材料,采用现代分析技术对金银花多糖进行了分离、纯化,并对纯化组分进行了组成及结构测定,采用现代功能评价方法对金银花多糖粗提物的体外抗氧化活性和对小鼠体内抗氧化活性进行了初步研究,试验主要结论如下:1.采用水溶醇沉法提取金银花多糖的最佳提取条件组合为A1B2C1D2,即40℃,2h,20倍水,提取2次。2.超滤结果表明:半数以上的金银花多糖的分子量在100KD以上,100-50KD,50-30KD和30-10KD的范围内都有金银花多糖的分布。3.经DEAE-52离子交换纤维素柱色谱和SephadexG-100凝胶柱色谱分离出FL-C1,FL-D1,FL-D2三种组分,其纯度鉴定分别采用Sephadex G-200凝胶柱色谱和高效凝胶渗透色谱法测定后,表明FL-C1,FL-D1两种组分均为单一组分。计算得FL-C1,FL-D1的分子量分别为120000Da,30000 Da。4.单糖组成分析结果表明,FL-C1由葡萄糖（Glu）、半乳糖（Ga1）、核糖（Rib）、阿拉伯糖（Ara）、木糖（Xy1）、果糖（Fru）组成。FL-D1由葡萄糖（Glu）、半乳糖（Gal）、木糖（Xyl）、阿拉伯糖（Ara）、鼠李糖（Rha）组成。FL-D2由葡萄糖（Glu）、半乳糖（Gal）、甘露糖（Man）、核糖（Rib）、阿拉伯糖（Ara）、木糖（Xyl）、果糖（Fru）组成。5.体外抗氧化活性表明,金银花粗多糖的总还原力随着浓度的增加逐步升高,并与多糖浓度有很好的相关性。金银花多糖对PMS-NADH-NBT系统产生的超氧自由基有显著的抑制作用。6.小鼠体内抗氧化活性表明,金银花多糖提取物可以显著提高受试小鼠血清、肝组织、脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的活性,而显著降低这些组织中丙二醛（MDA）的含量。结果说明金银花多糖提取物具有抗氧化性。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第一章 文献综述
  • 1 金银花的研究进展
  • 1.1 金银花的医药典籍记载
  • 1.2 金银花的化学成分
  • 1.3 金银花的药理研究
  • 1.4 金银花的应用
  • 2 多糖的研究进展
  • 2.1 多糖化合物的提取分离
  • 2.2 多糖的纯度测定和分子量测定
  • 2.3 多糖的成分分析和结构
  • 2.4 多糖的生物活性研究
  • 3 本课题研究的内容和意义
  • 3.1 本课题研究的主要内容
  • 3.2 本课题研究的目的和意义
  • 第二章 金银花多糖的提取工艺研究
  • 1 材料与方法
  • 1.1 试验材料
  • 1.2 主要试剂
  • 1.3 试验仪器
  • 1.4 试验方法
  • 2 结果与分析
  • 2.1 多糖含量测定标准曲线
  • 2.2 蛋白含量测定标准曲线
  • 2.3 加样回收率试验结果
  • 2.4 精密度试验结果
  • 2.5 稳定性试验结果
  • 2.6 样品含量测定结果
  • 2.7 金银花多糖提取的单因素试验结果
  • 2.8 测定波长光谱图
  • 2.9 Sevag法脱蛋白结果
  • 3 结论:
  • 3.1 金银花多糖提取试验
  • 3.2 Sevag脱蛋白试验
  • 3.3 苯酚硫酸法测定多糖含量
  • 第三章 金银花多糖的分离纯化及结构分析
  • 1 试验试剂及仪器
  • 1.1 试剂
  • 1.2 仪器
  • 2 试验方法
  • 2.1 金银花多糖的分离纯化
  • 2.2 金银花多糖的纯度鉴定
  • 2.3 金银花多糖分子量测定
  • 2.4 金银花多糖的单糖组成及结构分析
  • 3 结果与分析
  • 3.1 金银花多糖超滤效果图
  • 3.2 金银花多糖的分子量分布测定结果
  • 3.3 金银花多糖的DEAE-52纤维素柱色谱
  • 3.4 金银花多糖的SephadexG-100凝胶柱色谱纯化结果
  • 3.5 金银花多糖纯度鉴定
  • 3.6 高效凝胶渗透色谱法测定金银花多糖纯品的分子量
  • 3.7 金银花多糖单一组分的红外光谱图解析
  • 3.8 金银花多糖单一组分的单糖组成测定结果
  • 4 讨论
  • 第四章 金银花多糖的生物活性研究
  • 1 试验试剂及仪器
  • 1.1 试验试剂
  • 1.2 试验仪器
  • 2 试验方法
  • 2.1 活性试验用金银花多糖的制备方法
  • 2.2 金银花多糖的体外抗氧化活性评价
  • 2.3 金银花多糖的体内抗氧化作用的研究
  • 3 结果与分析
  • 3.1 金银花多糖体外抗氧化试验结果
  • 3.2 小鼠体内试验结果
  • 4.讨论:
  • 结论
  • 创新之处
  • 参考文献
  • 致谢

    • 相关论文文献

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