豹皮樟总黄酮对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织免疫病理变化的影响

论文摘要

目的通过形态学、免疫学、分子生物学手段研究豹皮樟总黄酮（total flavone ofLitsea Coteana,TFLC）对佐剂性关节炎（adjuvant arthritis,AA）大鼠滑膜组织免疫病理变化的影响,探讨TFLC对AA大鼠治疗作用的有关机制。方法采用佛氏完全佐剂（freund’s complete adjuvant,FCA）足跖皮下注射建立大鼠AA模型,通过HE染色、电镜观察膝关节滑膜组织、滑膜细胞形态学改变,分析TFLC对AA模型大鼠继发性炎症关节病理形态学的影响;通过免疫组化、Western Blot等方法研究TFLC对AA模型大鼠滑膜组织血管内皮生长因子（vascularendothelial growth factor,VEGF）、细胞间粘附分子-Ⅰ（intercellular adhesion molecule1,ICAM-1）的影响。结果TFLC(66.5,133,266 mg·kg-1)可明显减轻AA大鼠非致炎侧踝关节组织水肿、炎细胞浸润,血管翳减少;TFLC(133,266 mg·kg-1)可恢复A、B型滑膜细胞的分泌功能和细胞中高尔基体、线粒体、粗面内质网的形态异常,可明显降低AA大鼠滑膜组织的炎性细胞浸润和血管翳的形成;TFLC(66.5,133,266mg·kg-1)下调AA大鼠滑膜组织中VEGF、ICAM-1蛋白的表达。结论TFLC可恢复AA大鼠关节结构异常、改善滑膜细胞的分泌功能和主要细胞器的病理改变、降低AA大鼠滑膜组织中VEGF和ICAM-1蛋白的表达是其治疗AA的重要机制。

论文目录

• 一、英文缩略词表
• 二、中文摘要
• 三、英文摘要
• 四、正文
• 1 前言
• 2 实验材料
• 2.1 动物
• 2.2 药品与试剂
• 2.3 仪器与设备
• 3 实验方法
• 3.1 分组及大鼠AA模型的制备
• 3.2 给药剂量及途径
• 3.3 病理学检查
• 3.3.1 石蜡包埋和HE染色
• 3.3.2 AA大鼠继发侧膝关节滑膜组织电镜检查
• 3.4 AA大鼠膝关节滑膜组织中ICAM-1、VEGF的表达（免疫组化方法）
• 3.5 AA大鼠膝关节滑膜组织VEGF、ICAM-1蛋白表达（蛋白免疫印迹法）
• 3.5.1 膝关节滑膜组织的采集
• 3.5.2 膝关节滑膜组织VEGF、ICAM-1蛋白检测
• 3.5.2.1 细胞样品制备及蛋白质的提取
• 3.5.2.2 蛋白质定量（Lowry法）
• 3.5.2.3 Western blot操作步骤
• 3.6 统计学分析
• 4 实验结果
• 4.1 TFLC对AA大鼠足爪关节病理组织的影响
• 4.1.1 HE染色
• 4.1.2 TFLC对滑膜细胞超微结构的影响
• 4.2 TFLC对AA大鼠膝关节滑膜组织中VEGF、ICAM-1的表达影响
• 4.2.1 TFLC对AA大鼠膝关节滑膜组织中VEGF的表达影响
• 4.2.2 TFLC对AA大鼠膝关节滑膜组织中ICAM-1的表达影响
• 4.2.3 TFLC对AA大鼠膝关节滑膜组织中VEGF、ICAM-1表达免疫组化图像分析
• 4.3 TFLC对AA大鼠滑膜组织VEGF及ICAM-1蛋白表达的影响
• 4.3.1 TFLC对AA大鼠滑膜组织VEGF蛋白表达的影响
• 4.3.2 TFLC对AA大鼠滑膜组织ICAM-1蛋白表达的影响
• 5 讨论
• 5.1 TFLC对从大鼠滑膜病理组织的影响
• 5.2 TFLC对AA大鼠滑膜组织中VEGF表达的影响
• 5.3 TFLC对AA大鼠滑膜组织中ICAM-1表达的影响
• 6 小结
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 综述
• 参考文献