大型海藻龙须菜化学成分及其对中肋骨条藻化感作用研究

论文摘要

本文提取、分离和鉴定了大型海藻龙须菜（Gracilaria lemaneiformis）的化学成分,初步阐释了龙须菜对中肋骨条藻（Skeletonema costatum）化感作用机理。主要结果如下：利用多种吸附材料和分离方法（包括常压硅胶柱层析、反向硅胶柱层析、凝胶Sephadex LH-20柱层析、D101大孔树脂以及HPLC等）,对龙须菜95%乙醇提取物进行了分离,共得到15个化合物并进行了结构鉴定。这些化合物包括3个糖脂类化合物：1-O-棕榈酸-3-O-β-D-吡半乳糖甘油酯（1-O-Palmitoyl-3-O-P-D-galactopyranosyl glycerol,1）、1-O-棕榈酸-2-O-棕榈油酸-3-O-p-D-吡喃半乳糖甘油酯（1-O-Palmitoyl-2-O-palmitoleoyl-3-O-β-D-galactopyranosyl glycerol,2）和1-O-棕榈酸-2-O-油酸-3-O-β-D-吡喃半乳糖甘油酯（1-O-Palmitoyl-2-O-oleoyl-3-O-β-D-galactopyranosyl glycerol,3）;2个脂肪酸类化合物：棕榈酸（Palmitic acid,4）和亚油酸（Linoleic acid,5）;2个核苷类化合物：尿嘧啶核苷（Uridine,6）和腺嘌呤核苷（Adenosine,7）;3个酰胺类化合物：多鳞番荔枝酮（Squamolone,10）、2-亚乙基-3-甲基琥珀酰亚胺（2-ethylidene-3-methylsuccinimide,11）和N-苯乙基乙酰胺（N-Phenethylacetamide,12）;2个酚类化合物：邻苯二甲酸丁酯异丁酯（Butylisobutyl phthalate,8）和1,4-二苄氧基苯酚（1,4-Dibenzoyloxybenzene,9）;2个萜类化合物：黑麦草内酯（Loliolide,13）和3β-hydroxy-5α, 6a-epoxy-7-megastigmen-9-one （14）；1个其他类化合物：8-羟基-4E,6E-辛二烯-3-酮（8-Hydroxy-4E,6E-octadien-3-one,15）。所有化合物均首次从龙须菜中分离得到,其中,化合物8-Hydroxy-4E,6E-octadien-3-one （15）为新化合物。赤潮藻活性筛选实验结果表明,在分离得到的12种化合物中,亚油酸的抑制效果最好,亚油酸对中肋骨条藻的IC50值为23.17μmol/L;2-亚乙基-3-甲基琥珀酰亚胺的抑制效果最差,在浓度330μmol/L时,其抑制率仅达到19.8%,无法得出其ICso值。亚油酸对中肋骨条藻细胞增值有重要影响。高浓度组细胞的生长明显受到化感物质亚油酸的胁迫,100μmol/L浓度组在72 h时,其细胞密度仅为对照组的16%。较低浓度的亚油酸对中肋骨条藻的超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量在短时间内均有促进作用,随着亚油酸暴露时间的延长和浓度增大,中肋骨条藻超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量逐渐下降。亚油酸对中肋骨条藻细胞亚显微结构有重要影响。亚油酸可导致中肋骨条藻细胞膜、叶绿体、线粒体、细胞核等亚显微结构受到不同程度的破坏。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 绪论
• 1.1 大型海藻龙须菜栽培及其环境意义
• 1.1.1 龙须菜概述
• 1.1.2 龙须菜栽培研究概况
• 1.1.3 龙须菜对污染海域的生态修复
• 1.1.4 龙须菜对赤潮藻化感作用研究概况
• 1.2 化感作用及其应用研究概况
• 1.2.1 化感作用的定义及发展概况
• 1.2.2 化感作用研究方法
• 1.2.3 化感物质的种类
• 1.2.4 化感物质收集及分离鉴定
• 1.2.5 化感作用的特点及作用机理
• 1.2.6 大型海藻化感作用研究概况
• 1.4 赤潮研究概况
• 1.4.1 赤潮的成因
• 1.4.2 赤潮的危害
• 1.4.3 赤潮的预防与治理
• 1.5 本研究目的与内容
• 1.5.1 研究目的
• 1.5.2 研究内容
• 2 龙须菜化学成分分离和结构鉴定
• 2.1 化学成分的提取与分离
• 2.1.1 材料和试剂仪器
• 2.1.2 化学成分提取
• 2.1.3 化学成分分离
• 2.2 化学成分结构鉴定
• 2.2.1 仪器与方法
• 2.2.2 化合物结构式
• 2.2.3 结构解析
• 2.2.4 化合物的物理常数和波谱数据
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 糖脂类化合物
• 2.3.2 脂肪酸类化合物
• 2.3.3 核苷类化合物
• 2.3.4 酰胺类化合物
• 2.3.5 酚类化合物
• 2.3.6 萜类化合物
• 3 龙须菜化学成分对赤潮藻化感作用的活性筛选
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 实验材料、仪器及试剂
• 3.1.2 实验方法
• 3.2 结果与讨论
• 3.2.1 糖脂类化合物对中肋骨条藻生长影响
• 3.2.2 脂肪酸类化合物对中肋骨条藻生长影响
• 3.2.3 核苷类化合物对中肋骨条藻生长影响
• 3.2.4 酰胺类化合物对中肋骨条藻生长影响
• 3.2.5 萜类化合物对中肋骨条藻生长影响
• 3.2.6 新化合物对中肋骨条藻生长影响
• 3.3 小结
• 4 亚油酸对中肋骨条藻化感作用机理的初步研究
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 实验方法
• 4.1.3 分析测定
• 4.2 结果与讨论
• 4.2.1 亚油酸对中肋骨条藻细胞增殖的影响
• 4.2.2 亚油酸对中肋骨条藻叶绿素a的影响
• 4.2.3 亚油酸对中肋骨条藻丙二醛的影响
• 4.2.4 亚油酸对中肋骨条藻细胞超氧化物歧化酶活性的影响
• 4.2.5 亚油酸对中肋骨条藻细胞亚显微结构的影响
• 5 结论与展望
• 5.1 结论
• 5.2 展望
• 参考文献
• 已发表和待发表的文章
• 致谢
• 附录Ⅰ 化合物结构式及名称
• 附录Ⅱ 化合物部分波谱图
• 1. 化合物1 部分波谱图
• 2. 化合物2 部分波谱图
• 3. 化合物3 部分波谱图
• 4. 化合物4 部分波谱图
• 5. 化合物5 部分波谱图
• 6. 化合物6 部分波谱图
• 7. 化合物7 部分波谱图
• 8. 化合物8 部分波谱图
• 9. 化合物9 部分波谱图
• 10. 化合物10 部分波谱图
• 11. 化合物11 部分波谱图
• 12. 化合物12 部分波谱图
• 13. 化合物13 部分波谱图
• 14. 化合物14 部分波谱图
• 15. 化合物15 部分波谱图