米诺环素铁螯合作用治疗脑出血的机制探讨

论文摘要

目的：铁在脑出血（ICH）后引起的脑损伤中起重要作用。既往研究表明四环素类衍生物米诺环素（MC）通过抑制小胶质细胞提供神经保护作用。尽管米诺环素同时也是一个铁螯合剂,但其对于铁引起的脑损伤是否有效并无报道。本研究旨在探讨米诺环素在铁引起的脑损伤中的治疗作用。方法：SD大鼠基底节注射（1）50μl生理盐水,FeCl2（0.5mM）或FeCl3（0.5mM）;（2）50μl FeCl2+vehicle, FeCl2+MC （0.5 or 1.5mM）或FeCl2+MIF （microglia inhibitory factor,0.5mM）; （3） 50μl of FeCl3 （0.5mM）+ vehicle, FeCl3+MC（0.5mM）。24小时后处死,鼠脑用于脑水含量,离子含量检测（?）, Fluoro-Jade C, PANT, TUNEL染色；免疫组化和蛋白印迹。结果：基底节注射亚铁或正铁都会引起明显的水含量上升,但亚铁引起的水肿更明显。混合注射米诺环素可以显著减轻亚铁或正铁引起的脑水肿,细胞死亡,DNA损伤,血脑屏障破坏以及H0-1表达上调。但另外一种小胶质细胞抑制剂MIF无明显效果。同时米诺环素还明显降低转铁蛋白和铜蓝蛋白的表达。Fvgt结论：结果证明米诺环素减轻铁引起的脑损伤以及铁相关蛋白的上调。米诺环素的神经保护作用不只局限于小胶质细胞抑制剂,同时通过直接铁螯合作用达到保护脑组织的效果。目的：铁在脑出血（ICH）后引起的脑损伤中起重要作用。铁引起的脑水肿高峰一般在术后24小时。第一部分研究表明米诺环素（MC）在建模一天后通过铁螯合机制提供神经保护作用。第二部分主要探讨米诺环素在铁引起脑损伤中长期的治疗作用。方法：SD大鼠基底节区注射50μ1生理盐水,FeCl2 （0.5mM）或FeCl2+MC （0.5mM）。大鼠建模后72小时处死.鼠脑用于HE染色,蛋白印迹和免疫组化分析。结果：基底节区注射FeCl2三天后,脑组织肿胀明显增加。混合注射米诺环素明显减轻亚铁引起的脑肿胀和血脑屏障破坏和HO-1含量上升。米诺环素同时减少铁蛋白阳性细胞数以及铁相关蛋白如转铁蛋白（Tf）,转铁蛋白受体（TfR）,铜蓝蛋白（CP）表达的上调。结论：实验结果证明3天后,米诺环素明显减轻铁引起的脑损伤。米诺环素同时明显降低铁相关蛋白的上调。米诺环素在铁引起的脑损伤中起到神经保护作用,可能与其铁螯合机制密切相关。目的：铁在脑出血（ICH）后引起的脑损伤中起重要作用。体外实验证实米诺环素通过螯合铁减轻神经损伤。本实验主要验证脑出血后米诺环素是否通过铁螯合机制提供神经保护作用。方法：本实验分两部分：（1）大鼠右侧基底节注射10μL或100μL自体血。三天后处死,测脑水含量及血清总铁含量。（2）大鼠右侧基底节注射100μL自体血,用生理盐水或米诺环素治疗。于1天,3天,7天后处死,检测血清总铁含量,并进行免疫组化及蛋白印迹分析。结果：脑出血后血清总铁水平上升。米诺环素治疗3天及7天后,血清总铁水平降低。米诺环素减轻脑出血后神经元损伤,减少脑非血红素铁及铁相关蛋白的表达。结论：米诺环素治疗显著降低脑出血后血液及脑组织中铁的上调。米诺环素减轻脑出血后的脑损伤。米诺环素对于脑出血的治疗机制可能不仅仅局限于小胶质细胞抑制剂,而是同时通过直接的铁螯合作用达到神经保护的效果。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 第一部分 米诺环素在铁引起的脑损伤中的治疗作用
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 附图
• 第二部分 米诺环素治疗铁引起脑损伤的进一步探讨
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 附图
• 第三部分 米诺环素通过铁螯合作用减轻脑出血后脑损伤
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 参考文献
• 致谢