双酚A对小鼠子宫的影响及其作用机制的研究

论文摘要

双酚A（Bisphenol A,BPA）广泛存在于塑料制品中,随着社会生产的迅猛发展,塑料制品的广泛应用,成为人们在生产生活中不可避免接触到的一类环境雌激素。BPA对机体的不良影响,已受到人们的广泛关注。BPA对机体的影响是多方面的,主要包括生殖系统、胚胎发育、神经系统、免疫系统、肿瘤发生等。BPA对雄性生殖系统的影响研究较多,大量动物实验证明,BPA几乎能够引起各种雄性生殖系统异常,对雄性生殖系统的发育和功能有较为广泛的影响。BPA对雌性生殖系统也有影响,BPA与卵巢囊肿、子宫内膜异位症、子宫肌瘤、子宫内膜癌等疾病的发生有密切的关系,并能诱发流产,降低生育率和妊娠率。但目前对BPA对雌性生殖系统影响的研究仍不全面,尤其对其复杂的作用机制的了解仍不够完善。因此,对BPA对小鼠子宫的影响及其分子机制的研究,能够为BPA诱导生殖系统疾病致病机制的研究提供一定的理论和实验依据,以期进一步加深人们对BPA的认识。同时也为BPA诱导肿瘤的预防、治疗及诊断提供依据。本实验主要采用子宫生长实验、RT-PCR,Western-blot及免疫组化等实验方法,研究了BPA处理后去势小鼠子宫湿重、脏器系数变化,ERa、phospho-ERα、ERβ、phospho-ERβ及凋亡基因Bcl-2/Bax在小鼠子宫中的分布及表达。实验结果表明:1)BPA具有雌激素样效应,可使去势小鼠子宫总体呈现增殖趋势,子宫肌层增厚,腺体增多,子宫腔增大等一系列形态学变化。2)BPA可使子宫内雌激素受体表达量增加,可激活ER,磷酸化受体表达量增加,其中子宫内膜、腺上皮ER表达变化明显,表明ER的合成及表达受BPA的调控, BPA的雌激素样效应可能通过ER途径起作用。3)BPA可明显上调Bcl-2基因的表达,并抑制Bax基因的表达,抑制细胞凋亡,促进细胞增殖,但在子宫内膜,腺上皮又上调Bax基因的表达,BPA诱导子宫增殖的同时可能对子宫内膜、腺上皮等功能性细胞有一定的损害。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 环境雌激素
• 1.1.1 环境雌激素的概念
• 1.1.2 环境雌激素与生殖
• 1.2 双酚 A
• 1.2.1 BPA 对雄性生殖的影响
• 1.2.2 BPA 对雌性生殖的影响
• 1.3 BPA 的作用机制
• 1.4 雌激素受体的作用
• 1.5 细胞凋亡的生物学意义
• 1.6 研究的目的和意义
• 2 材料与方法
• 2.1 主要器材与试剂
• 2.1.1 主要器材
• 2.1.2 主要试剂
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 实验动物
• 2.2.2 子宫生长实验
• 2.2.3 RT-PCR 技术
• 2.2.4 Western-blot
• 2.2.5 免疫组织化学
• 2.2.6 数据的统计及分析
• 3 结果与分析
• 3.1 子宫生长实验
• 3.1.1 发情周期子宫
• 3.1.2 处理后小鼠子宫
• 3.2 RT-PCR 检测结果
• 3.2.1 GAPDH 在小鼠子宫中的表达
• 3.2.2 ERa 在小鼠子宫中的表达
• 3.2.3 ERβ在小鼠子宫中的表达
• 3.2.4 Bcl-2 在小鼠子宫中的表达
• 3.2.5 Bax 在小鼠子宫中的表达
• 3.3 Western-blot 结果
• 3.3.1 GAPDH 蛋白在小鼠子宫的表达
• 3.3.2 ERα 蛋白含量表达
• 3.3.3 phospho-ERα 蛋白含量表达
• 3.3.4 ERβ 蛋白含量表达
• 3.3.5 Phospho-ERβ 蛋白含量表达
• 3.3.6 Bcl-2 蛋白含量表达
• 3.3.7 Bax 蛋白含量表达
• 3.4 免疫组化结果
• 3.4.1 ERα 在小鼠子宫的表达
• 3.4.2 Phoshpho-ERα 在小鼠子宫的表达
• 3.4.3 ERβ 在小鼠子宫的表达
• 3.4.4 Phospho-ERβ 在小鼠子宫的表达
• 3.4.5 Bcl-2 在小鼠子宫的表达
• 3.4.6 Bax 在小鼠子宫的表达
• 4 讨论
• 4.1 环境雌激素的检测方法
• 4.2 BPA 的雌激素效应
• 4.3 ER 的表达变化对子宫的影响
• 4.4 凋亡基因 Bcl-2/Bax 表达变化对子宫的影响
• 5 结论
• 致谢
• 参考文献
• 图版及说明
• 攻读学位期间发表的学术论文