重组人内皮抑素抑制角膜新生血管的实验研究

重组人内皮抑素抑制角膜新生血管的实验研究

论文摘要

目的:研究重组人内皮抑素(recombinant human endostatin,rHES)对碱烧伤诱导大鼠角膜新生血管的抑制作用。方法:48只Wistar大鼠随机分为4组: A组(12只眼),对照组,不做处理;B组(12只眼):双眼角膜碱烧伤后即球结膜下注射生理盐水0.05ml,隔日一次;C、D组(各12只眼):双眼角膜碱烧伤后即分别应用100mg/ml重组人内皮抑素点眼,4次/日和球结膜下注射0.05ml,隔日一次治疗。观察各时间点各组角膜情况及角膜新生血管的生长,碱烧伤后第16天处死动物,取角膜行病理切片观察结构变化,进行免疫组织化学检测VEGF蛋白量,透射电镜研究角膜超微结构变化,PCR检测角膜组织VEGFmRNA的表达量。结果:C组、D组大鼠角膜在碱烧伤后各时间点新生血管面积均小于B组,C组、D组与B组大鼠新生血管面积的差异有统计学意义(P<0.05);D组较C组对新生血管的抑制作用略强,差异无统计学意义(P>0.05)。角膜碱烧伤后第16天免疫组织化学检查结果显示C组与D组VEGF蛋白量差异无统计学意义(P>0.05),其余各组两两比较VEGF蛋白量差异有统计学意义。透射电镜检查显示碱烧伤后第16天,A组正常角膜,各层细胞紧密,结构正常。C、D治疗组较B组结构变化较小。PCR结果可见角膜碱烧伤后第16天时C、D组VEGFmRNA的相对表达量低于B组,但是高于A组。结论:点眼和球结膜下注射方式使用重组人内皮抑素(恩度)即均可有效抑制碱烧伤诱导角膜新生血管。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 符号说明
  • 重组人内皮抑素(恩度)抑制角膜新生血管的实验研究
  • 引言
  • 材料与方法
  • 1 实验材料
  • 1.1 实验对象及分组
  • 2 主要试剂和实验仪器
  • 2.1 主要药品与试剂
  • 2.2 主要实验仪器设备
  • 3 实验方法
  • 3.1 动物模型建立
  • 3.2 干预处理
  • 3.3 实验观察
  • 3.4 病理学检查及电镜标本的制作和观察
  • 3.5 免疫组织化学切片的制备及检测
  • 3.6 实时荧光定量RT-PCR检测大鼠角膜VEGFmRNA
  • 3.7 数据处理
  • 结果
  • 1 裂隙灯观察及角膜新生血管测量结果
  • 2 角膜组织HE染色检测结果
  • 3 免疫组化检测结果
  • 4 透射电镜检测结果
  • 5 RT-PCR 检测结果
  • 5.1 总RNA 的提取结果
  • 5.2 RT-PCR 结果
  • 讨论
  • 1 碱烧伤诱导角膜新生血管
  • 1.1 角膜新生血管模型的建立
  • 1.2 角膜新生血管与VEGF
  • 2 ES 抑制角膜新生血管的应用及前景
  • 2.1 ES 抑制角膜新生血管的机制
  • 2.2 ES 对角膜新生血管的抑制及应用前景
  • 结论
  • 参考文献
  • 综述 内皮抑素与眼部新生血管
  • 致谢
  • 作者简介
  • 导师评阅表
  • 相关论文文献

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