文昌鱼和玫瑰无须鲃的精子运动及其在污染物急性毒性检测中的应用

论文题目: 文昌鱼和玫瑰无须鲃的精子运动及其在污染物急性毒性检测中的应用

论文类型: 博士论文

论文专业: 海洋生物学

作者: 胡家会

导师: 张士璀

关键词: 文昌鱼,玫瑰无须鲃,精子,运动,有机磷农药,急性毒性

文献来源: 中国海洋大学

发表年度: 2005

论文摘要: 精子生物学的快速发展,为保护野生濒危物种和经济动物的人工繁殖研究提供了重要手段,还开辟了体外急性毒性检测的新领域。本文对青岛文昌鱼（Branchiostoma beicheri tsingtauense）和玫瑰无须鲃（Puntius conchonius）精子运动启动的机理和影响因子进行了研究。在此基础上,把玫瑰无须鲃的精子应用于水胺硫磷（isocarbophos）和甲基异柳磷（isofenphos-methyl）的细胞毒性检测中,建立了用鱼类精子体外检测有机磷农药急性毒性的方法体系。 首先,我们探讨了外界环境因素对青岛文昌鱼精子启动及运动的影响,发现:（1）文昌鱼精子的运动启动属于高渗调节类型,低渗或等渗电解质和非电解质溶液均不能激发精子运动;（2）只有Ca2+存在的条件下,高渗溶液才能启动精子的运动;（3）当Ca2+添加到含有EGTA的无Ca2+溶液后,被抑制的精子恢复运动,说明Ca2+和高渗是精子运动启动必不可少的外部因素;（4）精子运动的启动需要Ca2+,而L-钙离子通道抑制剂异搏啶（verapamil）却不能抑制精子运动的启动;（5）钾离子通道抑制剂奎宁（quinine）和4-氨基吡啶（4-aminopyridine）显著抑制精子的运动,但不影响精子运动的启动,它们的抑制作用是可逆的,说明钾离子通道参与精子运动过程的调节。（6）只有在Ca2+存在的情况下,溶液pH的变化才影响精子运动,而不影响运动的启动。基于这些结果,我们认为高渗和Ca2+协同作用启动文昌鱼精子运动,钾离子和溶液的pH是维持精子运动必不可少的外部因素。此外,通过计算机辅助精子分析（CASA）系统,首次成功地定量分析了文昌鱼的精子运动。随着精子在海水中激活时间的延长,运动速度快速降低、轨迹的直径变小,可能与精子细胞内ATP的消耗和Ca2+的积累有关。 其次,我们研究了外界环境因子对玫瑰无须鲃精子启动及运动的影响,主要观察结果是:（1）无论是水、双蒸水还是其他低渗的电解质（NaCl、KCl）和非电解质（mannitol）溶液,均能激发精子运动的启动,说明精子运动属于低渗调

论文目录:

中文摘要

英文摘要

论文中常用缩写符号的中、英文名称

第一章 水生动物精子运动及其在污染物毒性检测上的研究概况和进展

1 水生动物精子运动的研究概况和进展

1.1 渗透压影响水生动物精子运动的启动

1.2 离子成份影响水生动物精子运动的启动

1.3 pH值影响水生动物精子的运动

1.4 温度影响水生动物精子的运动

1.5 精子激活与抑制的机理

1.6 研究精子启动及运动的意义

2 水环境污染物检测的研究概况及进展

2.1 水环境污染简述

2.2 化学方法检测水体污染物

2.3 体内检测水体污染物毒性

2.4 鱼细胞培养体外检测水体污染物毒性

2.5 水生动物的配子体外检测污染物的毒性

2.6 体外检测有机磷农药的细胞毒性研究

第二章 青岛文昌鱼(Branchiostoma beicheri tsingtauense)精子的启动及运动

1 文昌鱼及其精子简述

1.1 文昌鱼研究简史及分类地位

1.2 青岛文昌鱼

1.3 青岛文昌鱼精子的启动及运动

2 材料与方法

2.1 药品与溶液

2.2 动物与精液

2.3 外界渗透压对精子运动的影响

2.4 外界Ca~(2+)对精子运动的影响

2.5 pH对精子运动的影响

2.6 离子通道抑制对精子运动的影响

2.7 统计分析

3 实验结果

3.1 精浆的一般特征

3.2 精子运动的启动需要Ca~(2+)

3.3 高渗透压激发精子运动的启动

3.4 钾离子影响精子的运动

3.5 pH影响精子运动

4 讨论与结论

第三章 玫瑰无须鲃(Puntius conchonius)精子的启动及运动

1 玫瑰无须鲃及其精子

1.1 玫瑰无须鲃生物学特点

1.2 玫瑰无须鲃的精子

1.3 玫瑰无须鲃精子的启动及运动

2 材料与方法

2.1 药品与溶液

2.2 动物与精液

2.3 检测精液的一般特征

2.4 检测渗透压对精子运动的影响

2.5 检测钙离子通道抑制剂对精子运动的影响

2.6 检测钾离子通道抑制剂对精子运动的影响

2.7 检测pH对精子运动的影响

3 实验结果

3.1 精液与精子运动的一般特征

3.2 渗透压对精子运动启动的影响

3.3 钙离子通道抑制剂对精子运动的影响

3.4 钾离子通道抑制剂对精子运动的影响

3.5 pH对精子运动的影响

4 讨论与结论

第四章 运用CASA系统检测文昌鱼精子运动

1 CASA系统简述

2 材料与方法

2.1 文昌鱼与精液

2.2 定量分析文昌鱼的精子运动

3 实验结果

4 讨论与结论

第五章 水胺硫磷(isocarbophos)对玫瑰无须鲃精子的体外毒性

1 材料与方法

1.1 化学试剂与溶液

1.2 实验动物

1.3 精液的收集与保存

1.4 精子运动分析

1.5 电镜观察

2 实验结果

2.1 水胺硫磷抑制精子运动

2.2 水胺硫磷对精子超微结构的损伤

3 结论与讨论

第六章 甲基异柳磷(isofenphos-methyl)对玫瑰无须鲃精子的体外毒性

1 材料与方法

1.1 试剂与溶液

1.2 动物与精液

1.3 精子运动观察

1.4 SOD活性和MDA积累

1.5 LDH活性测定

1.6 扫描电镜观察精子的形态结构

2 实验结果

2.1 精子细胞的一般形态结构

2.2 甲基异柳磷影响精子运动

2.3 甲基异柳磷影响SOD的活性

2.4 甲基异柳磷影响MDA的积累

2.5 甲基异柳磷影响LDH的活性

2.6 甲基异柳磷影响精子细胞的形态与超微结构

3 讨论与结论

结论

参考文献

作者简介

致谢

发表论文

发布时间: 2005-10-26

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