UUO模型大鼠肾间质纤维化相关炎症因子抗体芯片分析

论文摘要

目的:采用抗体芯片技术检测在大鼠肾间质纤维化形成过程中肾组织炎症因子的整体变化情况,以筛选出更多可能与肾间质纤维化进程相关的炎症因子,并通过进一步研究,深入了解这些炎症因子的作用,有助于阐明肾间质纤维化的机制,进而为临床防治慢性肾病提供新的方向。方法:将60只清洁级SD雄性大鼠随机分为假手术组（SOR）和单侧输尿管结扎组（UUO）。随机选取各组中的5只大鼠分别于单侧输尿管结扎术后第5天、7天、11天、14天和21天处死,取血5 ml监测肾功能的变化,收集患侧肾组织观察梗阻肾的病理学改变。以此确定肾间质纤维化过程中肾脏改变最具代表性的时间点,再将该时间点的肾脏组织做细胞因子抗体芯片检测,观察19种炎症因子在肾间质纤维化进程中的动态变化。在此基础上,选用辛伐他汀进行药物干预,观察辛伐他汀对Fractalkine及受体CX3CR1的影响。将15只SD雄性大鼠随机分成3组:SOR组、UUO组、治疗组（UUO+辛伐他汀组）,每天给予辛伐他汀（5mg/d）灌胃,假手术组、UUO组和治疗组均在术后第14天处死后取左侧肾脏,观察梗阻肾的病理学变化。结果:与假手术组相比,UUO组术后第5天,肾脏组织出现早期纤维化的病理改变。随着梗阻时间延长,患侧肾功能逐渐减退,小管间质纤维化程度进行性加重,于术后第14天,病变最典型。利用抗体芯片技术检测各组肾组织中19种炎症因子的变化情况,有17种炎症因子不同程度出现增高或降低,其中Fractalkine、GM-CSF、IL-1α、IL-1β、IL-6、IFN-γ、LIX、Leptin、MCP-1、MIP-3α、TIMP-1和TNF-α共12种炎症因子随肾间质纤维化程度加重呈增高的趋势,尤以MCP-1、Fractalkine和TIMP-1增高最为明显（P<0.05）;IL-4和IL-10表现为下降趋势（P<0.05）;VEGF、CINC-2和CINC-3表现为先升高后降低的变化趋势（P<0.05）;CNTF和β-NGF这2种炎症因子无明显变化。用辛伐他汀治疗后第14天,与假手术组相比,模型组和治疗组肾组织纤维化明显,治疗组的肾间质纤维化程度轻于模型组。结论:单侧输尿管结扎可以迅速建立理想的肾脏细胞转分化和肾间质纤维化大鼠模型,且肾间质纤维化程度随肾功能的减退进行性加重。抗体芯片检测结果以MCP-1、Fractalkine和TIMP-1变化最为明显,说明这三种炎症因子在肾间质纤维化进程中发挥的促纤维化作用最大。Fractalkine作为我们筛选出的重要细胞因子之一,其机制和作用尚未被完全研究清楚,而辛伐他汀可能通过抑制Fractalkine及其受体CX3CR1的表达,延缓肾间质纤维化的进展。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
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• 综述
• 参考文献