论文摘要
目的：观察虫草肾茶胶囊对高糖培养条件下人肾小球系膜细胞（HMC）的影响，并探讨虫草肾茶胶囊对糖尿病肾病（DN）肾脏保护作用的机制。方法：首先采用血清药理学的方法制备虫草肾茶胶囊及福辛普利药物血清，再进行药物血清干预HMC的研究。将常规培养的HMC分为正常对照组、高糖组、虫草肾茶高、中、低剂量组、福辛普利组，采用高糖模型（即高糖刺激体外培养的系膜细胞）进行研究。正常对照组予10％正常大鼠FCS改良型RPMI-1640培养液培养干预，高糖组予10％正常大鼠FCS改良型RPMI-1640高糖培养液培养干预，虫草肾茶高、中、低剂量组分别予10％虫草肾茶胶囊高、中、低剂量含药血清改良型RPMI-1640高糖培养液培养干预，福辛普利组予10％福辛普利含药血清改良型RPMI-1640高糖培养液培养干预。分别在相应干预因素处理后，于培养的24h、48h及72h用MTT法检测各组细胞增殖的情况；于相应干预因素作用48h及72h后，用ELISA法检测细胞培养液上清中转化生长因子-β1（TGF-β1）、纤维连接蛋白（FN）、Ⅳ型胶原（Col-Ⅳ）、层粘连蛋白（LN）的含量；用实时定量PCR方法检测人肾小球系膜细胞转化生长因子-β1mRNA（TGF-β1mRNA）、纤维蛋白溶解酶原激活物抑制剂-1mRNA（PAI-1mRNA）的表达。结果：（1）虫草肾茶胶囊高剂量药物血清对高糖（30mmol／L）刺激下24h、48h和72h的HMC的增殖均有抑制作用（p＜0.05，p＜0.01），其作用优于福辛普利药物血清。虫草肾茶胶囊中、低剂量药物血清对高糖刺激下48h和72h的HMC的增殖有抑制作用（p＜0.05）。（2）在48h和72h时段，虫草肾茶胶囊高、中剂量组TGF-β1的分泌明显低于高糖组（p＜0.05，p＜0.01），而虫草肾茶胶囊低剂量药物血清及福辛普利药物血清对72h时段TGF-β1的分泌有抑制作用（p＜0.05）。在抑制TGF-β1的分泌方面，虫草肾茶胶囊优于福辛普利。（3）虫草肾茶胶囊高、中、低剂量组及福辛普利组48h及72h HMCⅣ型胶原的合成均低于高糖组（p＜0.05，p＜0.01）。（4）虫草肾茶胶囊高剂量组细胞培养上清中FN、LN在48h时段和72h时段的分泌均低于高糖组（p＜0.05，p＜0.01），而虫草肾茶胶囊中、低剂量药物血清及福辛普利药物血清在72h时段可减少细胞培养上清中FN、LN的分泌（p＜0.05，p＜0.01）。（5）虫草肾茶胶囊高、中剂量组及福辛普利组TGF-β1mRNA和PAI-1mRNA表达均低于高糖组，且以虫草肾茶胶囊高剂量组表达最低（p＜0.05）。结论：虫草肾茶胶囊可以抑制高糖刺激下HMC的增殖，降低高糖刺激下TGF-β1及细胞外基质（ECM）主要成分FN、LN、Col-Ⅳ的合成和分泌，下调高糖刺激下HMC TGF-β1mRNA及PAI-1mRNA的表达，起到延缓DN进展的作用。
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