菊藤胶囊对自发性高血压大鼠炎症相关因子的影响

论文摘要

研究背景炎症反应在原发性高血压（essential hypertention, EH）的发生发展中起着重要作用,并可以导致EH的血管损伤和靶器官损害,怎样从炎症角度防治高血压已成为临床研究的新方向。研究证实,高血压与炎性因子C反应蛋白及肿瘤坏死因子-α高度相关,持续的高水平C反应蛋白及肿瘤坏死因子-α可能是EH的病理生理学基础。菊藤胶囊是根据传统中医理论和“异病同治”、“同病异治”的治疗原则,以平肝潜阳、活血利水为主导思想,并结合多年的临床实践总结拟定的纯中药复方制剂。临床观察证实,中药复方菊藤胶囊能够明显降低高血压患者的血压,对患者血液流变学和细胞流变学有明显的改善作用。为了进一步阐明菊藤胶囊的临床效应机制,我们采用ELISA法、免疫组织化学法等研究手段,探讨菊藤胶囊对自发性高血压大鼠（Spontaneous hypertensive rat, SHR）炎症因子的作用机制,为该制剂临床应用提供实验依据。研究目的和方法目的:观察心、脑、肾组织及血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、C反应蛋白（CRP）的表达,探讨中药菊藤胶囊抗高血压的炎症作用机制。方法:SHR 30只随机分为3组,每组10只,分别为空白对照组、菊藤胶囊组和卡托普利组。空白对照组给予蒸馏水灌胃,菊藤胶囊组及卡托普利组分别灌服菊藤胶囊稀释液及卡托普利稀释液。用大鼠血压测定仪测定大鼠尾动脉压;取血采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测各组大鼠血清CRP及TNF-α的含量,采用免疫组织化学（IH）法检测各组大鼠心、脑、肾组织CRP及TNF-α的表达。用免疫印迹法（WB）检测各组大鼠脑组织CRP及TNF-α的表达的强度。结果1.药物干预前各组大鼠血压相当,4wk后空白对照组大鼠血压明显升高,菊藤胶囊组和卡托普利组均能抑制血压的升高（P<0.05）2.血清ELISA测定结果显示,CRP菊藤胶囊（27.8±12.0 ）ng/L较卡托普利组（48.7±12.9） ng/L水平降低（P<0.05）,菊藤胶囊组、卡托普利组与空白对照组（71.3±16.4） ng/L比较均显著降低（P<0.05）;TNF-α菊藤胶囊组（22.5±8.3） ng/L较卡托普利组（24.0±9.2） ng/L无显著性差异,菊藤胶囊组、卡托普利组与空白对照组（39.3±16.7） ng/L相比较均显著降低（P<0.05）。3.心脏组织免疫组化观察显示其阳性表达特异性不强,可能与实验周期过短有关,但参照对比观察显示,空白对照组阳性棕黄色颗粒密布于组织上,染色较深;卡托普利组较少且染色较浅;菊藤胶囊组部分散在阳性着色,染色较淡。菊藤胶囊组、卡托普利组与空白对照组相比较TNF-α、CRP的表达均降低。4.肾脏组织免疫组化结果显示,空白对照组肾小球系膜及间质有片状深染区域,而药物组呈现点状浅染区域,说明TNF-α及CRP的表达在菊藤胶囊组及卡托普利组降低。5.脑组织免疫荧光结果显示,空白对照组的TNF-α及CRP在脑皮质区域呈现高密度表达,而在菊藤胶囊组及卡托普利组的表达降低。用western blotting对其进行半定量分析结果显示,药物组的脑组织TNF-α及CRP表达强度减低。结论1.菊藤胶囊能有效对抗自发性大鼠血压的升高;2.菊藤胶囊降低血清CRP及TNF-α的水平,说明其降压和抗炎有关联;3.菊藤胶囊减少心、脑、肾组织CRP及TNF-α的表达,表明其降压的同时具有靶器官保护作用,从炎症角度解释了药物作用的病理生理机制。4.抑制血清CRP及TNF-α水平,改善炎症状态,是菊藤胶囊药物作用的病理生理机制之一。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 1 原发性高血压研究现状
• 2 原发性高血压靶器官损伤研究概况
• 3 C 反应蛋白研究概况
• 4 肿瘤坏死因子а研究概况
• 5 菊藤胶囊方药分析
• 正文
• 0 引言
• 1 材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要试剂
• 1.3 主要仪器
• 2 方法
• 2.1 动物的分组
• 2.2 药物制备
• 2.3 血液及组织标本的采集
• 2.4 实验指标与测定方法
• 2.5 统计学处理
• 3 结果
• 3.1 菊藤胶囊对自发性高血压大鼠血压的影响
• 3.2 大鼠血清CRP 及TNF-α含量的变化
• 3.3 大鼠心脏组织CRP 及TNF-α的表达
• 3.4 大鼠肾脏组织CRP 及TNF-α的表达
• 3.5 大鼠脑组织CRP 及TNF-α的表达
• 4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 个人简历和研究成果
• 致谢