神经生长因子对大鼠脑缺血再灌注后Fas-L蛋白和p-PKB表达的影响

论文摘要

目的:采用SD大鼠脑缺血再灌注模型,观察不同时间点大鼠神经功能缺损情况及p-PKB（磷酸化蛋白激酶B）和Fas-L （Fas ligand,Fas配基）的表达情况,并探讨NGF（神经生长因子）对它的影响,为临床应用NGF（神经生长因子）治疗缺血性脑血管病提供依据。方法:健康成年SD大鼠55只（大连医科大学实验动物中心）,雌雄不限,体重200-250g,清洁级,饲养环境温度21oC,自由进食水;随机分为假手术组（n=5）（第一组）;缺血再灌注组（n=30）,按缺血2h再灌注2h、6h、12h、24h、48h、72h再分为6组（分别为2、3、4、5、6、7组）,每组5只;NGF组（第8f组和8p组,8f组是缺血2h再灌注6h注射NGF,8p组为缺血2h再灌注72h注射NGF）和生理盐水对照组（第9f组和9p组）（各5只,分别为再灌注6h注射生理盐水和再灌注72h注射生理盐水）。参照Nagasawa报告的方法,用10%的水合氯醛（0.35ml/100g腹腔注射）麻醉动物,取仰卧位固定在手术台上,行右侧MCAO手术,取颈部正中切口,分离出颈总、颈外和颈内动脉,结扎颈外动脉起始处、颈总动脉近心端,在颈总动脉分叉处剪一个小口,把头端蘸有石蜡的直径0.20mm的高弹力鱼线向颈内动脉端插入,继续向前推进,直到感到稍有阻力,约为18mm,提示已到大脑中动脉的起始部,,2h后缓慢拔出鱼线进行再灌注。动物苏醒后观查其行为和体态,判断MCAO模型是否成功。假手术组插入尼龙线后马上拔出,余步骤同手术组。缺血再灌注模型动物清醒后,前肢屈曲内收者为研究对象,8f组是缺血2h再灌注6h注射NGF,8p组为缺血2h再灌注72h注射NGF,方法是:于再灌注5分钟后注射NGF（每100g体重500BU/0.1ml）,9f组和9p组分别为再灌注6h和再灌注72h以同样的方法注射相同体积的生理盐水。分别观察几组动物的Zea Long5分制评分和大鼠脑内p-PKB蛋白和Fas-L基因蛋白的表达。结果:神经功能评分: 2- 9组分别为: 2.000±0.6032,2.200±0.4112,2.400±0.6880,2.600±0.3348,2.800±0.4621,3.000±0.5864, 1.400±0.6253（8f）,2.300±0.3650（8p）,2.200±0.6903（9f）,3.100±0.0038（9p）,其中NGF组与盐水组比较:分别比较8f组和9f组、8p组和9p组,神经功能障碍均明显减轻（p<0.05）。脑缺血再灌注后,大鼠脑内Fas-L 6h达高峰,后减少。与缺血再灌注组相比,NGF干预组Fas-L表达减少,p-PKB于72h达最高,与缺血再灌注组相比,NGF干预组p-PKB表达增多。结论:肌肉注射NGF对脑缺血再灌注有明显的保护作用,增加p-PKB表达、抑制Fas-L蛋白表达可能是其机制之一。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料和方法
• （五） 结果
• （六） 讨论
• （七） 结论
• （八） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢