宫颈腺癌发生中PTEN基因突变和表达与HPV感染的研究

论文摘要

背景和目的宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一,其组织学类型主要有鳞癌和腺癌,鳞癌占宫颈癌的大多数,但近年来宫颈腺癌的发病率有上升趋势,尤其在较年轻的年龄组发病率明显上升。目前宫颈腺癌的病因及发病机制尚不清楚。其早期诊断和鉴别诊断困难。较之鳞癌更易于发生血行和淋巴结转移。对于癌前病变的认识远不如宫颈鳞癌癌前病变那样明确和熟悉。因此,宫颈腺癌引起了人们的普遍关注。与张力蛋白同源、第10染色体缺失的磷酸酶基因（phosphate and tensinhomology deleted on chromose ten,PTEN）基因是1997年发现的一种抑癌基因,对细胞的增殖、分化和凋亡起重要的调节作用。其在多种肿瘤组织中存在突变缺失和表达异常,尤其在子宫内膜癌中为突变率最高的基因,且为子宫内膜癌癌变过程中的早期事件。由于宫颈腺癌与子宫内膜癌在病因学和组织学形态上有相似性,推测PTEN基因在宫颈腺癌癌变过程中与子宫内膜癌有类似。PTEN在宫颈腺癌中的表达情况研究较少,而PTEN在宫颈腺癌中的突变情况在国内尚未见报道。宫颈腺癌癌前病变中PTEN基因突变情况在国内外均尚未见报导,有进一步研究的必要。高危型人乳头瘤病毒（human papilloma virus,HPV）感染已被认为是宫颈鳞癌发病的必要因素,而在宫颈腺癌中的感染情况研究较少,但现有的研究结果显示高危型HPV感染与宫颈腺癌的发生发展密切相关。普遍认为在宫颈癌的发生过程中除HPV感染以外,还需其他的分子事件的参与,抑癌基因的失活就是其机制之一。本研究检测了正常宫颈腺上皮组织、宫颈腺上皮内肿瘤和宫颈腺癌中抑癌基因PTEN的表达和突变和HPV感染情况,探讨PTEN基因表达和突变与HPV感染在宫颈腺癌发生中的作用,分析宫颈腺癌发生机制中PTEN基因与HPV的关系,以期发现较好的宫颈腺癌早期诊断分子指标。材料和方法42例宫颈腺癌和20例宫颈腺上皮内肿瘤存档蜡块取自郑州大学第一附属医院病理科、郑州大学第三附属医院病理科和郑州市妇幼保健院病理科,并按WHO宫颈腺癌的分型标准分型。42例宫颈腺癌中粘液腺癌19例,子宫内膜样腺癌10例,其它变型13例（浆液型腺癌2例,透明细胞癌4例,腺鳞癌5例,低分化难以分型的癌2例）,所有病例由两位经验丰富的病理医师复验证实。正常宫颈组织28例,为郑州大学第一附属医院病理科因子宫肌瘤手术切除的正常宫颈组织存档蜡块。宫颈腺癌组、宫颈腺上皮内肿瘤组、正常宫颈腺上皮组中＜45岁者分别有29例、15例、18例,≥45岁者分别有13例、5例、10例,三组间年龄构成比差异无统计学意义（P＞0.05）。免疫组化SP法检测42例宫颈腺癌、20例宫颈腺上皮内肿瘤和28例正常宫颈腺上皮组织中PTEN蛋白表达,PCR-SSCP（polymerase chain reaction- single strand conformation polymorphism）法检测上述90例组织中PTEN基因第5、8外显子突变情况,原位杂交广谱HPV探针检测90例标本的HPV感染情况。多个率的比较采用行×列表的x2检验、两个率的比较采用四格表资料的x2检验和Fisher确切概率法,相关性分析采用Spearman相关分析。用SPSS11.5软件进行数据处理。取双侧α=0.05为检验水准。结果1.宫颈腺上皮内肿瘤、宫颈腺癌和正常宫颈腺上皮组织PTEN阳性表达率分别为25.00%（5/20）、54.76%（23/42）和100.00%（28/28）。宫颈腺癌和宫颈腺上皮内肿瘤PTEN阳性表达率均低于正常宫颈腺上皮组织,差异有统计学意义（P＜0.05）。宫颈腺上皮内肿瘤PTEN阳性表达率低于宫颈腺癌,差异有统计学意义（P＜0.05）。宫颈腺癌不同组织学变型中粘液型腺癌、子宫内膜样型腺癌和其它变型PTEN阳性表达率分别为47.37%（9/19）,20.00%（2/10）和92.31%（12/13）,粘液型腺癌和子宫内膜样型腺癌PTEN阳性表达率均低于其它变型,差异有统计学意义（P＜0.05）。子宫内膜样型腺癌PTEN阳性表达率和粘液型腺癌差异无统计学意义（P＞0.05）。2.宫颈腺上皮内肿瘤和宫颈腺癌PTEN外显子5、8突变率分别为45.00%（9/20）和19.04%（8/42）,正常宫颈组织中未检测到突变标本。宫颈腺癌和宫颈腺上皮内肿瘤PTEN外显子5、8突变率均高于正常宫颈组织,差异有统计学意义（P＜0.05）。宫颈腺上皮内肿瘤PTEN外显子5、8突变率高于宫颈腺癌,差异有统计学意义（P＜0.05）。宫颈腺癌不同组织学变型中粘液型腺癌和子宫内膜样型腺癌PTEN基因外显子5、8突变率分别为21.05%（4/19）和40.00%（4/10）,其它变型外显子5、8突变为0（0/13）。子宫内膜样型腺癌PTEN外显子5、8突变率高于其它变型,差异有统计学意义（P＜0.05）。粘液型腺癌PTEN外显子5、8突变率与子宫内膜样型、其它变型相比差异均无统计学意义（P＞0.05）。3.PTEN基因突变与PTEN蛋白表达呈负相关,两者关系密切（P＜0.05,rs=-0.619,Pearson列联系数P=0.964）,PTEN基因突变组蛋白表达无1例阳性,而未突变组阳性表达56例,PTEN突变组蛋白表达阳性率低于未突变组,差异有统计学意义（P＜0.05）。4.宫颈腺癌、宫颈腺上皮内肿瘤、宫颈正常腺上皮HPV感染阳性率分别为为57.14%（24/42）、60.00%（12/20）和17.86%（5/28）。宫颈腺癌、宫颈腺上皮内肿瘤中的HPV感染阳性率均高于正常宫颈腺上皮组织,差异有统计学意义（P＜0.05）,宫颈腺癌中HPV感染阳性率与宫颈腺上皮内肿瘤差异无统计学意义（P＞0.05）。5.HPV阳性组PTEN表达缺失率为36.59%（15/41）,HPV阴性组PTEN表达缺失率为38.78%（19/49）,两者相比差异无统计学意义（P＞0.05）。6.HPV阳性组PTEN基因第5、8外显子突变率为4.89%（2/41）。HPV阴性组PTEN基因第5、8外显子突变率为30.61%（15/49）,HPV感染与PTEN突变相关,呈负相关（P＜0.05,rs=-0.327）。HPV阴性组PTEN基因突变率高于HPV阳性组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论1.宫颈腺癌的发生与PTEN基因的突变和蛋白的低表达有关。2.PTEN基因的突变和蛋白的低表达可能是宫颈腺癌发生的早期事件,且与宫颈腺癌的组织学变型有关。结合病理形态学将有助于宫颈腺癌的早期诊断。3.HPV感染与宫颈腺癌的发生发展有关。4.宫颈腺癌发生中存在HPV感染非相关的途径,在HPV感染非相关的宫颈腺癌的发生中PTEN基因的突变可能发挥了重要作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 论文 宫颈腺癌发生中PTEN基因突变和表达与HPV感染的研究
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 附图
• 综述 人乳头瘤病毒、癌基因、抑癌基因与宫颈腺癌
• 参考文献
• 中英文缩写词
• 致谢