匙吻鲟消化酶发育、特性、分布及酶谱特点的研究

论文摘要

鱼类消化酶受年龄、食性、食物组成及环境因素等的影响。本文研究了0～53日龄匙吻鲟消化酶的发育模式,匙吻鲟、鳙和杂交鲟消化酶活力、特性及酶谱的差异,池塘与网箱养殖匙吻鲟消化酶活力及活力分布的不同,饲料蛋白水平对匙吻鲟消化酶活力的影响以及温度、pH对匙吻鲟蛋白酶和淀粉酶活力的影响。初步了解匙吻鲟的消化生理特点,以期为了解匙吻鲟营养需求和研制匙吻鲟专用配合饲料提供基础资料。本研究获得以下结果:1、碱性蛋白酶和酸性蛋白酶分别在出膜后3d（3DAH）和刚出膜时（0DAH）检测出活力;试验期间碱性蛋白酶活力高于酸性蛋白酶;在12DAH～40DAH期间α-淀粉酶活力相对稳定;发育早期脂肪酶活力较高;磷酸酶活力在20DAH开始显著增加,且碱性磷酸酶活力高于酸性磷酸酶。结果表明,蛋白酶,α-淀粉酶和磷酸酶随个体发育活力增加;碱性蛋白酶在个体发育早期对蛋白质的消化具有重要作用。养殖环境和食物发生改变时,酸性蛋白酶、α-淀粉酶、碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活力在生长减慢时增加,生长加快时降低;脂肪酶活力在环境和食物发生变化时维持稳定。2、匙吻鲟总蛋白酶活力在pH 2.3～3达到最大,随pH增大活力显著下降,但在pH 7.0处出现另一个峰值。鳙总蛋白酶活力在pH 4.0～4.5、pH 8.0～8.5和pH 11.0处表现出三个峰值,而杂交鲟分别在pH2.5～3.0和pH 8.0～8.5处出现两个峰值。匙吻鲟酸性蛋白酶和脂肪酶活力显著高于鳙和杂交鲟,而碱性蛋白酶和α-淀粉酶活力显著低于鳙和杂交鲟。TLCK对匙吻鲟碱性蛋白酶活力的抑制率低于TPCK,而TLCK对鳙和杂交鲟碱性蛋白酶的抑制率均高于TPCK。匙吻鲟和杂交鲟存在一些相同或相似的条带;匙吻鲟与鳙的酶谱特征表现出较大的差异。3、池塘组碱性蛋白酶、α-淀粉酶和脂肪酶活力均显著低于网箱组;两组间酸性蛋白酶活力差异不显著;酸性蛋白酶活力在食道、胃和瓣肠中检测出,且食道和胃中的活力高于瓣肠;碱性蛋白酶在十二指肠和瓣肠中检测出,十二指肠中的活力高于瓣肠;淀粉酶活力在四个部位中都检测到,十二指肠中淀粉酶活力最大;脂肪酶只在胃中检测出活力。食道和胃中酸性蛋白酶活力在两组中差异不显著,而池塘组瓣肠酸性蛋白酶活力显著高于网箱组;池塘组十二指肠和瓣肠中碱性蛋白酶活力均显著低于网箱组;池塘组食道和十二指肠中淀粉酶活力显著低于网箱组,胃和瓣肠中淀粉酶活力两组间差异不显著;池塘组胃中脂肪酶活力显著低于网箱组。4、酸性蛋白酶和肝胰脏碱性蛋白酶活力随饲料蛋白水平的增加而增加,而肠道碱性蛋白酶活力随饲料蛋白水平的增加而降低;消化道α-淀粉酶活力随饲料蛋白水平的增加而降低,而肝胰脏α-淀粉酶活力表现出相反的趋势;饲料蛋白水平对消化道和肝胰脏脂肪酶活力影响不显著,各组脂肪酶活力差异不显著。结果表明,饲料蛋白水平对匙吻鲟肌肉粗蛋白含量,酸性蛋白酶,碱性蛋白酶和α-淀粉酶都会产生显著影响;饲料蛋白质水平为39.10%比较适宜。5、匙吻鲟酸性蛋白酶的最适温度为35～40℃,最适pH为2～3;碱性蛋白酶的最适温度为35℃,最适pH为7以上;淀粉酶活力受温度的影响不显著,在pH 5.5和pH8.0时出现峰值。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 匙吻鲟概况
• 1.1.1 生物学性状
• 1.1.2 生活环境与生活习性
• 1.1.3 摄食与食性
• 1.1.4 产卵与繁殖
• 1.1.5 经济价值及养殖前景
• 1.2 鱼类消化酶的研究
• 1.2.1 仔稚鱼消化酶发育的研究
• 1.2.2 食性与消化酶的关系
• 1.2.3 饲料与饲料组成与消化酶的关系
• 1.2.4 影响鱼类消化酶活力的其他因素
• 1.3 选题的目的和意义
• 第二章 匙吻鲟幼鱼消化酶发育的研究
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 主要仪器
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.3 试验样品
• 2.1.4 主要试剂配制
• 2.2 分析方法
• 2.2.1 酶液制备
• 2.2.2 酶活力测定
• 2.2.3 可溶性蛋白含量测定
• 2.2.4 数据统计
• 2.3 结果
• 2.4 讨论
• 2.5 小结
• 第三章 匙吻鲟、鳙、杂交鲟（HUSO DAURICUS ♀×ACIPENSER SCHRENKI BRANDT ♂）消化酶的比较研究
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 主要仪器
• 3.1.2 主要试剂
• 3.1.3 试验样品
• 3.1.4 主要溶液配制
• 3.2 分析方法
• 3.2.1 酶液制备
• 3.2.2 酶活测定
• 3.2.3 pH 对总蛋白酶活力的影响
• 3.2.4 抑制剂对蛋白酶的影响
• 3.2.5 酶谱分析
• 3.2.6 可溶性蛋白含量测定
• 3.2.7 数据统计
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 消化酶活力
• 3.3.2 酶谱分析
• 3.4 讨论
• 3.4.1 蛋白酶
• 3.4.2 α-淀粉酶
• 3.4.3 脂肪酶
• 3.4.4 酶谱分析
• 3.5 小结
• 第四章 池塘与网箱养殖匙吻鲟消化酶的比较研究
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 主要仪器
• 4.1.2 主要试剂
• 4.1.3 组织样品
• 4.2 分析方法
• 4.2.1 酶液制备
• 4.2.2 酶活测定
• 4.2.3 可溶性蛋白含量测定
• 4.2.4 数据统计
• 4.3 结果与分析
• 4.3.1 池塘与网箱养殖匙吻鲟消化酶活力的比较
• 4.3.2 池塘与网箱养殖匙吻鲟消化酶活力分布的比较
• 4.4 讨论
• 4.5 小结
• 第五章 饲料蛋白水平对匙吻鲟消化酶活力的影响
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 主要仪器
• 5.1.2 主要试剂
• 5.1.3 试验饲料
• 5.1.3 试验动物与饲养管理
• 5.1.4 组织样品
• 5.2 分析方法
• 5.2.1 酶液制备
• 5.2.2 酶活测定
• 5.2.3 可溶性蛋白含量测定
• 5.2.4 数据统计
• 5.3 结果与分析
• 5.3.1 饲料蛋白水平对蛋白酶活力的影响
• 5.3.2 饲料蛋白水平对α-淀粉酶活力的影响
• 5.3.3 饲料蛋白水平对脂肪酶活力的影响
• 5.4 讨论
• 5.5 小结
• 第六章 温度和pH 对匙吻鲟蛋白酶和淀粉酶活力的影响
• 6.1 试验材料
• 6.1.1 主要仪器
• 6.1.2 主要试剂
• 6.1.3 组织样品
• 6.2 分析方法
• 6.2.1 酶液制备
• 6.2.2 温度系统设置
• 6.2.3 pH 系统设置
• 6.2.4 酶活测定
• 6.2.5 可溶性蛋白含量测定
• 6.2.6 数据统计
• 6.3 结果
• 6.3.1 温度对匙吻鲟消化酶活力的影响
• 6.3.2 三种消化酶反应的温度系数Q10
• 6.3.3 pH 对匙吻鲟消化酶活力的影响
• 6.4 讨论
• 6.4.1 温度对匙吻鲟消化酶活力的影响
• 6.4.2 pH 对匙吻鲟消化酶活力的影响
• 6.5 小结
• 综合讨论与结论
• 1 综合讨论
• 2 主要结论
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 作者简介