胶质瘤源性exosome的提取及其蛋白组成研究

胶质瘤源性exosome的提取及其蛋白组成研究

论文摘要

目的:证实体内和体外培养的胶质瘤细胞是否均可分泌exosome,初步分析胶质瘤来源exosome的蛋白组成。方法:对胶质瘤U251细胞的培养上清液和临床上收集的III级胶质瘤囊液,进行差速离心提取exosome,并在电镜下观察exosome的形态,形态观察使用液相载网法。同时利用二维电泳分离蛋白,硝酸银染色,并利用软件图像分析软件imagemaster2D platinum对结果进行分析。结果:U251胶质瘤和III级星形胶质瘤细胞均可以产生exosome。U251细胞分泌的exosome含有196个蛋白点;而III级星形胶质瘤囊液分泌的exosome含有177个蛋白点;两者有68个蛋白点表观分子量以及等电点相同。含有核酸外切酶、HSP70、RNA结合蛋白、MHCI及II类分子。同时还可能存在血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)等蛋白。结论:证实了体内和体外培养的胶质瘤细胞均可分泌exosome。胶质瘤细胞来源的exosome表达核酸外切酶、HSP70、RNA结合蛋白、MHCI及II类分子。同时还可能存在血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)等蛋白。

论文目录

  • 内容提要
  • 中文摘要
  • Abstract
  • 第1章 前言
  • 第2章 综述
  • 2.1 胶质瘤的治疗进展
  • 2.2 Exosome的功能和作用机制
  • 第3章 实验过程
  • 3.1 U251来源exosome的提取和观察
  • 3.2 U251来源exosome的二维电泳
  • 第4章 实验结果
  • 4.1 胶质瘤来源exosome的提取及电镜观察
  • 4.2 胶质瘤细胞源性exosome的二维电泳
  • 4.3 查阅蛋白质数据库,并对结果进行分析
  • 第5章 讨论
  • 5.1 exosome的提取与观察
  • 5.2 U251源exosome的双向电泳分析
  • 第6章 结论
  • 参考文献
  • 作者简介及攻读学位期间发表的学术论文
  • 致谢
  • 相关论文文献

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