出生后早期接触低剂量速灭威对小鼠神经发育的影响

论文摘要

1.研究背景速灭威（m-tolyl methylcarbamate, MTMC）是一种常用的氨基甲酸酯类农药。急性接触高剂量氨基甲酸酯类农药（Carbamates Pesticides CMs）可通过抑制胆碱酯酶活性而产生神经毒性作用,长期接触一定剂量的CMs也可以产生慢性毒作用。但是目前尚不清楚MTMC是否具有的神经发育毒性。2.研究目的于出生后海马发育的关键期,用低剂量MTMC经腹腔注射为小鼠染毒,观察其神经发育有无异常,并探讨其可能的作用机制。3.方法仔鼠于出生后第三天开始腹腔注射MTMC（0.05、0.5、5 mg/kg）,隔天一次,染毒六次,每次染毒前称重以确定染毒体积（2μl/g）,使用一组发育神经行为毒性试验来测量MTMC对仔鼠生理发育、躯体感觉运动及运动协调能力的影响。运用洞板实验（PND 45）观察小鼠生活习性变化,平衡木和抓绳实验（PND 70）观察运动协调能力,黑白巷实验（PND 50）观察焦虑状况,旷场试验（PND 60）评价小鼠自主活动能力及焦虑状况, Morris水迷宫（PND 120）检测小鼠染MTMC后学习记忆能力。末次给药（PND 13）后24 h,每组剖杀10只小鼠（雌雄各半）,测定血胆碱酯酶活力,观察MTMC对体内胆碱酯酶活力的影响;成年小鼠（PND 127）剖杀后测定大脑皮层突触生长相关蛋白-43（GAP-43）的表达,以观察大脑神经突触蛋白表达。统计学处理:SPSS10.0 for windows软件包建立数据库并进行统计分析4.结果小鼠出生后早期有限次数（6次）经腹腔注射接触低剂量MTMC（最高剂量不抑制全血胆碱酯酶活力）,观察MTMC对神经发育的影响,结果发现:（1）各组小鼠毛色光洁度、活力、步态、分泌物、眼外观、呼吸、神态等无异常表现。小鼠体重增长在组间差异无显著性。（2）各MTMC组小鼠开眼达标时间均延迟（P <0.01）,5mg/kg MTMC组小鼠下牙萌出达标时间延迟（P <0.05）,而其他早期生理发育指标（上牙萌出、睾丸下降、阴道开启等）均正常达标。（3）各MTMC组小鼠的前肢悬挂、平面翻正、负趋地性行为学指标达标时间正常,但悬崖回避达标时间均延迟（P <0.05）,且存在剂量-反应关系（r=0.98,P <0.05）;至青年期,在同样反映躯体感觉运动功能的平衡木和抓绳测试中,各组小鼠得分差异无统计学意义。反映自主活动的指标（洞板上的观洞次数、旷场实验中潜伏期、跨越格子数）和反映焦虑情绪的指标（旷场实验中站立次数、大便颗粒数和捋毛次数及黑白巷潜伏期）在各组间差异均无统计学意义。（4）各MTMC组小鼠在Morris定位航行实验中的登台潜伏期、在Morris空间探索实验中60 s内的游泳总路程均无统计学差异;但在空间探索实验中,小鼠在原平台象限游泳的时间及60 s内穿越原隐匿平台位置的次数,随MTMC染毒剂量的增加而逐渐减少（r分别为-0.98和-0.99,皆P <0.05）,至5mg/kg组有统计学意义（P <0.05）。（5） 5mg/kg及0.5mg/kg MTMC组小鼠大脑皮层GAP-43蛋白含量升高（P <0.01）,且存在剂量依赖性（r=0.91,P <0.05）。5.结论出生后早期接触低剂量MTMC,对仔鼠躯体感觉运动功能发育的影响至青年期可恢复;虽不引起大脑大体形态的改变,但小鼠成年后的空间记忆能力下降,且大脑皮层突触蛋白GAP-43增加。

论文目录

• 英文缩略词表
• 中文摘要
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• 论文正文
• 1. 前言
• 2. 材料与方法
• 2.1 主要仪器设备与试剂
• 2.2 动物来源和处理
• 2.3 实验流程
• 2.4 实验方法
• 2.5 全脑重量的测定
• 2.6 Western blot检测GAP-43蛋白的表达
• 2.7 统计学处理
• 3. 结果
• 3.1 小鼠一般发育情况
• 3.2 MTMC对小鼠早期生理发育的影响
• 3.3 MTMC对小鼠神经行为发育的影响
• 3.4 出生后早期接触MTMC对小鼠成年后神经行为影响
• 3.5 小鼠血 AchE 和 BuChE 含量
• 3.6 对成年后小鼠脑形态大体发育的影响
• 3.7 对成年后小鼠大脑皮层 GAP-43 表达的影响
• 4. 讨论
• 4.1 MTMC 对脑组织胆碱酯酶活性的影响
• 4.2 MTMC 对仔鼠生理发育和断乳前神经行为发育的影响
• 4.3 对成年鼠感觉运动能力的影响
• 4.4 自主性活动与焦虑情绪
• 4.5 对学习记忆的影响
• 4.6 对脑皮层GAP-43的影响
• 5. 结论
• 6. 参考文献
• 7. 小结
• 个人简历
• 致谢
• 综述
• 参考文献