论文摘要
目的本实验通过建立多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠模型，研究膜联蛋白Ⅰ和Ⅳ在PCOS大鼠卵泡颗粒细胞中的表达，以期阐明膜联蛋白Ⅰ及Ⅳ对PCOS大鼠卵泡生长、分化、凋亡、闭锁的分子生物学作用机制。方法通过孕激素联合人绒毛膜促性腺激素诱导Sprague Dawley（SD）幼年雌性大鼠构建PCOS模型，采用免疫组织化学方法及灰度值测定模型组和对照组卵泡颗粒细胞中膜联蛋白Ⅰ和Ⅳ的表达。结果（1）两组大鼠行为、体征变化无明显差异，模型组大鼠的体质量（101.78±5.91）g高于对照组（98.37±7.64）g，但无显著性差异（P=0.058）；模型组大鼠的卵巢重量（0.049±0.008）g显著高于对照组[（0.026±0.008）g，P=0.00]，模型组大鼠的卵巢体积（48.77±12.82）mL亦显著高于对照组[（25.35±8.91）mL，P=0.00]，差异有统计学意义。（2）模型组大鼠血清孕酮（P）[（19.85±18.32）nmol/L vs （9.62±3.82）nmol/L]、睾酮（T）[（0.35±0.14）nmol/L vs （0.29±0.04）nmol/L]水平均明显高于对照组（P<0.05）；空腹胰岛素（FINS）[（16.92±2.79）mIU/L vs （12.13±3.13）mIU/L]、空腹血糖（FBG）[（4.42±0.24）mmol/l vs （3.96±0.19）mmol/l]水平均显著高于对照组（P<0.01），卵泡刺激素（FSH）水平[（1.09±0.57）IU/L vs （2.01±0.37）IU/L]显著低于对照组（P<0.01），LH/FSH比值（1.46±0.73vs0.96±0.69）和胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）（3.35±0.66vs2.14±0.59）均显著高于对照组（P<0.01）。（3）苏木素-伊红染色法显示模型组大鼠卵巢中部分卵泡呈囊性扩张，囊性扩张卵泡内卵母细胞或放射冠消失，颗粒细胞层变薄。（4）膜联蛋白Ⅰ和Ⅳ在模型组和对照组的各级卵泡颗粒细胞中均有表达，在直径为60120μm的窦状卵泡中，模型组膜联蛋白Ⅰ表达的灰度值（52.363±0.033）显著低于对照组[（52.415±0.044），P<0.01]，模型组膜联蛋白Ⅳ表达的灰度值（57.340±0.014）显著低于对照组[（57.358±0.015），P<0.01]，差异有统计学意义。结论本实验PCOS动物模型血清内分泌及卵巢病理改变与PCOS患者相似，是较理想的PCOS动物模型。PCOS以多个囊状卵泡及卵泡闭锁为主要病理改变，而颗粒细胞凋亡是卵泡闭锁的基本机制，模型组膜联蛋白Ⅰ和Ⅳ在窦状卵泡颗粒细胞的表达上调，且PCOS中窦状卵泡颗粒细胞的凋亡增加，说明膜联蛋白Ⅰ和Ⅳ参与了卵巢颗粒细胞的凋亡过程，并且发挥了重要作用。