血清白蛋白与有机小分子相互作用的散射光谱法研究

血清白蛋白与有机小分子相互作用的散射光谱法研究

论文摘要

共振光散射(Resonmlce Light Scattering,RLS)技术是分子发射光谱领域中的一种新的分析方法。RLS技术因其操作简单、灵敏度高、选择性好等特点已经引起了人们的浓厚兴趣和广泛关注。近十几年来,共振光散射技术已经在生命科学、环境科学、新材料科学等方面获得广泛应用,特别是在生物大分子研究方面,该技术是继分光光度法、荧光光度法之后又一种十分有用的手段。目前,有机染料是采用最广泛的研究生物大分子的光散射探针试剂。本文研究了有机染料(铝试剂)、络合物(铬天青S-Fe(Ⅲ))、有机酸(磺基水杨酸)作为散射探针测定牛血清白蛋白(BSA)的情况。由于共振光散射技术与Δλ=0的同步荧光技术相同,本文又研究了丁基罗丹明B(BRB)的共振光散射和共振荧光的关系。 本文的主要内容如下: 1.研究了铝试剂(ATA)-牛血清白蛋白(BSA)体系的共振光散射的光谱特征,考察了影响因素和适宜的反应条件。实验发现,铝试剂本身的散射强度极弱,与蛋白质结合后共振光散射信号明显增强,最大散射峰位于341nm,并且共振光散射强度与蛋白质的浓度在一定范围内呈现良好的线性关系。在最佳实验条件下,对BSA的测定下限为20ng/mL,线性范围为0~0.6μg/mL,用于尿中微量蛋白质和合成样品的测定,结果满意。 2.研究了铬天青S(CAS)-Fe(Ⅲ)-牛血清白蛋白(BSA)体系的共振光散射的光谱特征,并以此建立了测定微量蛋白质的新方法。考察了体系的影响因素和适宜的反应条件。结果表明:当BSA的浓度在0~4.0μg/mL范围内与340nm处的共振光散射信号成正比,测定下限为20ng/mL。用于合成样品的测定,结果满意。 3.研究了磺基水杨酸(SSA)-牛血清白蛋白(BSA)体系的散射光谱、吸收光谱和荧光光谱。在pH 2.4条件下,SSA与微量BSA作用产生散射强度增强信号。其原因是带负电荷的SSA与带正电荷的BSA通过分子间作用力特别是静电力结合形成了BSA-SSA复合物。由于pH值控制着SSA和BSA的平衡,所以溶液酸度对体系的散射强度有很大的影响。在最佳实验条件下,BSA浓度在0.05~1.0μg/mL范围内与散射强度成线性关系,线性相关系数r=0.999,对BSA的测定下限为0.05μg/mL。 4.研究了丁基罗丹明B(BRB)的共振散射光谱、荧光光谱和吸收光谱,讨论了共振光散射与共振荧光的区别与联系。在BRB水溶液三维荧光等高线光谱图中,

论文目录

  • 摘要
  • 第一章 绪论
  • 1.1 光散射的现象
  • 1.2 共振光散射技术
  • 1.3 本文研究内容及其意义
  • 第二章 铝试剂-牛血清白蛋白体系的共振散射光谱研究
  • 第三章 铬天青S-铁(Ⅲ)-牛血清白蛋白体系的共振光散射光谱研究
  • 第四章 磺基水杨酸-牛血清白蛋白体系散射光谱的研究
  • 第五章 丁基罗丹明B的共振光散射与共振荧光
  • 第六章 全文总结与展望
  • 参考文献
  • 硕士研究生期间发表论文
  • 致谢
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