鸡IL-2、IL-18、IFN-γ和CpG DNA在减毒沙门氏菌运送H5亚型禽流感核酸疫苗中的佐剂作用及鸡CD4和CD8分子单克隆抗体的研制

论文题目: 鸡IL-2、IL-18、IFN-γ和CpG DNA在减毒沙门氏菌运送H5亚型禽流感核酸疫苗中的佐剂作用及鸡CD4和CD8分子单克隆抗体的研制

论文类型: 博士论文

论文专业: 预防兽医学

作者: 胡青海

导师: 焦新安

关键词: 减毒沙门氏菌,亚型禽流感病毒,核酸疫苗,细胞因子,干扰素,佐剂,分子,单克隆抗体

文献来源: 扬州大学

发表年度: 2005

论文摘要: H5亚型高致病性禽流感(HPAI)是由H5亚型禽流感病毒(AIV)中的一些毒株引起的禽类高度致死性传染病,并威胁着人类的健康,被国际兽医局(OIE)列为A类疾病,在我国被列为一类动物传染病。国际上对HPAI的控制主要采取扑杀及其他生物安全措施,疫苗免疫接种也是控制疫情的关键措施之一。目前应用的油乳剂全病毒灭活疫苗虽然具有效果确实、保护率高、免疫期长和研制周期短等优点,但也存在许多缺陷,主要是灭活苗的使用影响疫情监测及不能产生粘膜免疫应答。DNA免疫能诱导机体产生特异性的细胞免疫、体液免疫和粘膜免疫,且不受母源抗体的干扰,被称为第三代疫苗。表达HA基因的AIV DNA疫苗只产生针对HA蛋白的抗体,不影响疫情监测,且受母源抗体的干扰小。但现有的H5亚型AIV DNA疫苗的免疫保护水平与油乳剂全病毒灭活疫苗相比仍有差距,需进一步优化,以提高免疫效力。许多研究表明,选择合适的DNA疫苗佐剂(如CpGDNA、细胞因子、趋化因子、HSP和C3d等)可在被接种动物体内很好地发挥免疫调节作用,不仅能增强免疫反应的强度,还可改变诱发的免疫反应类型,提高免疫力。本研究将构建鸡IL-2、IL-18或IFN-γ与H5亚型AIV HA基因共表达的DNA疫苗以及在真核表达质粒中嵌合CpG基序的DNA疫苗,然后以减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207运送这些真核表达质粒,以空白组、空载体组和禽流感油乳剂灭活疫苗免疫组作为对照,来评价鸡IL-2、IL-18、IFN-γ cDNA和CpG DNA在减毒沙门氏菌运送H5亚型禽流感核酸疫苗中的佐剂作用。 一些H5亚型禽流感DNA疫苗免疫后能提供部分或完全的免疫保护率,但未检测到血清抗体水平的升高。细胞免疫在这种疫苗免疫保护中究竟起多大作用?为了研究CD4~+或CD8~+T细胞在其中的作用以及CD3~+T细胞的绝对数量(或百分比)变化等,研制抗鸡CD3、CD4和CD8分子的单克隆抗体很有必要。

论文目录:

符号说明

综述一 增强DNA疫苗免疫效应的策略

1．DNA疫苗载体的改进

2．从编码抗原蛋白基因的角度进行优化

3．CpG DNA

4．细胞因子作为基因佐剂

5．应用某些信号小分子或序列增强DNA疫苗的免疫效果

6．其他基因佐剂

7．免疫程序的优化

8．接种方式的优化

9．结语与展望

10．参考文献

综述二 鸡的CD4和CD8分子研究进展

1．鸡CD4和CD8阳性T细胞的发育及分布

2．CD4和CD8分子的结构

3．CD4~+ CD8~+双阳性T细胞

4．CD4和CD8的基因

5．鸡CD4和CD8分子的功能

6．抗鸡CD4和CD8分子的单克隆抗体的应用

7．参考文献

第一章 嵌合CpG基序及共表达鸡IL-2、IL-18或IFN-γ为佐剂的H5亚型禽流感HA基因的核酸疫苗的构建

1．材料与方法

2．结果

3．讨论

4．参考文献

第二章 鸡IL-2、IL-18、IFN-γ cDNA和CpG基序在减毒沙门氏菌运送H5亚型禽流感核酸疫苗中的佐剂作用

1．材料与方法

2．结果

3．讨论

4．参考文献

第三章 鸡CD3 γ δ、CD4和CD8 α基因cDNA的克隆与序列分析

1．材料与方法

2．结果

3．讨论

4．参考文献

第四章 抗鸡CD4和CD8分子单克隆抗体的制备和初步鉴定

1．材料与方法

2．结果

3．讨论

4．参考文献

结论

致谢

发布时间: 2005-07-15

参考文献

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