苦瓜种子发育过程中质量变化的基因型差异及降糖多肽-K提取、纯化条件研究

论文摘要

通过对不同基因型苦瓜品种种子发育过程中果实、种子的外部形态及生理指标的变化和降糖多肽-K提取、纯化条件的研究,从而确定种子的最佳采收时间。研究结果如下:1、对33个苦瓜种质资源的植株、果实和种子等28类形态学性状进行聚类分析,将供试资源划分为3个组群:即野生型组群（组群Ⅰ）、密瘤小果型组群（组群Ⅱ）及长大果型组群（组群Ⅲ）;各类群在形态学存在明显的差异,都能体现本组群的典型形态学特征,从而反映出他们基因型存在明显的差异。各组群间存在明显的地域性差异,地域范围内的种质遗传距离较近,而地域间的种质遗传距离较远。2、对野生型、长大果型、密瘤小果型3个组群的12个苦瓜品种种子发育过程中的果实及种子的形态学性状变化及种子生活力、干重及含水量的变化进行了调查,将种子发育过程分为3个时期:快速膨大阶段、干物质积累阶段及成熟脱水阶段;各基因型的苦瓜种子在发育过程中发生规律性的变化,野生型苦瓜MC4种子发育时间比较短,在授粉后18天（18DAA）即发育到充实成熟;长大果型的MC6苦瓜种子发育时间比较长,在授粉后22天（22DAA）即发育充实成熟;密瘤小果型的MC11苦瓜种子发育时间最长,在22DAA即发育充实成熟,发育过程中果实、种子的外部形态以及种子干物质含量、含水量都发生规律性的变化,存在明显的基因型差异。3、通过酸、碱溶液浸提沉淀,薄层层析初步鉴定到降糖多肽-K的迁移率为0.288,和Khanna院士报道的0.29极为相近,可以初步确定图4-3中B点蛋白可能为降糖多肽-K。4、优化降糖多肽-K变性聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）的条件,分离胶浓度为12%、交联度3%的变性聚丙烯酰胺凝胶能够将目标蛋白条带很好的分开。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 前言
• 1.1 苦瓜的研究背景
• 1.1.1 苦瓜的本草考证
• 1.1.2 苦瓜的起源与传播
• 1.1.3 苦瓜的分类
• 1.1.4 苦瓜的价值
• 1.1.4.1 食用价值
• 1.1.4.2 药用价值
• 1.1.5 苦瓜种质遗传多样性的研究
• 1.1.5.1 遗传多样性的研究方法
• 1.2 种子发育生理生化变化
• 1.2.1 种子发育概念及特点
• 1.2.2 种子发育过程中的生理生化变化
• 1.3 种子发育过程中蛋白质的研究进展
• 1.3.1 种子蛋白的发育与形成
• 1.3.2 苦瓜种子发育过程中蛋白质代谢的研究
• 1.4 苦瓜多肽的研究进展
• 1.4.1 多肽类物质
• 1.4.2 苦瓜种子降糖多肽的类型及基本性质
• 1.5 本课题目的与意义
• 2 苦瓜种质资源遗传多样性的形态学性状聚类分析
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 试验材料
• 2.1.2 实验方法
• 2.1.3 数据处理及分析方法
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 苦瓜种质资源形态性状的基本统计分析
• 2.2.1.1 植株分枝性
• 2.2.1.2 叶柄长度
• 2.2.1.3 叶片性状
• 2.2.1.4 主蔓节间长度和主茎粗度
• 2.2.1.5 第一雌、雄花节位
• 2.2.1.6 果实的形态特征
• 2.2.1.7 种子的形态特征
• 2.2.2 基于形态性状的苦瓜种质分类
• 2.3 讨论与小结
• 3 苦瓜种子发育过程中果实形态学性状变化与种子的生理变化
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 实验仪器
• 3.1.2 试验材料
• 3.1.3 实验方法
• 3.1.3.1 种植与采样
• 3.1.3.2 种子干重、含水量测定
• 3.1.3.3 种子发芽率的测定
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 苦瓜果实和种子发育过程中的形态学性状变化的差异
• 3.2.1.1 苦瓜种子发育过程中瓜皮颜色的变化的差异
• 3.2.1.2 苦瓜种子发育过程中假种皮颜色的变化的差异
• 3.2.1.3 苦瓜种子发育过程中种皮颜色的变化的差异
• 3.2.2 苦瓜种子发育进程中干重和水分的变化差异
• 3.2.3 苦瓜种子发育过程中生活力变化的差异
• 3.3 讨论与小结
• 4 苦瓜种子降糖多肽-K提取纯化条件研究
• 4.1 苦瓜种子降糖多肽-K提取
• 4.1.1 材料与方法
• 4.1.1.1 实验仪器
• 4.1.1.2 实验药品
• 4.1.1.3 苦瓜种子降糖多肽-K的提取
• 4.1.1.4 苦瓜种子降糖多肽-K的检测
• 4.1.2 结果与分析
• 4.1.2.1 苦瓜种子降糖多肽-K提取效果检测
• 4.1.3 讨论与小结
• 4.2 降糖多肽-K的初步鉴定、纯化
• 4.2.1 材料与方法
• 4.2.1.1 实验仪器
• 4.2.1.2 实验药品
• 4.2.1.3 试剂配制
• 4.2.1.4 具体操作步骤
• 4.2.2 结果与分析
• 4.2.2.1 降糖多肽-K的初步鉴定
• 4.2.2.2 降糖多肽-K的回收
• 4.2.3 讨论与小结
• 4.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳条件的优化
• 4.3.1 材料与方法
• 4.3.1.1 实验仪器
• 4.3.1.2 实验药品
• 4.3.1.3 药品配制
• 4.3.1.4 电泳前的样品处理
• 4.3.1.5 电泳具体操作步骤
• 4.3.2 结果与分析
• 4.3.2.1 变性聚丙烯酰胺电泳条件优化结果
• 4.3.3 讨论与小结
• 5 全文结论与讨论
• 5.1 全文结论
• 5.1.1 苦瓜种质资源遗传多样性的形态学性状聚类分析
• 5.1.2 苦瓜种子发育过程中果实形态学性状变化与种子生理变化的差异分析
• 5.1.3 苦瓜种子降糖多肽-K提取、鉴定和纯化条件研究
• 5.2 全文讨论
• 5.2.1 苦瓜种质资源遗传多样性的形态学性状聚类分析
• 5.2.2 苦瓜种子发育过程中果实形态学性状变化与种子生理变化的差异分析
• 5.2.3 苦瓜种子降糖多肽-K提取、鉴定和纯化条件研究
• 5.3 后续研究
• 致谢
• 参考文献
• 附图
• 攻读硕士学位期间发表的论文