论文摘要
目的: 1.探讨建立稳定的大鼠部分肝移植（ partial liver transplantation）动物模型的方法和手术技巧,为进一步的实验提供能够长期存活的稳定的部分肝移植动物模型。2.研究补体C3a活性片段早期干预同种大鼠部分肝移植后移植肝的病理表现、肝功能、增殖细胞核抗原标记指数（proliferating cell nuclear antigen labeling index, PCNA LI）和TNF-α、IL-6 mRNA表达变化,探讨补体C3a活性片段对大鼠肝部分移植后早期肝再生的影响。方法:1.采用Kamada“二袖套法”,稍加改进建立大鼠原位60%肝移植动物模型,即供肝切除肝左叶及双尾叶,采用端端连续缝合法吻合肝上下腔静脉,用双袖套法吻合门静脉及肝下下腔静脉,肝动脉结扎不予重建,胆管用内支架法完成胆道重建。术后观察生存质量,总结手术技巧、经验和方法,掌握成熟稳定的大鼠肝部分移植动物模型技术。2.采用上述方法建立Sprague-Dawley（SD）到SD补体C3a活性片段实验组（A组）和SD到SD生理盐水对照组（B组）部分肝移植动物模型。实验组术后每6h腹腔注射补体C3a活性片段100ug,对照组给与等量的生理盐水。每组正常存活大鼠24只,于术后12h、24h、48h和72h分别活杀6只取外周血浆及肝脏组织标本;光镜观察肝脏组织形态学改变;全自动生化分析仪检测外周血浆ALT;免疫组织化学检测PCNA、Real Time-PCR检测TNF-α和IL-6 mRNA的表达。结果:1.通过手术操作训练,建立起稳定的大鼠部分肝移植实验模型。A和B两组间手术时间、供肝冷保存时间、受体无肝期时间相比较无显著差异。2.血清ALT检测:A、B组间相比较,A组血清ALT术后48h和72h分别为216.7±24.6U/L和143.4±18.7U/L;B组术后48h和72h血清ALT分别为466.6±32.8U/L和321.6±28.6U/L,两组间差异有统计学意义（P<0.05）;其余时间点比较无显著性差异。3.肝细胞PCNA LI的变化:两组中PCNA LI的高峰均出现在术后48h,A组和B组的峰值分别为423.8±54.6和286.5±32.4;A组术后24h和48h的PCNA LI分别为296.8±36.2和423.8±54.6,B组术后24h和48h的PCNA LI分别为172.4±28.5和286.5±32.4,A组术后24h和48h的PCNA LI均明显高于B组术后同一时间点的PCNA LI,两组间差异有统计学意义（P<0.05）,而其余观察时间点的PCNA LI则无显著性差异。4.肝组织TNF-α和IL-6 mRNA表达的变化:A、B两组TNF-α和IL-6 mRNA表达的高峰均出现在术后第48h,术后72h出现下降趋势。A组与B组在术后24h和48h比较差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论:1.大鼠部分肝移植术后早期应用补体C3a活性片段可促进肝细胞的再生,降低血清ALT,起到保护肝功能的作用。2.大鼠部分肝移植术后早期应用补体C3a活性片段促进肝细胞再生可能通过上调大鼠部分肝移植术后TNF-α和IL-6 mRNA的表达发挥作用。
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