论文摘要
背景脊髓损伤近年来发病率有增高的趋势并呈现出高发生率,高致残率,高耗费,低死亡率的特点。组织工程学治疗脊髓损伤是目前研究的热点之一,它能整合治疗研究的各种有效策略,诱导轴突再生并提供良好的三维通道,减少胶质瘢痕和空洞形成。支架是组织工程研究中的关键,目前尚无与脊髓三维结构高度相似且在理化性能也与脊髓相似的支架材料。近年来一种新的趋势是采用天然的脱细胞基质作为神经组织的修复材料,即用同种异体来源的材料,采用脱细胞技术制备的脱细胞基质,经过去细胞、部分或完全去除有机质或无机质、去抗原等处理,形成生物衍生材料（bio-derived material ）,用于组织工程研究。理论上讲将脊髓组织进行脱细胞处理构建理想的组织工程支架是可行的,但目前尚无相关文献报道。目的通过采用物理冻融结合化学萃取方法初步构建大鼠脱细胞脊髓支架并优化脱细胞方案,应用HE染色、髓鞘染色及扫描电镜等方法评价制备脱细胞脊髓支架的可行性,然后通过对支架的成分分析、免疫原性分析、细胞毒性、组织相容性,血液相容性、全身毒性反应等检测评价脱细胞脊髓支架的生物安全性,并将神经干细胞与支架复合,观察细胞在支架材料上的生长情况,评价支架材料的细胞相容性,从而为构建理想的组织工程脊髓支架提供实验基础。方法1.脱细胞方案的确定:采用冻融结合化学萃取方法制备脱细胞脊髓支架,并应用HE染色、髓鞘染色及扫描电镜等方法检测脱细胞效果以确定最合适脱细胞方案。2.脱细胞脊髓支架成分分析及免疫原性检测:应用免疫组织化学方案分析支架可能存在的成分;将脱细胞脊髓支架及同种异体脊髓组织分别进行大鼠椎旁皮下埋植后,于术后1w,2w,3w,4w周取材检测免疫排斥反应情况（免疫组织化学方法）,评价免疫原性。3.脱细胞脊髓支架细胞毒性及全身毒性研究:通过浸提液与细胞共培养评价细胞毒性;通过溶血试验、凝血时间测定评价血液相容性;通过热原试验、全身毒性反应评价支架的全身毒性。4.脱细胞脊髓支架复合神经干细胞体外组织工程脊髓构建研究:将神经干细胞以不同浓度梯度接种在脱细胞脊髓支架上进行联合培养,观察细胞存活情况,比较不同接种密度上架细胞黏附率（Adhesive rate）,绘制生长曲线。免疫组化结果用生物医学图像分析仪行平均光密度（AOD）分析,以重复资料的方差分析、t检验统计结果。结果及结论1、用冻融结合化学萃取法构建脱细胞脊髓组织工程支架是可行的,该支架具有良好的三维网状结构,脱细胞彻底,细胞外基质得到保存;2.构建的脱细胞脊髓支架材料为三维网状结构,具有相互沟通的孔隙,其孔径为6-150μm,孔隙率平均为（93.6±1.5）%,含水能力平均为（58.2±1.6）%。初步显示出支架材料具有良好的结构性能;3.构建的脱细胞脊髓支架材料含有Ⅳ型胶原、LN,FN等对细胞黏附、增殖、分化有利的活性成分,植入大鼠皮下后,未引发明显的炎性细胞浸润显示出支架具有极低的免疫原性;4.构建的支架材料对体外NIH3T3细胞的生长、增殖及代谢无明显抑制作用,无致热原存留,无溶血作用,对凝血功能无影响,无急性全身毒性作用,初步显示出支架材料具有良好的血液相容性及生物安全性;5.构建的支架材料与神经干细胞细胞构建细胞-支架复合体后神经干细胞能在支架内较长时间生存,显示出支架材料良好细胞相容性及广阔的应用前景。
论文目录
相关论文文献
- [1].脊髓结核1例并文献复习[J]. 中国感染与化疗杂志 2020(03)
- [2].脊髓梗死病因、病理改变及诊治方案的研究[J]. 当代医药论丛 2020(09)
- [3].容易受伤的脊髓[J]. 少儿科学周刊(儿童版) 2020(05)
- [4].脊髓修复大作战[J]. 少儿科学周刊(儿童版) 2020(05)
- [5].认识脊髓[J]. 少儿科学周刊(少年版) 2013(11)
- [6].别有滋味的牛脊髓菜[J]. 四川烹饪 2009(12)
- [7].血-脊髓屏障修复在脊髓损伤治疗中作用的研究进展[J]. 中国脊柱脊髓杂志 2019(02)
- [8].特发性脊髓疝1例报告并文献复习[J]. 中国脊柱脊髓杂志 2016(05)
- [9].脊髓修复攻坚战[J]. 少儿科学周刊(少年版) 2020(05)
- [10].为脊髓修复而努力科学家们[J]. 少儿科学周刊(儿童版) 2013(11)
- [11].小细胞肺癌脊髓转移1例报道及文献复习[J]. 中国实用医药 2012(36)
- [12].中西结合治疗胸腰椎爆裂性骨折或合并脊髓不全损伤之体会[J]. 中国医药指南 2008(23)
- [13].一种全颅全脊髓适形照射野的布野方案[J]. 中国医学物理学杂志 2016(03)
- [14].三维适形放疗定位技术于全脑全脊髓放射治疗中的临床应用价值[J]. 中国医药指南 2016(17)
- [15].正常成年小鼠脊髓内部结构的三维重建[J]. 中国数字医学 2009(09)
- [16].是骨髓,不是脊髓[J]. 少儿科学周刊(儿童版) 2020(05)
- [17].脊髓在工作[J]. 少儿科学周刊(少年版) 2020(05)
- [18].容易受伤的脊髓[J]. 少儿科学周刊(儿童版) 2013(11)
- [19].血-脊髓屏障与临床疾病的关系[J]. 中国微侵袭神经外科杂志 2014(02)
- [20].脊髓型多发性硬化临床探析[J]. 心血管病防治知识(学术版) 2013(12)
- [21].神经电生理监测技术在脊髓手术中的应用价值[J]. 中国实用神经疾病杂志 2019(17)
- [22].多次激发扩散成像技术对脊髓高信号的脊髓型颈椎病转归的预测研究[J]. 中国骨与关节杂志 2019(06)
- [23].脊髓毛细胞型星形细胞瘤的临床特点和治疗效果[J]. 华西医学 2018(06)
- [24].脊髓损伤后血脊髓屏障病变机制研究进展[J]. 安徽医科大学学报 2015(12)
- [25].依达拉奉用于围术期脊髓保护的效果观察[J]. 中国医药指南 2013(35)
- [26].脊髓的发育与脊髓畸变及脊髓损伤[J]. 河南大学学报(医学版) 2012(02)
- [27].脊髓髓内结核瘤1例报告并文献复习[J]. 福建医药杂志 2012(05)
- [28].乳腺癌脊髓转移1例[J]. 临床肿瘤学杂志 2011(07)
- [29].脊髓动脉梗死2例临床分析[J]. 科技信息 2009(12)
- [30].应用改进封闭脊髓窗技术活体观察脊髓损伤后脊髓微循环变化[J]. 中国脊柱脊髓杂志 2008(11)
标签：脊髓损伤论文; 脱细胞脊髓支架论文; 化学萃取论文; 成分分析论文; 免疫原性论文; 细胞毒性论文; 血液相容性论文; 生物安全性论文;