国产卡维地洛分散片的人体药动学研究

论文摘要

卡维地洛（Carvedilol）是一种兼有外周血管扩张活性的非选择性β-受体阻滞剂及α1-受体阻滞剂,有极强的抗氧化特性,用于治疗高血压和充血性心力衰竭,2008年获美国新药发明奖,颠覆了β-受体阻滞剂禁用于心衰的认识。国内现在已有卡维地洛片和胶囊上市,到目前为止还没有分散片上市。为了方便服用和利于其更快吸收,国内首次研制开发了卡维地洛分散片,与已上市的价格比较昂贵的卡维地洛片与胶囊相比,卡维地洛分散片具有物美价廉的特点,可以满足越来越多的国内普通百姓的需求,也可以缓解日益尖锐的医患关系。本试验建立高效液相色谱-电喷雾离子化质谱联用（LC-MS/MS）法测定卡维地洛的血药浓度,研究成年健康人口服卡维地洛后,卡维地洛在人体内的药物动力学过程,并以已上市药物达利全为参比制剂,作人体生物等效性分析,为该药的申报及临床应用提供依据。1.血浆中卡维地洛（LC-MS/MS）测定方法的建立以盐酸盐酸特拉唑嗪为内标,采用高效液相色谱-电喷雾离子化质谱联用法进行血浆中卡维地洛的测定。并根据《化学药物制剂人体生物利用度和生物等效性研究技术指导原则》的有关要求,对测定方法进行确证。包括方法的特异性、标准曲线的制备、基质效应考察、绝对回收率、相对回收率试验及样本稳定性考察等。2.人体血浆中卡维地洛的药动学研究经浙江大学医学院附属第一医院伦理委员会审批同意,20例健康受试者,随机排序,按2×2交叉试验方案设计,按要求空腹口服12.5mg卡维地洛分散片或参比制剂（达利全片）,分别于给药前及给药后0.25、0.5、0.75、1、2、3、4、6、8、10、12、24、48小时各取肘静脉血4 mL,血样采集后,4000rpm离心15分钟,分离出血浆立即置聚丙烯试管中-20℃低温保存待测.血浆中卡维地洛浓度采用液相色谱串联质谱法检测.以实测值计算Cmax、tmax;以末端相血药浓度的对数值对时间进行回归,求得斜率Ke及t1/2;运用梯形法计算曲线下面积AUC0-t;AUC0-iμf=AUC0-t+Gt/Ke。主要药代动力学参数和生物利用度采用DAS2.0软件计算。得主要药动学参数Cmax、AUC0-t、经对数转换后进行方差分析及双单侧t检验,并计算90%置信区间;Tmax真采用非参数法统计处理;分析制剂间、个体间、周期间变异的统计学意义,进行生物等效性评价。结果表明:（1）本试验选取的血样预处理方法提取回收率高,精密度和准确度好。血样的LC-MS/MS分析方法灵敏度高(最低定量限为0.36 ng·mL-1)、特异性好,定量分析线性关系良好,符合生物样本分析测定要求。（2）健康人体口服卡维地洛分散片或参比制剂后,以建立的血浆样品测定法进行测定,计算求得参比制剂及受试制剂中卡维地洛的主要药代动力学数据tmax分别为（0.93±0.51）h和（0.93±0.50）h,Cmax分别为（51.99±21.69）ng·mL-1和（58.21±35.30）ng·mL-1,AUC0-t分别为（194.60±87.28）ng·mL-1·h和（203.62±105.55）ng·mL-1·h,AUC0-∞分别为（197.9 3±87.95）ng·mL-1·h和（207.01±1 05.71）ng·mL-1·h,t1/2（ke）分别为（3.06±0.62）h和（2.79±0.47）h,Ke分别为（0.2558±0.0468）h-1和（0.2351±0.0490）h-1,MRT分别为（4.32±2.24）h和（3.70±1.79）h。受试制剂卡维地洛分散片的相对生物利用度为（104.73±18.36）%。经双单侧t检验,其检验统计量t均大于t0.05（20）=1.706。卡维地洛的AUC0-t、Cmax90%置信区间分别为96.3%-110.6%和90.8%-122.0%,均落在规定范围内;两种制剂的Tmax经非参数法检验,差异无显著性意义。根据结果可判断受试制剂与参比制剂生物等效。（3）安全性评价:整个试验在医护人员监护下进行,未观察到明显不良反应,耐受性较好。受试者各项生化指标、血常规、尿常规及心电图在试验前后无显著差异。结论:采用LC-MS/MS法测定卡维地洛的血药浓度,方法准确、灵敏,操作简便,可用于卡维地洛的人体药动学研究。对国产卡维地洛分散片进行了单次给药的人体药物动力学研究,结果表明口服卡维地洛分散片后,其药代力学参数与参比制剂无显著差异,与文献报道也基本一致,但个体具有较大差异。故建议临床使用本制剂时,应根据病人的具体情况调整给药剂量,每日一次或每日两次,以保证用药的有效性与安全性。

论文目录

• 致谢
• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩写词对照表
• 目次
• 1 前言
• 2 试验材料和仪器
• 2.1 药物和主要试剂
• 2.2 仪器及设备
• 3 试验方法
• 3.1 血浆中卡维地洛LC-MS/MS测定方法的建立
• 3.1.1 色谱条件
• 3.1.2 质谱条件
• 3.1.3 质谱扫描图
• 3.1.4 标准溶液配制
• 3.1.5 血浆样本的处理
• 3.2 测定方法的确证
• 3.2.1 方法的特异性
• 3.2.2 血浆中卡维地洛标准曲线的制备及灵敏度
• 3.2.3 基质效应考察
• 3.2.4 提取回收率试验
• 3.2.5 精密度和准确度试验
• 3.2.6 稳定性考察
• 3.3 卡维地洛在健康人体内的药动学研究
• 3.3.1 受试者选择
• 3.3.2 试验设计
• 3.3.3 受试者血浆样品中卡维地洛的测定
• 3.3.4 数据处理及统计分析
• 4 结果
• 4.1 卡维地洛血浆样品测定方法学结果
• 4.2 人体药动学研究结果
• 4.3 安全性考察结果
• 5 讨论
• 6 结论
• 参考文献
• 图表附录
• 综述
• 作者简历
• 研究生课程研修期间发表的文章