菌草灵芝菌糟提取工艺研究及提取物在奶牛饲料中的应用

论文摘要

本课题以菌草灵芝菌糟为材料,研究其提取工艺,提取物质量标准、多糖抗氧化活性,多糖组分以及提取物在奶牛饲料添加剂中的应用,研究结果如下：1、通过单因素试验和正交试验探索菌草灵芝菌糟的提取工艺,研究提取温度、浸泡时间、提取时间、料液比和提取次数对菌草灵芝菌糟提取的影响；综合分析,最终确定菌草灵芝菌糟提取的最适工艺为：提取温度100℃、提取时间2 h、料液比1：10,浸泡时间12 h,提取次数1次；通过验证,最适条件下：浸膏得率为22.89%,粗多糖得率为10.91%。2、控制提取物质量的稳定性,是其应用研究的重要前提,因此,本课题通过测定不同批次提取物中多糖、蛋白质、水分和粗灰分的含量,初步确定提取物的质量标准。多糖是提取物的活性成分,作为提取物质量控制的主要检测项目,初步确定,粗多糖含量限量值为≥39%,多糖含量限量值为≥9%。3、抗氧化活性是多糖主要的生物活性之一,试验测定了不同浓度的菌草灵芝菌糟多糖的抗氧化能力,结果显示,多糖浓度与羟基自由基的清除率有一定的量效关系,与还原力也存在明显的量效关系,而对超氧阴离子清除效果不明显。4、本课题对除蛋白后的菌草灵芝菌糟多糖进行分级醇沉,得到20%、33.3%、50%、66.7%、75%的多糖级份。结果显示,20%级份多糖对羟基自由基的清除能力最强；33.3%级份多糖的还原力最强；而超氧阴离子清除试验的测定结果并未显示出其清除作用。5、本试验通过葡聚糖凝胶G-100,对各个级份多糖进行纯化及纯度鉴定。结果显示,纯化后各个级份多糖的洗脱曲线都只出现一个均匀对称的峰,说明各个级份多糖已初步纯化。6、本课题还将菌草灵芝菌糟提取物作为饲料添加剂,研究其对奶牛生产性能、乳品质及奶牛机体免疫功能的影响,添加量为170g/d/头,试验期30 d。结果表明,试验组和对照组各项指标都没有显著性差异,但是,有一定促进作用的趋势,即菌草灵芝菌糟提取物能在一定程度上提高奶牛的产奶量,减缓泌乳后期产奶量的下降,并维持乳品质的稳定；对奶牛的血液生化指标有一定的调节作用;整个试验期,试验组牛奶中三种免疫球蛋白的含量都呈上升趋势；奶牛血清中三种免疫球蛋白的含量,到试验的第二阶段也呈现出上升的趋势,试验组奶牛血清中IgG的含量相对对照组增加13.48%,IgM相对增加了10%,IgA相对增加了4.11%；到试验的第二阶段,试验组奶牛的抗氧化能力都有明显提升,试验组奶牛的总抗氧化（T-AOC）能力比对照组提高了23.61%,谷胱甘肽过氧物酶（GSH-PX）活性相对对照组提高了3.94%,丙二醛（MDA）含量相对对照组降低了4.91%,超氧化物歧化酶（SOD）的活性没有明显的差异。

论文目录

• 摘要
• Abtract
• 第一章 文献综述
• 1 菌糟再利用的研究
• 1.1 菌糟的营养价值
• 1.2 菌糟的综合利用
• 1.3 菌草菌糟
• 2 食用菌多糖提取纯化的研究
• 2.1 多糖提取
• 2.2 多糖纯化
• 2.2.1 多糖脱蛋白方法研究
• 2.2.2 多糖脱色方法研究
• 2.3 多糖鉴定
• 3 灵芝多糖生物活性的研究
• 3.1 灵芝多糖抗氧化活性研究
• 3.2 灵芝多糖免疫调节作用研究
• 4 本课题的研究目的和意义
• 第二章 菌草灵芝菌糟提取工艺优化及提取物的质量控制
• 1 材料与方法
• 1.1 供试材料
• 1.2 主要仪器
• 1.3 试验材料制备
• 1.4 试验方法
• 1.4.1 菌草灵芝菌糟提取工艺优化
• 1.4.1.1 菌草灵芝菌糟提取物单因素提取条件的研究
• 1.4.1.2 菌草灵芝菌糟提取物的正交试验设计
• 1.4.2 菌草灵芝菌糟提取物质量控制
• 1.4.2.1 水分测定方法
• 1.4.2.2 粗灰分测定方法
• 1.4.2.3 多糖含量测定方法
• 1.4.2.4 蛋白质含量测定方法——考马斯亮蓝法
• 2 结果与分析
• 2.1 菌草灵芝菌糟主要成分测定结果
• 2.2 菌草灵芝菌糟提取物提取单因素结果
• 2.2.1 提取时间对菌草灵芝菌糟提取物提取率的影响
• 2.2.2 提取温度对菌草灵芝菌糟提取物提取率的影响
• 2.2.3 料液比对菌草灵芝菌糟提取物提取率的影响
• 2.2.4 浸泡时间对菌草灵芝菌糟提取物提取率的影响
• 2.2.5 提取次数对菌草灵芝菌糟提取物提取率的影响
• 2.3 菌草灵芝菌糟提取物提取正交试验设计结果
• 2.4 菌草灵芝菌糟提取物质量控制的结果
• 2.4.1 不同批次提取物多糖含量的测定结果
• 2.4.1.1 葡萄糖标准曲线的制定
• 2.4.1.2 不同批次提取物多糖含量测定
• 2.4.2 不同批次提取物蛋白质含量的测定结果
• 2.4.2.1 蛋白质标准曲线的制定
• 2.4.2.2 蛋白质含量测定
• 2.4.3 不同批次提取物水分含量的测定结果
• 2.4.4 不同批次提取物粗灰分含量的测定结果
• 3 讨论
• 3.1 菌草灵芝菌糟主要成分
• 3.2 菌草灵芝菌糟提取物提取单因素试验
• 3.3 菌草灵芝菌糟提取物提取正交试验
• 3.4 菌草灵芝菌糟提取物质量控制的研究
• 第三章 菌草灵芝菌糟多糖提取纯化及抗氧化活性的研究
• 1 材料与方法
• 1.1 供试材料
• 1.2 主要仪器
• 1.3 试验方法
• 1.3.1 菌草灵芝菌糟多糖的分离纯化
• 1.3.1.1 醇提除杂
• 1.3.1.2 粗多糖的提取
• 1.3.1.3 粗多糖脱蛋白
• 1.3.1.4 分级沉淀
• 1.3.2 各级份多糖抗氧化活性测定
• 1.3.2.1 羟基自由基的清除
• 1.3.2.2 超氧化阴离子的清除
• 1.3.2.3 还原力的测定
• 1.3.3 各级份多糖凝胶柱层析分离纯化
• 1.3.4 各级份多糖纯度鉴定
• 2 结果与分析
• 2.1 菌草灵芝菌糟多糖分离纯化
• 2.2 多糖抗氧化活性测定结果
• 2.2.1 羟基自由基的清除
• 2.2.2 超氧化阴离子的清除
• 2.2.3 还原力的测定结果
• 2.3 不同级份多糖凝胶柱层析
• 2.4 不同级份多糖纯度鉴定
• 3 讨论
• 3.1 菌草灵芝菌糟多糖分离纯化的研究
• 3.2 多糖抗氧化活性的研究
• 3.2.1 不同浓度多糖抗氧化活性的研究
• 3.2.2 不同级份多糖抗氧化活性的研究
• 3.3 不同级份多糖凝胶柱层析
• 第四章 菌草灵芝菌糟提取物对奶牛生产性能及血液生化指标的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 主要仪器
• 1.3 试验方法
• 1.4 试验日粮及饲养管理
• 1.4.1 试验日粮
• 1.4.2 饲养管理
• 1.5 测定项目与方法
• 1.5.1 产奶量
• 1.5.2 乳成分
• 1.5.3 奶牛血液生化指标
• 2 结果与分析
• 2.1 产奶量测定结果
• 2.2 乳成分测定结果
• 2.3 奶牛血液生化指标测定结果
• 2.3.1 奶牛血清钙（Ca）、磷（P）含量的测定结果
• 2.3.2 奶牛血清尿素氮含量的测定结果
• 2.4.2 奶牛血清总胆固醇和血清甘油三脂含量的测定结果
• 2.4.3 奶牛血清谷丙转氨酶活性和碱性磷酸酶活性的测定结果
• 2.4.4 奶牛血清中总蛋白、白蛋白和葡萄糖含量的测定结果
• 3 讨论
• 3.1 菌草灵芝菌糟提取物对奶牛产奶量和乳成分的影响
• 3.1.1 菌草灵芝菌糟提取物对奶牛产奶量的影响
• 3.1.2 菌草灵芝菌糟提取物对乳成分的影响
• 3.2 菌草灵芝菌糟提取物对奶牛血液生化指标的影响
• 3.2.1 菌草灵芝菌糟提取物对奶牛血清中钙、磷的影响
• 3.2.2 菌草灵芝菌糟提取物对奶牛血清中尿素氮的影响
• 3.2.3 菌草灵芝菌糟提取物对奶牛血清中总胆固醇和甘油三酯的影响
• 3.2.4 菌草灵芝菌糟提取物对奶牛血清中谷丙转氨酶和碱性磷酸酶的影响
• 3.2.5 菌草灵芝菌糟提取物对奶牛血清中总蛋白、白蛋白和葡萄糖的影响
• 第五章 菌草灵芝菌糟提取物对奶牛机体免疫力的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 主要仪器
• 1.3 试验方法
• 1.4 试验日粮及饲养管理
• 1.5 测定项目与方法
• 1.5.1 牛奶免疫球蛋白
• 1.5.2 奶牛血液免疫球蛋白
• 1.5.3 奶牛机体抗氧化能力
• 1.6 试验数据的处理
• 2 结果与分析
• 2.1 牛奶中免疫球蛋白含量的测定结果
• 2.2 奶牛血液中免疫球蛋白含量的测定结果
• 2.3 奶牛血液抗氧化活性测定结果
• 3 讨论
• 3.1 菌草灵芝菌糟对牛奶中免疫球蛋白的影响
• 3.2 菌草灵芝菌糟对奶牛血液中免疫球蛋白的影响
• 3.3 菌草灵芝菌糟对奶牛血液抗氧化活性的影响
• 参考文献
• 致谢