同种异体巩膜条带球后植入对豚鼠巩膜和屈光影响的实验研究

同种异体巩膜条带球后植入对豚鼠巩膜和屈光影响的实验研究

论文摘要

第一部分豚鼠眼外肌显微解剖目的:探讨豚鼠眼外肌的种类及其与眼眶的位置关系。方法:选取10周龄的短尾花色豚鼠10只,5只处死后即刻行显微解剖,其余经10%中性福尔马林固定后24小时解剖。结果:豚鼠有七条眼外肌,两条内直肌、上、下直肌和上、下斜肌各一条,视神经旁包绕着眼球缩肌。结论:豚鼠眼外肌结构特别,和人类眼外肌有较大差别。第二部分带状光检影法和红外偏心验光法在豚鼠眼的应用比较目的:比较带状光检影法和红外偏心验光法对豚鼠屈光度的检测结果以及散瞳对屈光度检测的影响。方法:3周龄豚鼠13只,在生理状态和点用1%环戊通后睫状肌麻痹状态下,分别运用带状光检影镜和红外偏心验光仪进行屈光度检测3次,带状光检影检测时间点为同一天的9:00,10:00,11:00,14:00,15:00,16:00,红外偏心验光法为9:30,10:00,11:30,14:30,15:30和16:30,1%环戊通散瞳开始时间为13:00,每5分钟一次,共3次。比较两种检测方法所得结果的稳定性、相关性。结果:带状光检影法散瞳前后所测平均屈光度分别是3.03±0.65(均数±S.E.)和3.30±0.67,同一眼3次测量值的平均相关系数分别是0.979和0.980。红外偏心验光法散瞳前后所测平均屈光度分别是3.25±1.03和3.98±0.97,同一眼3次测量值的平均相关系数分别是0.931和0.962。带状光检影法和红外偏心验光法两种方法检测平均屈光度的相关系数在散瞳前是0.851(p=0.000),散瞳后是0.791(p=0.000)。散瞳前后两种方法本身所得屈光度的差异有统计学意义,结果显著相关(带状光检影法:t=2.945,p=0.046;r=0.982,p=0.000。红外偏心验光法:t=3.494,p=0.002;r=0.980,p=0.000)。散瞳前后两种屈光度检测方法的结果经重复测量方差分析无统计学意义(带状光检影法:F:0.081,p=0.264;红外偏心验光法:F=0.777,p=0.610)。结论:两种检测方法的结果之间有很好的相关性和稳定性,带状光检影法的结果稳定性相对较高。散瞳前后检测结果有差异但显著相关,说明散瞳对检测结果的稳定性没有影响,豚鼠可以在自然生理状态下进行屈光度检测。第三部分豚鼠同种异体巩膜球后植入的组织学变化目的:探讨同种异体巩膜材料在豚鼠眼球后植入的组织学表现和转归。方法:24只4周龄豚鼠分为4组:A:条带松散植入组;B:条带贴附植入组;C:条带贴附植入加甲强龙组;D:条带贴附植入加生理盐水组。巩膜条带来自10周龄正常豚鼠。C、D两组在手术结束时、术后3和6天分别注射甲泼尼松龙琥珀酸钠水溶液(4mg/0.1ml)和注射用生理盐水0.1ml。术后9天和51天分别处死豚鼠取出手术眼进行显微结构和超微结构检查。结果:术后9天,各组植入物均出现肿胀和炎性包裹层。条带松散植入组包裹层细胞排列稀疏、植入物肿胀最明显;条带贴附植入加甲强龙组植入物肿胀稍轻、包裹层致密、炎症细胞活跃;另外两组表现介于这两组之间。术后51天,松散植入组巩膜条带大部吸收,贴附植入加甲强龙组巩膜条带和受体眼球贴附紧密,大量成纤维细胞浸润,另外两组巩膜条带部分吸收。各组均可见分泌胶原的成纤维细胞散在。结论:豚鼠同种异体巩膜条带植入术后,早期有明显炎症过程,巩膜条带的植入方式和术后炎症反应的程度会影响植入的早期形成的包裹囊和巩膜条带的结局。第四部分同种异体巩膜球后植入对豚鼠屈光度的影响和分析目的:评价同种异体巩膜条带植入后豚鼠屈光度变化并分析可能原因。方法:实验1:巩膜条带对豚鼠巩膜屈光度的影响。将4周龄豚鼠分为四组:A:正常对照组、B:假手术组、C:2mm巩膜条带组、D:3mm巩膜条带组。每组10只,C组、D组分别植入2mm和3mm宽的同种异体巩膜条带。在术前和术后3天、6天、9天、16天、23天、30天、37天、44天、51天检测豚鼠角膜曲率、屈光度、眼轴。重复测量的方差分析比较结果。实验2:豚鼠同种异体巩膜条带植入后受体巩膜MMP-2 mRNA表达的变化。将豚鼠分为正常对照组、假手术组和手术组,每组4只,用RT-PCR和real—timePCR检测术后6天,术后37天三组动物的MMP-2 mRNA水平。单因素方差分析比较结果。实验3:甲基强的松龙对豚鼠同种异体巩膜植入后屈光度影响的干预。将4周龄豚鼠分为:A:对照组、B:正常+甲强龙水溶液组、C:3mm巩膜条带组、D:3mm巩膜条带+甲强龙水溶液组、E:3mm巩膜条带+灭菌注射用水组(简称:3mm巩膜条带+水组)。每组10只。在术毕、术后3天、术后6天,B组、D组、分别球周注射甲强龙水溶液、E组注射灭菌注射用水。在术前和术后3天、6天、9天、16天、23天、30天、37天、44天、51天检测豚鼠角膜曲率、屈光度、眼轴。重复测量的方差分析比较屈光度变化趋势,单因素方差分析比较术后9天各指标的变化。结果:实验1:手术眼术后屈光度有一过性的下降过程,各组不同时间点屈光度变化具有统计学意义(F=14.477,P=0.000),组间两两比较显示,3mm巩膜条带组与对照组(P=0.005)、3mm巩膜条带组及假手术组(P=0.004)比较,屈光度变化的差异具有统计学意义。组间效应分析显示,屈光度差异(F=4.302,P=0.012)、玻璃体腔差异(F=3.571,P=0.025)具有统计学意义,即组间因素对屈光度变化趋势和玻璃体腔变化趋势有影响。实验2:术后6天各组巩膜MMP-2 mRNA的表达水平,各组总变异具有统计学意义(F=3.591,P=0.012),与正常眼相比,假手术眼的对侧眼(P<0.05)和手术眼的对侧眼(P<0.01)都有MMP-2 mRNA升高,手术眼MMP-2下降,和对侧眼之间的差异有统计学意义(P=0.018)。术后37天各组MMP-2 mRNA的表达水平,各组总变异具有统计学意义(F=2.819,P=0.040)。与正常组左眼相比,假手术组对侧眼(P=0.035)、手术组对侧眼(P=0.034)的MMP-2 mRNA升高有统计学意义。手术眼MMP-2 mRNA表达下降,和对侧眼的差异有统计学意义(P=0.011)。实验3:3mm巩膜条带加甲强龙组屈光度下降被部分抑制,组问效应分析即组间因素对屈光度变化存在影响(F=3.434,P=0.018)。术后9天的内各组屈光度变化,经ANOVA分析,巩膜条带植入加甲强龙水溶液组与单纯巩膜条带植入组(P=0.008)、巩膜条带植入加甲强龙水溶液组与巩膜条带植入加水组(P=0.013)差异具有统计学意义。术后9天眼轴变化经单因素方差分析显示,对照组与3mm条带组(P=0.016)、3mm条带加水组(P=0.032)差异有统计学意义,正常加甲强龙水溶液组与3mm条带组(P=0.002)、3mm条带加水组(P=0.004)差异也有统计学意义,但是对照组、正常对照加甲强龙组和3mm条带加甲强龙水溶液组相比差异都没有统计学意义。结论:同种异体巩膜条带植入后,可能因为排斥反应导致豚鼠眼屈光度存在下降再上升的波动过程,此过程中手术眼的MMP-2 mRNA表达下降,而对侧眼的MMP-2的表达升高。屈光度的变化可以部分被糖皮质激素抑制。提示在开展后巩膜加固手术过程中,必须对植入物的组织相容性、稳定性和术后炎症程度予以足够的重视。

论文目录

  • 主要英文缩略语
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 研究背景
  • 第一部分
  • 前言
  • 1 材料和方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 参考文献
  • 第二部分
  • 前言
  • 1 材料和方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 参考文献
  • 第三部分
  • 前言
  • 1 材料和方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 参考文献
  • 第四部分
  • 前言
  • 1 材料和方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 参考文献
  • 本课题创新点
  • 综述一
  • 参考文献
  • 综述二
  • 参考文献
  • 在读期间撰写和发表论文
  • 致谢
  • 相关论文文献

    • [1].固定性内斜视的手术治疗[J]. 国际眼科杂志 2011(09)

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