全反式维甲酸通过ERK1/2信号通路抑制结肠癌细胞增殖

论文摘要

研究背景和目的:结肠癌是消化道常见的恶性肿瘤,大约50%结肠癌发生与Ras基因突变有关。大量研究表明Ras-MEK1/2-ERK1/2信号途径在多种肿瘤（包括结肠癌）的发生、发展及转移过程中处于异常活化状态。维甲酸（retinoi acid）属于维生素A类化合物家族,因为羧基方向不同而分为两种异构体,即全反式维甲酸（ATRA）和顺式维甲酸。ATRA能够诱导多种肿瘤细胞分化或抑制肿瘤细胞的增殖。故而本次实验旨在探讨全反式维甲酸（ATRA）是否通过作用ERK1/2信号通路抑制结肠癌细胞增殖及可能的分子机制。方法:MTT法检测示ATRA能够抑制结肠癌细胞增殖,RT-PCR及Western Blot法检测经ATRA处理的结肠癌LS174T细胞中MEK1/2-ERK1/2的表达水平。流式细胞仪测定LS174T细胞经ATRA与PD98059（MEK1/2的特异性抑制剂）联合处理后的凋亡水平。结果:MTT法检测示ATRA抑制结肠癌细胞增殖;RT-PCR及Western Blot法示ATRA能提高LS174T细胞中ERK2 mRNA水平,增强MEK/ERK蛋白表达,促进ERK磷酸化。PD98059与ATRA联用,部分降低结肠癌细胞p-ERK表达,PD98059部分增强ATRA诱导结肠癌细胞凋亡作用。结论:ATRA可以抑制结肠癌细胞增殖,其对肿瘤的诱导凋亡作用可能是通过包含MEK/ERK信号途径在内的多条信号通路进行的。

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Abstract

缩略词表

前言

材料与方法

一、材料

（一）主要的试剂材料

（二）主要的仪器

二、方法

（一）结肠癌细胞株的培养

（二） ATRA、PD98059 药物处理

（三） MTT 比色测定法观察细胞生长状态

（四） RT-PCR 技术测定细胞ERK2 的表达

（五） Western Blot 法测细胞蛋白表达

（六）流式细胞仪检测细胞凋亡水平

（七）统计方法

结果

一、ATRA 抑制结肠癌L5174T 细胞增生

二、ATRA促进结肠癌L5174T细胞ERK2mRNA水平表达

三、ATRA促进L5174T细胞MEK/ERK表达，促进ERK1/2磷酸化

四、PD98059与ATRA联用部分下调细胞p-ERK蛋白表达

五、PD98059与ATRA联合应用引起结肠癌L5174T细胞凋亡效果更显著

讨论

结论

参考文献

致谢

文献综述

参考文献

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标签：全反式维甲酸论文; 细胞外信号调节蛋白激酶论文; 结肠肿瘤论文;

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