板蓝根多糖提取、降解及毛细管区带电泳的单糖测定

论文摘要

板蓝根具有抗菌抗病毒、解毒、提高免疫力、抗肿瘤、治疗白血病等作用。板蓝根多糖是板蓝根中多种化学成分之一,具有较好的生物活性,与提高免疫力紧密相关。采用毛细管区带电泳法测定板蓝根多糖的单糖组成研究未见报道,本文采用毛细管区带电泳法（CZE）对板蓝根的单糖组成进行了定性和定量分析。为中药板蓝根多糖的质量控制标准提供了科学依据。本文共分六部分:第1章:综述了板蓝根的功效、研究概况;多糖的提取、降解方法;糖类的测定方法。并且阐述了本文的研究目的及方法。第2章:采用CZE分析,以还原性的单糖对照品为供试品,考察了α-萘胺和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）衍生方法对单糖对照品的衍生效果。结果:通过对两种衍生方法色谱图,衍生化操作等方面比较,选定PMP衍生化方法。第3章:采用CZE分析,考察了板蓝根多糖不同提取方法。结果:超声提取法提取板蓝根多糖含量为16%,水提醇沉法提取板蓝根多糖含量为78%,最终选取水提醇沉法提取板蓝根多糖,并对提取方法进行正交试验优化,最优提取条件为:三次加水量分别为200 mL、100 mL和100 mL,三次提取时间分别为120 min、60 min和30 min,醇沉浓度为85%。第4章:采用CZE分析,考察了板蓝根多糖的不同全降解方法。结果:H2O2降解法和混酸降解法降解板蓝根多糖产生的单糖种类、单糖含量都不如强酸法降解板蓝根多糖。最终选取强酸法降解板蓝根多糖,并对提取方法进行正交试验优化,最优降解条件为:1 mol/L硫酸溶液,95℃恒温降解5 h。第5章:建立了板蓝根多糖提取、降解、单糖衍生,并采用毛细管区带电泳法测定的方法。结果:板蓝根多糖由木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、甘露糖、半乳糖等组成。结果稳定,重现性好,毛细管区带电泳法用于板蓝根多糖的单糖组成测定及其质量控制,准确,可靠,结果满意。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 糖类的提取、降解方法介绍
• 1.2.1 糖类提取方法的介绍
• 1.2.2 糖类降解方法的介绍
• 1.3 糖类测定方法的介绍
• 1.3.1 气相色谱法
• 1.3.2 高效液相色谱法
• 1.3.3 质谱
• 1.4 毛细管电泳的基本介绍及糖类的毛细管电泳测定
• 1.4.1 毛细管电泳的发展史及基本原理
• 1.4.2 毛细管电泳用于糖类的分析介绍
• 1.4.3 糖类的毛细管电泳检测
• 1.5 本课题的立题依据和研究思路
• 第2章 糖类的衍生反应研究
• 2.1 引言
• 2.2 仪器、材料与试药
• 2.3 单糖对照品溶液的α-萘胺衍生化研究
• 2.3.1 色谱条件
• 2.3.2 溶液的配置
• 2.3.3 木糖，葡萄糖及混合木糖，葡萄糖对照品溶液的衍生
• 2.3.4 木糖，葡萄糖与各种单糖对照品混合溶液衍生
• 2.3.5 混合单糖对照品溶液的衍生
• 2.4 单糖对照品溶液的PMP 衍生化研究
• 2.4.1 色谱条件
• 2.4.2 溶液的配制
• 2.4.3 单糖对照品溶液的衍生
• 2.4.4 混合单糖对照品溶液的衍生
• 2.5 结论
• 2.5.1 α-萘胺衍生方法研究
• 2.5.2 PMP 衍生方法研究
• 2.5.3 两种衍生方法的比较
• 第3章 板蓝根多糖提取方法的研究
• 3.1 引言
• 3.2 仪器、材料与试药
• 3.3 色谱条件
• 3.4 板蓝根多糖的超声提取方法研究
• 3.4.1 提取流程
• 3.4.2 提取产物的毛细管电泳测定
• 3.4.3 毛细管电泳图
• 3.5 板蓝根多糖的水提醇沉方法研究
• 3.5.1 提取流程
• 3.5.2 提取产物的毛细管电泳测定
• 3.5.3 毛细管电泳图
• 3.6 板蓝根多糖超声提取后再进行水提醇沉
• 3.7 结论
• 3.7.1 提取方法的对比
• 3.7.2 板蓝根多糖的水体醇沉方法的优化
• 3.7.3 提取条件优化结果
• 第4章 板蓝根多糖降解方法的研究
• 4.1 引言
• 4.2 仪器、材料与试药
• 4.3 色谱条件
• 2O₂ 降解方法研究'>4.4 H₂O₂降解方法研究
• 4.4.1 溶液的配制
• 4.4.2 板蓝根多糖的降解
• 4.4.3 板蓝根多糖降解液的衍生及毛细管电泳测定
• 4.4.4 衍生反应图
• 4.5 混酸降解方法研究
• 4.5.1 溶液的配制
• 4.5.2 板蓝根多糖的降解
• 4.5.3 板蓝根多糖降解液的衍生及毛细管电泳测定
• 4.5.4 衍生反应图
• 4.6 强酸降解方法研究
• 4.6.1 溶液的配置
• 4.6.2 板蓝根多糖的降解
• 4.6.3 板蓝根多糖降解液的衍生及毛细管电泳测定
• 4.6.4 衍生反应图
• 4.7 结论
• 4.7.1 降解方法的对比
• 4.7.2 强酸降解方法的优化
• 4.7.3 降解试验的优化结果
• 第5章 板蓝根多糖提取、降解及毛细管区带电泳的单糖测定
• 5.1 引言
• 5.2 仪器、材料与试药
• 5.3 溶液的配制
• 5.4 板蓝根多糖的提取、降解及衍生
• 5.4.1 样品处理
• 5.4.2 样品衍生
• 5.4.3 衍生反应图
• 5.5 衍生物毛细管电泳分析
• 5.5.1 线性关系考察
• 5.5.2 检测限
• 5.5.3 定量限
• 5.5.4 日内精密度试验
• 5.5.5 日间精密度试验
• 5.5.6 重复性试验
• 5.5.7 稳定性试验
• 5.5.8 加样回收试验
• 5.5.9 样品测定
• 5.5.10 降解条件下单糖稳定性试验
• 5.6 结论
• 5.6.1 产地不同对板蓝根多糖含量及单糖组成的影响
• 5.6.2 内标物的选择
• 5.6.3 与文献报道结论的对比
• 第6章 板蓝根寡糖的初步研究及展望
• 6.1 引言
• 6.2 仪器、材料与试药
• 6.3 溶液的配置
• 6.3.1 β-CD 溶液的配制
• 6.3.2 缓冲溶液的配制
• 6.4 色谱条件
• 6.5 板蓝根多糖的降解及衍生测定
• 6.5.1 板蓝根多糖的降解
• 6.5.2 板蓝根多糖降解液的衍生及毛细管电泳测定
• 6.5.3 衍生反应图
• 6.6 结论
• 6.6.1 条件的优化
• 6.6.2 寡糖研究的展望
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间取得的科研成果