人类卵母细胞体外成熟的研究

论文摘要

【目的】研究来源于超排卵周期中的未成熟卵母细胞,观察其在TCM-199培养液中体外培养成熟、受精、胚胎发育及囊胚形成能力,探讨未成熟卵母细胞体外成熟技术（IVM）在超排卵周期中的临床应用价值。【方法】选择在本院进行IVF/ICSI-ET并有未成熟卵的57个周期,比较同源体内成熟卵与体外培养成熟卵进行IVF/ICSI后的正常受精、卵裂、优质胚胎形成情况和超排卵周期未成熟卵体外培养发育至囊胚能力。【结果】未成熟卵母细胞体外培养中72.41%的GV期卵和76.08%的MI期卵在36小时内达到成熟,两组成熟率无明显差异（P>0.05）。两组体内成熟相比,受精率、卵裂、优质胚胎形成率、囊胚形成无明显差异（P>0.05）。体内成熟与体外成熟卵相比较,受精率无明显差异（P>0.05）,但卵裂、优质胚胎形成率低,差异有显著性（P<0.05）。未成熟卵母细胞组经体外培养共有13个囊胚培养形成。【结论】超排卵周期中的未成熟卵,能够继续在体外发育成熟,受精能力良好。虽然卵裂、优质胚胎形成率低于体内成熟卵,但在同一促排周期增加了可移植胚胎数。对同一促排周期所获的未成熟卵行体外成熟培养是可行的,还需进一步研究。【目的】观察200μmol/L Roscovitine对人未成熟卵母细胞体外成熟后纺锤体及染色体形态的影响。【方法】选择在本院进行IVF/ICSI-ET 59个周期中所获未成熟GV期卵母细胞,所获得未成熟卵母细胞随即分为2组。实验组未成熟卵母细胞采用“两步法”培养,先用200μmol/L Roscovitine培养液培养6小时,然后转入TCM-199培养液培养24～36小时;对照组所获未成熟卵母细胞在TCM-199培养液中培养液24～36小时。观察两组卵母细胞体外成熟情况,把MⅡ期成熟卵母细胞固定染色后制片后应用激光扫描共聚焦显微镜观察培养成熟后MⅡ期卵母细胞纺缍体和染色体的形态变化。【结果】实验组共获未成熟卵母细胞61个,经体外成熟培养后50个卵母细胞成熟,其中39个可观察到纺锤体与染色体,纺锤体的形态异常者个15个,染色体异常者11个;对照组共获未成熟卵母细胞60个,经体外成熟培养成熟后43个培养成熟,其中32个可观察到染色体与纺锤体,卵母细胞纺锤体的形态异常者14个,染色体异常者11个。试验组的培养成熟率高于对照组（82%,72%）,但无统计学差异（P>0.05）,纺锤体和染色体形态差异亦无统计学意义（P>0.05）。【结论】Roscovitine能可逆性抑制体外培养卵母细胞的核成熟,抑制作用对纺锤体及染色体形态无不良影响,可能提高未成熟卵母细胞的发育能力。

论文目录

• 第一部分 超排卵周期未成熟卵体外培养的研究
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 资料与方法
• 实验结果
• 讨论
• 参考文献
• 附图1
• 第二部分 ROSCOVITINE 对人卵母细胞纺锤体及染色体形态的影响
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 资料与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 附图 2
• 综述 未成熟卵母细胞体外成熟技术及其在多囊卵巢综合征患者中的应用
• 参考文献
• 致谢