包埋脱水法保存条斑紫菜自由丝状体的研究

论文摘要

中文摘要:本文以条斑紫菜（Porphya yezoensis Ueda 03C、03D）自由丝状体为试验材料,用包埋脱水法进行保存。主要研究了包埋后超低温（-196℃）保存。在超低温保存中将丝状体包埋在含3%褐藻酸钙的胶球中,经硅胶砐湿法脱水后,探讨了脱水速率、胶球含水量及化冻温度对冰冻保存存活率的影响。结果表明: 1.　脱水速率对存活率的影响包埋后,分别以1%、5%、7.5%、10%、15%、20%的平均脱水速率（%含水量/h）进行脱水,结果两种株系都是在7.5%含水量/h 的较高的脱水速率下获得最高存活率。2.　含水量对存活率的影响以7.5%含水量/h的脱水速率脱水,胶球含水量对冰冻前的存活率影响不大,但对冰冻保存后的存活率影响很大。两种株系的最佳含水量都为25%,丝状体03C冰冻保存后存活率可达68.8%,丝状体03D 的存活率也可达到30.1%。3.　化冻温度的影响以丝状体03D 为研究对象,选用最佳脱水速率及最佳含水量点冰冻后,分别用0、20、30、40、50℃进行化冻。结果在30℃-50℃的较高化冻温度下,条斑紫菜丝状体03D的存活率显著高于0℃-20℃下的存活率。其中,30℃为最佳化冻温度,存活率可达到34.8%。 　　同时又初步探索了常低温保存。在包埋脱水法常低温保存中以丝状体03D 为试材,用包埋脱水法进行了常低温保存的研究。用相同方法包埋脱水后,密封放在20℃（光、暗）、4℃、-20℃条件下保存。结果为在4℃条件下较低的含水量的材料保存的时间最长且有很高的存活率。

论文目录

• 中文摘要
• 前言
• 第一部分
• 1材料方法
• 1.1 材料来源及其培养
• 1.2 主要试剂与配制
• 1.3 主要仪器设备
• 1.4 实验方法
• 1.4.1 包埋
• 1.4.2 脱水及含水量的测定
• 1.4.3 冰冻及化冻
• 1.4.4 化冻后的恢复、再培养
• 1.4.5 存活率的测定
• 1.4.6 脱水速率对存活率的影响
• 1.4.7 含水量对存活率的影响
• 1.4.8 化冻方法对存活率的影响
• 2. 结果与分析
• 2.1 不同提取剂对叶绿素提取效果的影响
• 2.2 脱水速率对存活率的影响
• 2.3 胶球含水量对存活率的影响
• 2.4 化冻温度对存活率的影响
• 2.5 冷冻保存后条斑紫菜丝状体的形态观测
• 3. 讨论
• 3.1 脱水速率对存活率的影响
• 3.2 胶球含水量对存活率的影响
• 3.3 化冻温度对存活率的影响
• 4. 小结
• 第二部分
• 结果与讨论
• 含水量对存活率的影响
• 保存条件对存活率的影响
• 保存后条斑紫菜丝状体的形态观测
• 小结
• 结论
• 综述
• 1. 种质保存技术概述
• 1.1 种质保存的目的、意义
• 1.2 植物种质保存技术的主要方法
• 1.2.1 种子保存
• 1.2.2 建立植物园或种质资源圃（库）
• 1.2.3 植物离体细胞、组织及器官的常规保存
• 1.2.3.1 一般保存
• 1.2.3.2 缓慢生长法
• 1.2.4 超低温保存
• 2. 植物种质的超低温保存
• 2.1 植物种质超低温保存的意义
• 2.2 植物种质超低温保存技术的原理及理论基础
• 2.3 植物物种质超低温保存方法
• 2.3.1 一步法
• 2.3.2 两步法
• 2.3.3 玻璃化方法
• 2.3.4 包埋脱水法
• 2.3.5 多种方法的结合
• 2.4 植物种质超低温保存的程序和主要影响因素
• 2.4.1 材料的选择
• 2.4.2 冰冻前的预培养
• 2.4.3 冰冻保护剂
• 2.4.4 降温冰冻方法
• 2.4.5 贮藏
• 2.4.6 化冻及再培养
• 3. 藻类种质超低温保存的研究进展
• 3.1 藻类超低温保存的意义
• 3.2 影响藻类超低温保存存活率的主要因素
• 3.2.1 细胞因素
• 3.2.2 物理因素
• 3.3 存活率的鉴定
• 3.4 藻类超低温保存技术的改进和研究进展
• 4. 包埋脱水法冰冻保存技术
• 4.1 褐藻胶包埋技术
• 4.2 脱水
• 4.2.1 直接干燥脱水
• 4.4.2 高浓度预处理
• 4.2.3 硅胶吸附法脱水
• 4.2.4 几种方法相结合
• 4.3 包埋脱水技术的特点
• 参考文献
• Abstract
• 致谢