论文摘要
鱼类体外寄生指环虫病是危害水产养殖最为严重的寄生虫病害之一。当前，国内外防治主要以化学药物为主，长期使用导致指环虫的抗药性与日俱增，用药量增大，治疗效果下降，成本提高，甚至还产生致畸、致突变等副作用。因此，开发能替代现有药品的无公害、环保型天然植物源杀虫药，以及从天然植物中分离杀虫活性成分，进而进行仿生合成是今后研究的方向和热点。本研究正是以此为出发点开展了活性植物筛选、成分预试、杀虫活性成分的跟踪分离、光谱分析等工作，并取得了以下结果：1．具有杀虫活性植物的筛选：通过药效试验，检测了15种天然植物乙醇提取物对寄生于金鱼的中型指环虫的杀灭活性。试验结果表明：48h内，洋金花、蛇床、鸦胆子、槟榔、云南重楼、木通、牛心朴子、吴茱萸和夹竹桃的最高杀虫率均达70％以上，其中洋金花、蛇床和鸦胆子的最高杀灭率达到100％，并且这几种植物对试验鱼安全性较高；另外，牵牛子、青蒿对指环虫有一定杀灭作用，不仅杀虫浓度高，杀虫率也较低，分别为55％、30％。综合15种植物的杀虫试验效果、药物毒性以及实验操作的实际情况，再结合陕西当地资源情况，选择洋金花作为研究对象。2．洋金花化学成分预试与杀虫活性部位筛选：采用试管法对洋金花化学成分进行预试。结果显示：洋金花以生物碱成分为主，提取物呈弱碱性；用石油醚、氯仿、丙酮、乙酸乙酯、乙醇、蒸馏水六种溶剂对洋金花进行部位提取，采用药效试验观察各部位提取物的杀虫活性，结果表明：洋金花的杀虫活性部位为氯仿提取物浓度为200 mg.L-1（按生药计）。乙醇提取物和乙酸乙酯提取物也有一定的杀虫作用，杀虫最佳浓度分别为400 mg.L-1、250 mg.L-1（按生药计）时，最高杀灭率达85％以上，且金鱼的中毒率较低；石油醚提取物、丙酮提取物和蒸馏水提取物在试验浓度范围内几乎不具备杀虫作用。所以洋金花的氯仿提取物杀虫活性是洋金花主要杀虫活性部位。3．洋金花杀虫活性成分的追踪分离与结构鉴定：采用三级硅胶柱层析法，一级柱以氯仿：甲醇为溶剂系统梯度洗脱，对洋金花的氯仿提取物进行分离，得到A—F等6段混合物，药效试验发现，C段混合物具有较强的杀虫活性，48h内平均杀灭率为95％。二级柱合并C段化合物以石油醚：乙酸乙酯为溶剂系统进行柱层析分离纯化，得到C1—C7段混合物，药效试验发现，C6段混合物具有突出的杀虫活性，48h内的平均杀灭率大于95％。三级柱合并C5、C6和C7段化合物，以石油醚：乙酸乙酯的比例为1.5：1恒定极性洗脱系统对C6段进行分离，得到三种化合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ，药效试验发现，化合物Ⅱ48h内的平均杀灭率为100％，杀虫效果明显优于化合物Ⅰ和Ⅲ。对化合物Ⅱ进行紫外光谱，气质联用色谱分析，结合杨炳友论文EI-MS图谱。推测该化合物可能为醉茄内酯类化合物中的一种物质。
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标签：指环虫论文; 天然植物提取物论文; 洋金花论文; 醉茄内酯类化合物论文; 杀虫活性论文;