猕猴桃叶总黄酮的提取与纯化研究

论文摘要

黄酮类化合物在植物的花、叶等部位广泛存。植物黄酮类化合物具有抗菌、消炎、抗衰老、抗氧化、治疗心血管疾病、降血脂等生理药理活性。本文以猕猴桃叶为研究对象,采用紫外分光光度法测定猕猴桃叶中总黄酮含量。研究了乙醇回流法提取猕猴桃叶总黄酮的工艺,以及分离纯化猕猴桃叶黄酮的方法,并采用高效液相色谱法对纯化前后猕猴桃叶总黄酮含量进行对比。乙醇回流法提取猕猴桃叶总黄酮的研究中,以乙醇体积分率、提取时间、温度、料液比、提取液pH为考察因素,进行了单因素条件研究。在此基础上进行了正交试验研究,确定最佳提取条件为：以70%乙醇,按照1：60的料液比,pH8的溶剂中,80℃回流提取3小时,得出黄酮一次提取量为：12.10mg／g。影响提取因素的强弱次序为：物料比>提取温度>乙醇浓度>溶剂pH。本文采用静态试验和动态试验方法,以芦丁为猕猴桃总黄酮标准,分别研究了猕猴桃叶黄酮在不同树脂上的吸附及解吸性能。通过静态吸附及解吸对比试验,从五种大孔吸附树脂中筛选出具有较大吸附量及解吸率的D101型和LD601型大孔吸附树脂作为分离猕猴桃叶黄酮提取液的吸附剂,采用动态柱色谱法实施分离。试验结果表明：五种大孔吸附树脂对黄酮的吸附基本上在1h左右都达到了平衡,溶剂pH2-4范围内树脂对黄酮的吸附稳定,且动力学数据拟合结果符合双常数方程,相关系数达到0.94以上,热力学数据用Freundlich等温吸附式和Langmuir等温吸附式进行拟合,相关系数均在0.93以上,⊿H0均小于0,说明吸附是一个自发的放热过程。动力学试验确定出D101树脂和LD601树脂的最佳上样浓度分别为60μg／mL和200μg／mL,上样速率均分别为2mL／min,和3mL／min。解吸剂体积分数均为40%,解吸剂流速均为3mL／min。吸附率达到96%以上,解吸率达到95%以上。本文还对猕猴桃叶提取液中总黄酮进行了分离纯化研究。以D101型和LD601型大孔吸附树脂为吸附剂,以猕猴桃叶黄酮在两种树脂上的最佳动态吸附与解吸条件为操作参数,采用动态柱色谱进行猕猴桃叶提取液中总黄酮的分离纯化,高效液相色谱法检验纯化效果。研究发现D101树脂和LD601树脂对猕猴桃叶总黄酮均有良好的分离纯化作用。D101树脂纯化后总黄酮含量由原液的11.86%提高到24.18%,LD601树脂提高到2.258%,且除去了一些其它成分,杂质含量有所降低。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 猕猴桃及研究概况
• 1.2 黄酮类化合物的基本化学结构及分类
• 1.3 黄酮类化合物的基本理化性质和颜色反应
• 1.4 黄酮类化合物的生物活性
• 1.5 植物中黄酮类化合物提取研究进展
• 1.5.1 溶剂提取法
• 1.5.2 超临界提取法
• 1.6 黄酮类化合物的分离纯化研究进展
• 1.7 黄酮类化合物的含量测定方法
• 1.7.1 分光光度法
• 1.7.2 高效液相色谱法（HPLC）
• 1.7.3 平面色谱法
• 1.7.4 其它测定方法
• 1.8 论文研究的主要内容和意义
• 1.9 本章小结
• 第二章 黄酮的测定及稳定性试验
• 2.1 试剂与仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 黄酮的测定
• 2.2.2 稳定性试验
• 2.3. 结果与分析
• 2.3.1 黄酮的测定
• 2.3.2 稳定性试验
• 2.4 小结
• 第三章 猕猴桃叶中黄酮提取工艺的研究
• 3.1 材料、试剂与仪器
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 原料预处理
• 3.2.2 提取单因素试验
• 3.2.3 提取正交试验
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 单因素试验结果
• 3.3.2 正交实验
• 3.4 本章小结
• 第四章 大孔吸附树脂吸附黄酮的研究
• 4.1 基本原理
• 4.1.1 大孔吸附树脂吸附原理
• 4.1.2 影响大孔树脂吸附、分离的因素
• 4.1.3 大孔树脂的分类
• 4.2 试验部分
• 4.3 试验方法
• 4.3.1 静态试验
• 4.3.2 动态试验
• 4.4 结果与讨论
• 4.4.1 静态试验
• 4.4.2 穿透试验
• 4.4.3 解吸曲线
• 4.4.4 本章小结
• 第五章 黄酮提取液的分离纯化
• 5.1 试验部分
• 5.2 结果与讨论
• 5.2.1 脱色
• 5.2.2 大孔吸附树脂分离纯化
• 5.3 本章小结
• 第六章 结论与建议
• 参考文献
• 致谢