犬代偿肾构型、功能及组织病理学研究

论文摘要

肾代偿在小动物临床上很常见,单侧输尿管阻塞或肾摘除后均可引起对侧肾功能代偿。据文献报道,肾代偿由两种形式——肥大和再生完成。肥大是指肾组织细胞的体积增加,再生是指代偿时肾组织细胞数目增多。有学者认为肾在代偿过程中伴有肾实质进行性损害和细胞凋亡,这与以往关于代偿肾只有代偿性增生和肾血流量增加的观点有较大出入。为此,本试验建立犬肾代偿模型,通过B超检查、尿蛋白分析及显微观察等,研究其代偿肾构型、肾功能及病理组织学变化规律,为临床代偿肾研究提供理论依据。试验Ⅰ、犬代偿肾构型变化的研究目的：用B型超声检测犬代偿肾构型变化。方法：选取13只成年健康犬,对其进行左侧输尿管结扎。分别于结扎前一天和结扎后第1、2、3、4、6、8、10、12、14、17、19及21天测量代偿肾（右肾）肾长、肾宽和肾厚。结果：犬代偿肾第1-21天肾长、肾宽、肾厚与结扎前比较均无显著差异（P>0.05）。结论：代偿肾在一侧输尿管结扎后短期内未发生构型的显著变化。试验Ⅱ、犬代偿肾功能——尿蛋白的研究目的：通过检测尿蛋白含量及蛋白种类,判断代偿肾功能。方法：选取7只成年健康犬,对其进行左侧输尿管结扎后每天采集尿夜,测定34 d内尿蛋白含量,并利用SDS-PAGE电泳方法按蛋白质的分子量大小分离尿蛋白。结果：定量检测尿蛋白发现,输尿管结扎后每天尿中均含有蛋白,且总体呈上升趋势。第28天尿总蛋白含量上升至0.94 mg·mL-1,与结扎前比较差异显著（P<0.05）,到第31天其含量达1.9mg·mL-1,与结扎前比较差异极显著（P<0.01）；尿蛋白电泳分离表明,前12天各泳道蛋白条带不明显；之后每天可见明显的蛋白条带,从第13-31天蛋白条带种类逐渐增多,颜色逐渐加深,均见>66.2 KD的条带和<66.2 KD的条带,证明为混合性蛋白尿,提示代偿肾肾小球通透性增强,肾小管重吸收能力下降。第31天后>66.2 KD的条带种类减少。结论：单侧输尿管结扎后12d内尿蛋白含量在正常范围内,SDS-PAGE电泳未分离出尿蛋白。第13-38天出现混合性蛋白尿,提示肾小球及肾小管受损,肾功能降低。试验Ⅲ、犬代偿肾组织病理学研究目的：研究犬代偿肾在代偿过程组织病理学变化。方法：选取7只健康成年犬,分别于左侧输尿管结扎后的第3、7、14、21、28、35及75天采集代偿肾（右肾）组织,样品置于4%多聚甲醛中固定,4℃保存,并对其进行常规组织病理学检查。结果：经HE染色后观察,左侧输尿管结扎后第3天,其代偿肾（右肾）肾小球血管袢充血,肾小球体积稍增大,系膜细胞增生。个别肾小管上皮浊肿变性,部分有脱落；第7天,肾小球血管袢充血、体积增大,肾小囊囊腔变小,系膜细胞增生。个别肾小管轻度浊肿变性；第14天,肾小球充血,体积增大,血管球略有分叶,系膜细胞增生。肾小管上皮水肿,部分变性脱落。部分小管腔内见脱落的上皮细胞。肾小管内有大量蛋白管型；第21天,肾小球体积增大,系膜细胞增加,有中度的增生。肾小管上皮细胞水肿。有些上皮细胞变性、凋亡,管腔内可见脱落的细胞碎片；个别肾小管严重变性,基底膜裸露。管腔内有微量蛋白管型；第28天,肾小球体积较小,系膜细胞轻度增生。’肾小管上皮细胞有疏松变性,部分肾小管上皮细胞脱落至管腔；第35天,肾小球体积较小,系膜细胞轻度增生。肾小管上皮细胞变性脱落。管腔内有微量蛋白管型；第75天,肾小球体积较小,系膜细胞增生。肾小管扩张,肾间质水肿明显,肾小管上皮细胞变性,管腔内有蛋白管型。结论：通过组织病理学检查发现,单侧输尿管结扎后对侧代偿肾在一定时期内有损伤。短期内代偿肾以肾小球体积增大、肾小球充血为主。而系膜细胞增生、肾小管上皮细胞变性、凋亡等病理变化则伴随整个肾代偿的发展过程直至第75天。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 缩略语
• 前言
• 上篇 文献综述
• 第一章 B型超声临床应用及肾超声检查意义
• 1 B型超声使用原理与应用
• 1.1 超声成像原理
• 1.2 B型超声在小动物临床的应用
• 2 犬肾解剖及其B超检查
• 2.1 犬肾解剖
• 2.2 犬肾B超检查
• 参考文献
• 第二章 尿总蛋白测定及尿蛋白SDS-PAGE电泳分离
• 1 尿蛋白（urinary protein）形成机制
• 2 尿蛋白的定量检测
• 3 蛋白尿分类
• 4 尿蛋白的电泳检测
• 参考文献
• 第三章 肾代偿过程中的肾组织学变化及其影响因素
• 1 肾的组织结构
• 2 肾代偿性生长的影响因素
• 2.1 年龄
• 2.2 低蛋白饮食摄入量
• 2.3 促肾生长因子（kinetics gain factor,KGF）
• 2.4 表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF）
• 2.5 胰岛素样生长因子（insulin-like growth factor,IGF）
• 2.6 其他影响因素
• 3 输尿管梗阻对双侧肾组织病理学的影响
• 参考文献
• 下篇 试验研究
• 第四章 犬代偿肾构型变化的研究
• 1 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.3 数据分析
• 2 结果
• 3 讨论
• 参考文献
• 第五章 犬代偿肾功能——尿蛋白的研究
• 1 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.3 数据分析
• 2 结果
• 2.1 尿总蛋白的测定
• 2.2 尿蛋白SDS-PAGE电泳分离
• 3 讨论
• 3.1 肾代偿时尿蛋白的定量与分析
• 3.2 肾代偿时尿蛋白的电泳分离与分析
• 4 小结
• 参考文献
• 第六章 犬代偿肾组织病理学研究
• 1 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.2 试验方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 参考文献
• 全文总结
• 致谢
• 附录