[1]成都青羊维莎芬医疗美容诊所美容外科四川成都610000[2]成都俏百颜整形外科诊所美容外科四川成都610000
[通讯作者]遂宁市中心医院耳鼻咽喉科四川遂宁629000
[摘要]目的：研究基质血管组分与自体脂肪混合填充隆乳术的临床应用效果。方法：将2015年8月至2016年8月33例采用基质血管组分与自体脂肪混合填充隆乳的女性做为实验组A，20例女性自体脂肪隆乳为对照组B，并对观察指标进行统计分析。结果：实验组A的研究对象在术后2周、1个月、3个月的隆起体积增长率分别为75%±3%、50%±3.6%、40%±2.6%；对照组B的研究对象在术后2周、1个月、3个月的隆起体积增长率分别为60%±3%、40%±3%、25%±3%;实验组平均微血管密度（9．53±2．900)个，对照组平均微血管密度（3±1．604)个，P<O．001，组间数据差异显著统计学存在意义。结论：采用基质血管组分与自体脂肪混合填充术进行隆胸，可获得较理想的效果，且隆胸效果较为稳定，可显著提高患者的满意度。
[关键词]自体脂肪；基质血管组分；隆乳术
[Abstract]Objective:Tostudytheclinicalapplicationeffectofbreastaugmentationwithcombinedfillingofstromalvascularfractionandautologousfat.Methods:intheperiodofbetweenAugust2015andAugust2016,totake33femalecasesastheexperimentalgroupwhohadbreastaugmentationsurgerywithcombinedfillingofstromalvascularfractionandautologousfat,and20femalecasesasthecontrolgroupwhohadbreastaugmentationsurgerywiththefillingofautologousfatalone.totaketheobservationindexforstatisticalanalysis.Results:theratiosofswellingvolumeofthecasesintheexperimentalgroupinpost-operative2weeks,1monthand3monthswererespectively75%±3%,50%±3.6%and40%±2.6%;comparatively,theratiosofswellingvolumeofthecasesinthecontrolgroupinpost-operative2weeks,1monthand3monthswererespectively60%±3%、40%±3%、25%±3%.Themeanmicrovesseldensityoftheexperimentalgroupis(9.53+2.900),thatofthecontrolgroupis(3+1.604)a,P<O.001.Therewassignificantstatisticaldifferencebetweenthetwogroups.Conclusion:breastaugmentationsurgerywithmixedfillingofthestromalvascularfractionandautologousfatbreast,canobtainidealeffect,andtheaugmentationeffectisstable,canalsosignificantlyimprovethepatient'ssatisfaction.
[Keywords]Autologousfat；Stromalvascularcomponent；Breastaugmentation
由于部分女性的乳房发育不良，乳房过小或扁平，在一定程度上影响到体型的美观，患者往往希望通过隆乳术来改变。隆乳术通过植入医用材料或移植自身脂肪组织，使乳房体积扩大、形态丰满匀称，改善女性体型、恢复女性特有曲线美而深受乳房发育欠佳女性的喜爱[1]。自体脂肪从人体自身某些部位吸取多余的皮下脂肪细胞，然后经过净化处理、注入药物得到复合脂肪颗粒，选择完整的颗粒脂肪细胞注射到自己需要进行脂肪填充的部位，在隆乳术中以得到广泛应用。基质血管组分（SVF）是指脂肪组织去除成熟脂肪细胞后，从而获得的具有干细胞特性的一组混合细胞群体，近年来在组织移植领域得到广泛应用[2]，为此我们对基质血管组分与自体脂肪混合填充隆乳术的临床应用进行研究，现报告如下：
1资料与方法
一般资料
将自2015年8月至2016年8月间与我院及合作的多家整形科进行隆乳术53例女性为研究对象，基本资料为：年龄分布在21～42岁之间，平均年龄27.8±3.2岁。乳房基本特征均为发育不良而出现扁平、过小等，经检查乳房组织结构完整，皮肤完好并有弹性，符合隆胸术条件。33例研究对象均自愿选择采用基质血管组分与自体脂肪混合填充术进行乳房整形美容，且术前均告知该方法的特点及存在的风险，均已排除乳房病症如乳腺炎等及手术禁忌特征，且并均签署手术知情同意书。
1.2方法
实验组患者予以基质血管组分与自体脂肪混合填充术，放入1ml脂肪基质干细胞DMEM培养液以及内皮细胞DMEM培养液。参照组实行不加基质血管组分的自体脂肪隆乳术，加入1mLDMEM培养液。
1.2.1自体脂肪抽取：对患者进行肿胀麻醉，选择腹部或大腿部位中段的皮下脂肪组织作为填充脂肪，待麻醉生效后使用吸脂针将所需脂肪逐步吸入到准备容器内。注意抽吸时保持一定的负压以及控制抽吸速度，术毕在抽吸位置放置负压引流管并行无菌包扎。
1.2.2基质血管组分：（1）将抽取的脂肪进行筛分，去除未消化的残余组织，并行离心机进行分离，去除分离后的成熟脂肪（表层滴脂和次层的乳状物），通常留底层沉淀物为培养对象，并在培养对象中加入含15%胎牛血清的DMEM。（2）将培养物置于温度为37度的二氧化碳培养箱中进行培养，并在培养6小时后换液，去除未贴壁细胞。
1.2.3乳房注射：将纯化的脂肪颗粒和抽提的脂肪基质血管组分充分混合，并取预计注入量的120%～130%用5ml注射器用2mm注脂针将混合液均匀注射至乳房后间隙，并用1mm注射器少量多点注射至皮下的纤维间隔之间(避免注入乳腺组织内，以免出现硬结)。在注射时进行适度按摩，注射结束后行弹力绷带适度加压包扎。注意每次的注射量控制在100～150ml左右，并可在当此注射结束后的3个月后再行注射，直到符合每位患者的乳房外形美观曲线为止。
1.2.4实验动物：采用8只月龄为4～6周健康SPF级裸鼠，体质量15---18g，雌雄不限。在实验前，所有的动物均进行一周以上的适应性饲养。
1.2.5实验动物分组：将裸鼠随机分为A、B二组，每组两只，每只分别于背部皮下注射4点。A组．空白对照组：在4ml脂肪颗粒中加入lmlDMEM培养基，吹打均匀。B组．实验组：在4ml脂肪颗粒中加入lml含有脂肪基质干细胞的DMEM培养液。
1.2.6免疫组化步骤：PBS试剂缓冲液包括NaCL137mmol/L、KCL12.7mmol/L、Na2HPO44.3mmol/L、KH2PO41.4mmol/L。兔抗人八因子相关抗原多克隆抗体，二步法免疫组化试剂盒、抗原稀释液、DAB显色剂、抗原修复液。首先在65℃烤箱内放置切片20分钟；脱蜡、水化，进行5分钟PBS试剂缓冲液冲洗2~3次；在切片上滴三滴3%H2O2，静置10分钟。进行5分钟PBS试剂缓冲液冲洗2~3次；在切片中放置抗原修复液，然后进行高压锅价额，冷水冲洗之后，对切片进行1小时复温。加入50μL兔抗人八因子相关抗原多克隆抗体，在4℃湿盒中过夜放置；然后在37℃进行1小时复温；DAB滴加之后开始显色，在显微镜下进行观察，然后进行脱水、透明、封片、镜检。术后两周，一个月，三个月，对裸鼠注射戊巴比妥那进行麻醉，利用75%酒精进行消毒，分离移植物被膜，将移植物完全取出，术后妥善处理裸鼠。
观察指标
将隆起增加比率及微血管密度为观察指标内容。隆起值的测定标准为：患者直立位后，测量乳房体积，术后2周、1个月、3个月复测隆起体积。隆起增长比率＝（术后测量体积—术前测量体积）/移植自体脂肪量；微血管密度测定方法为统计15个100倍视野下的截面微血管密度。
统计学方法
对观察指标数据用SPSS19.0软件进行数据统计分析,计数资料行χ2检验，计量资料行t检验，P＜0.05时有统计学意义。
2结果
2.153例研究对象行隆乳术后的评价指标情况见表1，3例研究对象的总满意率达100%，其中满意例数达29例，占87.88%。
2.2两组患者各项指标情况
实验组平均微血管密度（9．53±2．900)个，参照组平均微血管密度（3±1．604)个个，P<O．05，t为9.2281，组间数据差异显著统计学存在意义。
3.讨论
随着生活水平的不断提高，女性对美的追求也不断提升。多种原因造成部分女性乳房发育不良，在很大程度上不能充分体现女性特有曲线美。近年来随着美容整形技术的快速发展，隆乳术已经得到迅速应用，为乳房发育缺陷女性带来福音。目前用于隆乳的方法较多，例如假体隆胸术、自体脂肪移植隆胸、注射隆胸等方法[3]，而选择并发症少且效果好的隆乳方法正是我们进行本文内容研究的目的。
自体脂肪隆胸是将患者自身的多余脂肪用细针吸出，特别活化处理成纯净脂肪颗粒，通过微型管针分层次均匀注入隆乳区使之成活。不同于传统的切除大块脂肪组织或肌肉等方法，具有并发症少、切口小、恢复快等特点[4]；而自体脂肪的SVF具有更加明显的优势：它富含间充质干细胞，具备干细胞组织修复和免疫调节的功能。此外，SVF细胞群还富含内皮足细胞、调节性T细胞等多种组分，相互结合，发挥协同效应，有助于移植细胞的存活和发挥生物功能；更重要的是，作为个体化治疗新趋势，SVF来源于自体组织，不需要体外特殊处理，无免疫原性和伦理学问题，安全性好[5]。从本文的研究结果可以看到，实验组33例研究对象术后不同时间段的隆起增增长率均较为理想，充分表明本研究方式的显效性和安全性。
综上所述，采用基质血管组分与自体脂肪混合填充隆乳术具有极高的隆乳价值，可以显著提升女性术后脂肪存活率，但费用较高也制约该方法的普及推广，因此女性隆胸时应酌情综合考虑。
参考文献：
[1]马永奇,梁献平,张晨,等.脂肪干细胞辅助的自体脂肪移植隆乳术临床疗效分析[J].中国医疗美容,2016,6(4):43-44.
[2]谭新颖,张海霞,刘斌,等.自体基质血管成分改善脂肪组织移植效果的实验研究[J].中国美容医学杂志,2011,20(3):425-427.
[3]刘乃军,王艳.湿性脂肪干细胞辅助自体颗粒脂肪移植术临床观察[J].中国美容医学杂志,2012,21(15):1906-1909.
[4]杨勇.湿性脂肪干细胞在自体脂肪移植中的应用[J].中国医疗美容,2014(2):39-40.
[5]王琳,陆毅,傅敏刚,等.两种细胞辅助脂肪移植隆乳的临床效果观察[J].组织工程与重建外科杂志,2014(6):339-34