培土生金法对脾虚哮喘大鼠嗜酸细胞凋亡及对Fas mRNA、Bcl-2 mRNA表达的影响

论文摘要

目的：通过对各种“宿根”学说的分析，借助于现代医学对中医“宿根”概念的新认识，在前期临床与实验研究的基础上，首次明确提出“脾虚为哮喘宿根”的新假说。以培土生金立法，采用健脾益肺的方药，应用现代分子生物学的方法，观察其对脾虚哮喘大鼠嗜酸性粒细胞凋亡形态学及对Fas mRNA、Bcl-2 mRNA表达的影响，探讨脾虚对哮喘的影响及培土生金法治疗哮喘的作用机制。 方法：以中医理论为指导，复合利用中医脾虚动物模型和西医哮喘动物模型的造模方法，建立大鼠脾虚哮喘病证结合的模型。造模成功后，采用培土生金的方法进行治疗。采用TUNEL法进行细胞原位凋亡的检测，肺组织中Fas mRNA、Bcl-2 mRNA的检测采用原位杂交法，并采用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）测定BALF液中IL-5、GM-CSF的浓度。应用光镜对肺组织形态学进行观测。 结果：病证结合组和疾病组同对照组比较，均表现为BALE中GM-CSF的浓度显著升高和TGF-β浓度的显著下降（P＜0.01），病证结合组和疾病组与对照组比较，均表现为EOS计数值升高、EOS凋亡率下降（P＜0.01或P＜0.05），病证结合组和疾病组同对照组比较，均表现为EOS上的Fas mRNA表达的显著减少和Bcl-2mRNA表达的显著增多（P＜0.01）。与相应的疾病组相比较，两中药组（A1，B1）GM-CSF的浓度显著降低P（＜0.01），TGF-β浓度的显著升高（P＜0.01或P＜0.05）；与相应的疾病组相比较，两中药组中EOS凋亡率明显升高（P＜0.05）或P＜0.01)，同时，与相应的疾病组相比较，两中药组(（A1，B1）Bcl-2mRNA表达显著减少（P＜0.01），Fas mRNA表达明显增多（P＜0.01或P＜0.05）。各组大鼠肺组织中Fas mRNA的表达与EOS的凋亡间存在明显的正相关（r=0.62，p＜0.05），Bcl-2mRNA的表达与EOS的凋亡间存在着明显的负相关（r=-0.58，p＜0.05）；各组大鼠BALF中的TGF-β浓度水平与EOS的凋亡率呈显著正相关（r=0.51，p＜0.05），各组大鼠BALF中的GM-CSF浓度水平与EOS的凋亡率呈显著负相关（r=-0.65，p＜0.01）。病理结果显示：疾病组与病证结合组均有不同程度的支气管及肺组织炎性病变，两治疗组的支气管及肺组织的炎症病变均有所减轻。 结论：培土生金法能促进模型大鼠哮喘及脾虚哮喘状态下EOS的凋亡；培土生金法能上调模型大鼠肺组织EOS表面Fas mRNA的表达，下调EOS表面Bcl-2 mRNA的表达；培土生金法能提高模型大鼠BALF中TGF-β的浓度，降低GM-CSF的浓度；培土生金法能减轻模型大鼠的大、小气道及肺组织的炎症。

论文目录

• 英文缩略语词表
• 英文摘要
• 中文摘要
• 前言
• 实验研究
• 一、材料与方法
• 1.实验动物及分组
• 2.动物模型的建立
• 3.处理因素
• 4.标本采集及制备
• 5.观察指标及测定方法
• 6.实验数据的处理
• 二、结果与分析
• 1.培土生金法对脾虚哮喘大鼠血及BALF中EOS的影响
• 2.培土生金法对脾虚哮喘大鼠BALF中TGF-β、GM-CSF浓度的影响
• 3.培土生金法对脾虚哮喘大鼠肺组织EOS凋亡的影响
• 4.培土生金法对脾虚哮喘大鼠肺组织Fas mRNA、Bcl-2mRNA表达的影响
• 5.培土生金法对脾虚哮喘大鼠肺组织形态学的影响
• 6.Fas mRNA、Bcl-2mRNA的表达、相关细胞因子浓度与EOS凋亡的相关性分析
• 三、讨论
• 1.祖国医学对哮喘的认识
• 2.现代医学对哮喘发病机理的认识
• 3.哮喘病证结合动物模型的建立
• 4.EOS凋亡在支气管哮喘炎症机制中的作用
• 5.脾虚为哮喘之宿根
• 6.培土生金法的作用与机制
• 结语
• 参考文献
• 文献综述
• 1.炎性细胞凋亡与支气管哮喘
• 2.支气管哮喘的中西医研究进展
• 附录图片
• 致谢
• 个人简历