骨髓基质干细胞定向诱导分化及其对急性脊髓损伤神经功能恢复的实验研究

论文摘要

目的 本研究的目的是探索体内外骨髓基质干细胞（bone marrow stromal cells,BMSCs）定向诱导分化为神经细胞的可行性,观察BMSCs对大鼠急性脊髓损伤神经功能恢复的影响。 实验材料与方法 实验动物:Wistar健康成年大鼠41只,体重250-350g,雌雄不限。随机分为四组:（1） BMSCs组:14只,脊髓左侧半切7天后在损伤临近区注射BMSCs;（2） PBS组:14只,脊髓左侧半切7天后在损伤临近区注射PBS;（3） 单纯脊髓半切组:10只,单纯行脊髓左侧半切;（4） 假手术组:3只,仅咬除T8、9棘突和椎板;Wistar幼鼠4只,体重约100g左右,雌雄不限,用来进行BMSCs原代培养。 试剂及仪器:试剂包括:DMEM（低糖,Gibico）,维甲酸（RA）、脑源性神经营养因子（BDNF）（美国,Sigma）、兔抗鼠GFAP单克隆抗体、兔抗鼠NSE单克隆抗体等免疫试剂（武汉博士德公司）。主要仪器:①CO2培养箱②超净工作台③倒置显微镜和光学显微镜及显微照相设备（OLYMPUS日本）④动物立体定向仪⑤六孔培养板、25ml培养瓶,细胞计数板等。 实验方法: 1、将Wistar幼鼠脱颈法处死,于无菌条件下冲出股骨内骨髓,以1×109/L细胞密度种植于25ml的培养瓶,37℃,5%体积分度CO2恒温培养箱中培养。待细胞融合达90%以上时进行传代培养。 2、应用维甲酸（RA）、脑源性神经营养因子（BDNF）作为诱导剂对幼鼠BMSCs进行体外诱导,全程观察其形态变化,并对诱导后14天细胞用免疫组化染色的方法鉴定神经元烯醇化酶（NSE）,胶质纤维酸性蛋白（GFAP）

论文目录

• 一、摘要
• 1.中文论著摘要
• 2.英文论著摘要
• 二、英文缩略语
• 三、论文
• 1.前言
• 2.实验材料与方法
• 3.实验结果（附论文图片）
• 4.讨论
• 5.结论
• 6.本研究创新性的自我评价
• 7.参考文献
• 四、附录
• 1.综述
• 2.致谢
• 3.个人简介