猫睫状体及外伤后aPVR慢性低眼压模型中Cx43表达的实验研究

论文摘要

目的 研究正常猫睫状体细胞间直接通讯缝隙连接（GJ）蛋白Cx43的表达及分布;进而探索外伤后前部增殖性玻璃体视网膜病变（aPVR）慢性低眼压模型中,Cx43蛋白在伤后不同时间采样点表达位置和表达量的变化,并将其与相应的眼压发展变化趋势作比较,探讨Cx43构成的GJ在睫状体房水分泌中的重要意义。 方法 1.采用文献报道已建立的外伤后aPVR慢性低眼压模型,用猫作为实验动物,HE染色作病理观察。Schi（?）tz眼压计测量正常与伤后各采样时间点猫眼IOP,并采用双砝码对读校正,分析AIOP（IOP伤后-IOP伤前）变化趋势。 2.采用荧光免疫组织化学方法,通过荧光显微镜以及电镜观察Cx43在猫正常睫状体的表达分布,以及伤后其各采样时间点的分布变化。 3.利用免疫印迹（Western blotting）技术检测正常及伤后各采样时间点猫睫状体中Cx43蛋白表达量的差别和变化趋势。 结果 1.IOP的变化:伤后6小时、12小时IOP均略升高,1天实验组伤后眼压比伤前升高约1.875mmHg（AIOP>0）;此后眼压逐渐下降,其中1-3天以及1-4周时间段IOP下降幅度较大,4周时AIOP已达10.55mmHg（AIOP<0）。 2.猫睫状体上皮PE细胞呈立方状、NPE细胞高柱状,与人相应

论文目录

• 缩略词表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 外伤后aPVR慢性低眼压模型及眼压测定的校正
• 材料和方法
• 1.材料
• 2.方法
• 2.1.动物模型的复制
• 2.2.动物模型的分组
• 2.3.IOP的测量和校正
• 2.4.伤后眼球处理和病理学观察
• 3.统计分析
• 结果
• 1.眼压变化
• 1.1.未校正IOP的测量及变化
• 1.2.IOP经校正后所反映的眼压变化
• 1.3.校读前后眼压变化（△IOP）趋势曲线的比较
• 2.猫眼球壁硬度
• 3.HE染色及脱色素后对睫状体结构和病理学形态观察
• 讨论
• 1.眼压实验性测量与校正
• 2.猫睫状体正常和伤后形态观察
• 3.关于一些实验方法的讨论
• 结论
• 参考文献
• 第二部分 猫睫状体Cx43表达及aPVR模型Cx43表达分布的变化
• 材料和方法
• 1.材料
• 2.方法
• 2.1.切片制备
• 2.2.免疫荧光染色步骤
• 2.3.电镜标本的取材、固定
• 结果
• 1.猫正常睫状体Cx43表达及分布
• 2.猫aPVR模型不同时间点Cx43表达分布的变化
• 3.猫睫状体缝隙连接（GJ）的电镜观察
• 讨论
• 1.Cx43表达位置决定了其功能的重要性
• 2.猫aPVR模型伤后各时间点Cx43表达位置变化的意义
• 3.关于一些实验方法问题的讨论
• 结论
• 参考文献
• 第三部分 猫aPVR模型中睫状体Cx43表达量的变化及其与眼压变化的关系
• 材料和方法
• 1.材料
• 2.方法
• 2.1.取材及冻存
• 2.2.组织蛋白样本制备
• 2.3.电泳与转膜
• 2.4.杂交
• 2.5.曝光、显影
• 3.Western Blot条带分析
• 4.统计分析与曲线拟合
• 结果
• 1.猫睫状体Cx43 正常和aPVR伤后表达量的变化
• 2.Cx43表达量的变化与AIOP的相关性
• 讨论
• 1.猫睫状体上皮Cx43蛋白表达量变化的机理及意义
• 2.猫睫状体上皮Cx43蛋白表达量变化与外伤后低眼压的关系
• 结论
• 参考文献
• 全文总结与展望
• 综述
• 攻读学位期间发表文章情况
• 致谢
• 附图