论文摘要
翡翠贻贝（Perna viridis）别名青口螺,广泛分布于东海南部和南海,其繁殖能力很强,易于养殖。但由于缺乏市场及有效的加工手段,其资源未能得到充分的利用。动脉粥样硬化、脂肪肝、心脑血管疾病己成为危害人类健康的主要疾病,而脂质代谢异常,特别是血胆固醇水平升高是基本易患因素。因此,如何有效调节血脂,是目前营养学研究的热点之一。本论文研究了翡翠贻贝糖胺聚糖的分离纯化条件及其理化性质,探讨翡翠贻贝糖胺聚糖对高脂小鼠机体血脂的调节作用,同时研究了翡翠贻贝糖胺聚糖对高脂小鼠抗氧化能力的影响,以期为翡翠贻贝糖胺聚糖营养价值评价的建立提供理论依据,为翡翠贻贝的开发提供参考,为贝类的发展做出一定贡献。主要研究内容如下:（1）在最优条件下大量提取糖胺聚糖粗品（PVG）,通过等电点除蛋白、超滤浓缩得精制品（PVG-1）,并采用DEAE-52纤维素离子交换柱层析法对精制品进行纯化,分离出来含量较高的两个极分（PVG-1-1,PVG-1-3）,再经过Sephadex G-200凝胶柱进行进一步分离纯化,得到两个极分（PVG-1-1a,PVG-1-3a）。检测各组分的组成成分,PVG、PVG-1、PVG-1-1、PVG-1-3、PVG-1-1a、PVG-1-3a测定的总糖含量分别是20.34%、26.51%、40.64%、37.56%、49.56%、43.12%;糖胺聚糖含量分别是26.81%、45.36%、66.78%、60.45%、75.56%、69.78%;总蛋白含量分别是33.43%、18.12%、13.85%、11.89%、10.75%、8.45%;硫酸基含量分别是4.53%、6.89%、12.47%、14.85%、19.65%、21.56%;氨基半乳糖含量分别是2.32%、3.71%、6.64%、8.65%、7.67%、10.56%;糖醛酸含量分别是5.88%、7.89%、12.78%、10.67%、19.85%、16.56%;氨基己糖含量分别为10.21%、19.36%、29.61%、33.42%、35.67%、39.67%,并用高效液相对PVG-1-1a、PVG-1-3a纯度进行鉴定,各有一个吸收峰,说明为均一多糖。用高效液相色谱法对PVG-1-1a、PVG-1-3a进行分子量测定,PVG-1-1a、PVG-1-3平均相对分子质量为5.20×105Da和2.58×105Da;采用红外光谱法分析PVG-1-1a、PVG-1-3a特征基团和结构等,PVG-1-1a、PVG-1-3a都有氨基多糖的特征吸收。（2）取雄性昆明小鼠72只,每组12只。随机分正常对照组（灌饲生理盐水）、模型对照组（灌饲生理盐水）、阳性对照组（灌饲辛伐他汀5mg/kg）、翡翠贻贝糖胺聚糖低剂量组（50mg/kg）、中剂量组（100mg/kg）、高剂量组（200mg/kg）。正常对照组动物从试验开始至结束用普通饲料喂养,其他五组动物均喂高脂饲料。30d后测定小鼠血清总胆固醇（TC）,甘油三酯（TG）,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）,低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和一氧化氮（NO）含量,肝脏TC、TG含量,血清卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT）以及血清和肝脏脂蛋白脂酶（LPL）、肝脂酶（HL）活性。结果表明翡翠贻贝糖胺聚糖对小鼠体重增长无影响（P﹥0.05）,中、高剂量组可以提高肝指数（P﹤0. 05）,降低肾指数（P﹤0.05）。翡翠贻贝糖胺聚糖中、高剂量组能明显降低模型小鼠血清TC,TG,LDL-C含量和动脉粥样硬化指数（AI）（P﹤0.01）,显著降低肝脏TC（P﹤0.01）、TG（P﹤0.01）含量,提高血清HDL-C和NO（P﹤0.01）含量,提高血清LCAT,血清和肝脏HPL、HL（P﹤0.05或P﹤0.01）活性。说明翡翠贻贝糖胺聚糖有显著的降血脂效应,该作用可能与翡翠贻贝糖胺聚糖能明显增强LCAT、LPL、HL酶活性,提高HDL-C、NO水平有关。（3）翡翠贻贝糖胺聚糖体外抗氧化作用研究:以抗氧化剂维生素C为对照,选用OH自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基和体外抗肝组织自发性脂质过氧化清除实验来验证翡翠贻贝糖胺聚糖体外抗氧化作用的强弱。当PVG-1浓度达到8mg/mL时,对·OH的清除率最高,为55.17%,同样浓度下PVG的·OH清除率为44.59%。清除DPPH自由基的试验结果表明,当浓度增加到8mg/mL时,PVG-1的清除率达到61.96%,PVG的清除率达到45.09%。在PVG浓度为6mg/mL时,对O2-·的清除率达到最大,为56.98%,在PVG-1浓度为5mg/mL时,对O2-·的清除率达到最大,为68.36%。当PVG浓度为7 mg/mL时,LPO清除率为46.78%,在PVG-1浓度为7 mg/mL时,LPO清除率为62.56%。可见翡翠贻贝糖胺聚糖有很好的清除自由基效果,且抗氧化效果有明显的量效关系。研究了PVG-1对高脂血症小鼠体内抗氧化酶活力的影响。检测了小鼠血清和肝脏总抗氧化能力（T-AOC）,小鼠血清和肝脏、脑中丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）活力。结果表明,PVG-1中、高剂量组能提高模型对照组小鼠血清和肝脏T-AOC含量（P﹤0.05或P﹤0.01）,PVG-1中、高剂量组能显著降低高脂血症小鼠血清、肝脏和脑中MDA（P﹤0.01）含量,提高血清GSH-Px（P﹤0.05或P﹤0.01）、CAT（P﹤0.01）、SOD（P﹤0.01）活力;肝脏GSH-Px（P﹤0.01）、CAT（P﹤0.05或P﹤0.01）、SOD活力（P﹤0.01）;脑中GSH-Px（P﹤0.01）、CAT（P<0.01）、SOD（P<0.05或P<0.01）活力。提示PVG-1能显著提高机体内源性抗氧化酶活性,降低体内脂质过氧化水平,起到拮抗动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）的作用。
论文目录
相关论文文献
- [1].翡翠贻贝多糖抑制体外培养肝癌细胞生长的研究[J]. 中医临床研究 2017(13)
- [2].翡翠贻贝酶解液体外降压活性评价方法研究[J]. 安徽农业科学 2020(07)
- [3].翡翠贻贝室内人工育苗技术研究[J]. 科学养鱼 2012(01)
- [4].抑食金球藻对翡翠贻贝生长及摄食的影响研究[J]. 海洋环境科学 2019(04)
- [5].抑食金球藻对翡翠贻贝抗氧化酶系统的影响[J]. 水产学报 2018(06)
- [6].翡翠贻贝糖胺聚糖的体外抗氧化活性研究[J]. 现代食品科技 2011(07)
- [7].深圳大鹏澳海域翡翠贻贝中麻痹性贝类毒素的含量特征及生物相关因子分析[J]. 中国渔业质量与标准 2018(05)
- [8].翡翠贻贝提取物对小鼠急性肝损伤的保护作用[J]. 现代食品科技 2016(08)
- [9].三唑磷农药对翡翠贻贝性激素水平和性腺损伤效应的研究[J]. 南方水产科学 2018(02)
- [10].翡翠贻贝粗多糖降血脂作用的研究[J]. 食品科学 2012(01)
- [11].翡翠贻贝三个野生群体的生化遗传分析[J]. 海洋通报 2008(01)
- [12].翡翠贻贝肉复合酶解物的抗疲劳作用[J]. 中国食品学报 2012(11)
- [13].翡翠贻贝CYP4基因克隆及其表达水平分析[J]. 热带海洋学报 2010(04)
- [14].翡翠贻贝副肌球蛋白的特性及在模拟胃肠液中的消化[J]. 食品科学 2019(06)
- [15].翡翠贻贝多糖对荷瘤小鼠的抗肿瘤和免疫功能调节作用[J]. 中国现代药物应用 2010(09)
- [16].BaP和DDT暴露对翡翠贻贝胚胎重要酶活性影响的比较研究[J]. 生态毒理学报 2018(03)
- [17].温度胁迫对紫贻贝与翡翠贻贝生理活动的影响和Hsp27的响应[J]. 集美大学学报(自然科学版) 2019(01)
- [18].翡翠贻贝土池人工育苗技术[J]. 科学养鱼 2013(04)
- [19].翡翠贻贝外套膜转录组及贝壳珍珠质层和肌棱柱层蛋白质组分析[J]. 中国生物化学与分子生物学报 2018(10)
- [20].翡翠贻贝不同醇沉物体外抗氧化活性研究[J]. 食品与发酵工业 2017(06)
- [21].翡翠贻贝内脏团抗氧化防御系统对菲胁迫的生物响应[J]. 应用与环境生物学报 2011(04)
- [22].翡翠贻贝营养粉改善生长发育功能研究[J]. 食品研究与开发 2009(04)
- [23].翡翠贻贝多糖免疫调节作用研究[J]. 食品研究与开发 2009(05)
- [24].两种海洋贝类多糖的提取及其生物活性评价[J]. 南方农业学报 2014(10)
- [25].叶片山海绵共附生细菌的防污活性研究[J]. 厦门大学学报(自然科学版) 2015(03)
- [26].菲和苯并(b)荧蒽曝露对翡翠贻贝外套膜的氧化胁迫及损伤[J]. 南方水产科学 2011(04)
- [27].腹泻性贝毒在翡翠贻贝中的积累、排出及其对HSP70表达的影响[J]. 暨南大学学报(自然科学与医学版) 2009(05)
- [28].翡翠贻贝贝壳的微结构研究[J]. 广西大学学报(自然科学版) 2011(06)
- [29].翡翠贻贝足蛋白作为生物黏合剂的提取及应用[J]. 生物医学工程学杂志 2010(06)
- [30].广东沿海贝类4种重金属含量分析和评价[J]. 南方水产 2008(06)