基质金属蛋白酶-2、12在急性脊髓损伤后的表达及意义

基质金属蛋白酶-2、12在急性脊髓损伤后的表达及意义

论文摘要

目的:探讨兔急性脊髓损伤(ASCI)后基质金属蛋白酶-2、12(MMP-2、12)在ASCl后的表达和脊髓损伤的关系,应用不同的MMPs抑制剂改变MMP-2、12的表达水平观察是否可以减轻ASCI继发性损伤,并进一步探讨甲强龙干预ASCI的机制是否与上述2种酶有关,证实MMP-2、12可以被认为是用于干预治疗ASCI的靶分子。方法:采用改良Allen打击法建立家兔ASCI模型,应用ELISA法分别检测对照组、ASCl组、多西环素(DOX)干预组、MP干预组的兔血清中MMP-2、12的表达水平,免疫组织化学染色法检测兔脊髓组织中MMP-2表达,荧光定量PCR法及凝胶电泳法检测兔脊髓组织中,MMP-12表达,对于脊髓损伤的程度,应用改良Tarlov评分法评定动物双后肢运动功能,并对脊髓组织中.MMP-12荧光定量CT值及MMP-2阳性细胞表达率与脊髓损伤后Tarlov评分相关性进行检测。结果:免疫组织化学染色、PCR荧光定量及琼脂凝胶电泳均证实兔ASCI后损伤的脊髓组织中MMP-2、12表达升高,MMP-2免疫组化与MMP-12荧光定量PCR检测显示于损伤后8小时后两者已有显著表达,24小时表达到达高峰,MMP-2表达持续约5天,MMP-12表达持续约2天。血清ELISA检测同样显示MMP-2、12表达较对照组明显升高,并且ASCI后MMP-2、12的表达与脊髓损伤的程度呈正相关。同时应用大剂最MP及DOX干预,能使血清及组织中的MMP-2、12表达明显下降,促进神经功能恢复,在ASCI伤后72小时应用DOX干预仍可下调MMP-2、12。结论:ASCI后免脊髓组织及血清中MMP-2、12均表达升高,上述两种过度表达的因子参与了ASCI,且与ASCI的损伤程度呈正相关,MP及DOX干预可明显降低MMP-2、12的表达,减轻继发性损伤,因此动物实验提示MMP-2、12可能是一个潜在的治疗靶点。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 前言
  • 第一部分:ASCI后基质金属蛋白酶-2、12的表达及分布规律与脊髓损伤的关系
  • 一、ASCI后基质金属蛋白酶-2、12的表达及分布规律
  • 1、材料和方法
  • 2、观察指标
  • 3、附实验所需的试剂及仪器设备
  • 4、结果
  • 5、讨论
  • 二、MMP-2及MMP-12mRNA表达在兔脊髓损伤中的表达与脊髓损伤的相关性研究
  • 1、材料和方法
  • 2、观察指标
  • 3、结果
  • 4、讨论
  • 第二部分:急性脊髓损伤后基质金属蛋白酶-2、12表达干预的实验研究
  • 前言
  • 1、材料和方法
  • 2、观察指标
  • 3、附实验所需的试剂及仪器设备
  • 4、结果
  • 5、讨论
  • 结论
  • 展望
  • 参考文献
  • 致谢
  • 附图
  • 文献综述
  • 基质金属蛋白酶与骨科相关疾病的研究进展
  • 附录 英文缩略词表
  • 个人简历
  • 相关论文文献

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