苦瓜（Momordica charantia L.）总皂甙提取方法及高皂甙苦瓜品种筛选研究

论文摘要

本研究从优化苦瓜皂甙含量测定方法入手,确定超声波法对苦瓜皂甙的最佳提取工艺条件,然后研究苦瓜不同生长期和植株不同营养器官总皂甙含量的变化,同时对苦瓜品种间总皂甙含量的变异及苦瓜果实性状与苦瓜总皂甙含量的相关性进行研究,为制定能够实现苦瓜高皂甙含量目标的有效栽培、利用和育种新技术提供理论依据。本研究结果表明:1.确定了苦瓜总皂甙含量测定方法建立比色法测定苦瓜提取物中总皂甙的含量,为苦瓜的质量控制提供依据和方法。通过对比色条件进行优化,选出最佳条件:香草醛-冰醋酸-高氯酸为显色剂,加热时间15min,加热温度60℃,显色剂用量0.2 ml 5%香草醛一冰乙酸,0.8ml高氯酸。结果表明,该测定方法精密度高,在40-60min内显色稳定,加样回收率高,平均加样回收率为101.22% ,RSD为1.064%（n=5）,且操作简单,对设备要求不高,是一种快速测定苦瓜总皂甙的好方法。2.优化了苦瓜总皂甙超声提取最适条件研究超声波法提取苦瓜总皂甙的最佳提取条件。研究提取温度、乙醇浓度、固液比和提取时间等因素在不同水平下对苦瓜总皂甙提取率的影响。采用分光光度法,建立了苦瓜总皂甙含量测定方法。结果显示超声波提取法最佳工艺组合为:70%乙醇,固液比为1:30,振荡频率为60%,70℃超声提取30min/次,重复提取两次。本方法操作简便、快速、准确,可作为苦瓜制品提取及质量评价方法。3.不同采收期苦瓜总皂甙含量变化应用植物化学方法,研究苦瓜总皂甙含量与果实采收期的相关性。用超声提取,分光光度法测定苦瓜不同品种1#和53#不同采收期的总皂甙含量。结果表明,苦瓜果实中总皂甙含量随采收期呈现低-高-低的变化趋势,其中在15d左右时总皂甙含量最高,为药用苦瓜最佳采收期。苦瓜不同采收期和品种间的总皂甙含量存在显著的互作效应。因此,在测定不同苦瓜品种间总皂甙含量时应确定在同一采收期。4.不同营养器官苦瓜总皂甙含量变化测定单株苦瓜62#的根、茎、叶、种子的苦瓜总皂甙含量,研究其总皂甙含量的差异。结果表明,不同营养器官中苦瓜总皂甙含量果实最高,为1.644%。种子、叶、茎依次降低,根含量最低,为0.0744%。5.研究了苦瓜品种间总皂甙含量的变异测定了15个苦瓜品种的总皂甙含量。结果表明:苦瓜不同品种间总皂甙含量差异达极显著水平,苦瓜品种间皂甙含量存在遗传变异。苦瓜总皂甙含量在0.90%-2.91%之间变化,皂甙含量最高的品种为63#。6.研究了苦瓜果实性状与苦瓜总皂甙含量的相关性本试验对15个苦瓜品种的10个果实性状进行了调查研究。结果表明,苦瓜皂甙含量与果色的遗传相关系数呈极显著正相关;与苦味、果形的遗传系数呈显著正相关;与果瘤、果长的遗传相关系数呈显著负相关。果瘤、果色、果型和果刺4个外观品质性状之间相关密切,往往某一性状的变化会带来其它性状的变化。因此,通过对外观品质的选择,可以对高皂甙苦瓜进行间接选择。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 1 引言
• 1.1 苦瓜历史考证及植物学特征
• 1.2 苦瓜的营养成分研究概况
• 1.3 国内外皂甙研究进展
• 1.4 苦瓜的生理作用
• 1.5 本研究的目的和意义
• 2 材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.2 试验设计
• 2.2.1 苦瓜总皂甙的含量测定条件优化
• 2.2.2 苦瓜总皂甙的超声提取条件优化
• 2.2.3 不同采收期苦瓜总皂甙含量变化
• 2.2.4 不同营养器官苦瓜总皂甙含量变化
• 2.2.5 苦瓜品种间总皂甙含量的变异
• 2.2.6 苦瓜果实性状与苦瓜总皂甙含量的相关性研究
• 2.3 测定项目与方法
• 2.3.1 苦瓜总皂甙的定性分析
• 2.3.2 测定波长的选择
• 2.3.3 标准曲线绘制
• 2.3.4 样品皂甙质量分数的测定
• 2.3.5 稳定性实验
• 2.3.6 精密度实验
• 2.3.7 回收率试验
• 2.3.8 果实性状观察记录
• 3 结果与分析
• 3.1 苦瓜总皂甙的含量测定条件优化
• 3.1.1 波长的选择
• 3.1.2 标准曲线和回归方程的建立
• 3.1.3 稳定性考察结果
• 3.1.4 精密度测定结果
• 3.1.5 回收率测定结果
• 3.1.6 显色剂的选择
• 3.1.7 高氯酸用量的选择
• 3.1.8 加热温度选择
• 3.1.9 加热时间选择
• 3.1.10 苦瓜总皂甙含量测定方法的确立
• 3.2 苦瓜总皂甙的超声提取条件优化
• 3.2.1 溶剂的浓度对苦瓜皂甙提取的影响
• 3.2.2 振动频率对苦瓜皂甙提取的影响
• 3.2.3 时间对苦瓜皂甙提取的影响
• 3.2.4 温度对苦瓜皂甙提取的影响
• 3.2.5 液料比对苦瓜皂甙提取的影响
• 3.3 不同采收期苦瓜总皂甙含量的变化
• 3.3.1 不同采收期苦瓜总皂甙含量差异
• 3.3.2 不同品种与不同采收期的互作效应
• 3.4 不同营养器官苦瓜总皂甙含量的变化
• 3.5 品种间苦瓜总皂甙含量的变异
• 3.6 苦瓜果实性状与总皂甙含量的相关性
• 4 讨论
• 4.1 苦瓜总皂甙含量测定方法研究
• 4.2 超声法提取苦瓜总皂甙研究
• 4.3 不同采收期总皂甙含量变化
• 4.4 不同营养器官总皂甙含量变化
• 4.5 不同品种间总皂甙含量的变异
• 4.6 不同果实性状遗传相关系数的分析
• 5 结论
• 参考文献（REFERENCES）
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表论文