论文摘要
肾细胞癌(renal cell carcinoma)起源于肾实质，占成人恶性肿瘤的3％，全世界每年约有95000例死亡病例。因缺乏早期特异性诊断指标，该病发现时往往已远处转移，出现转移灶病例的5年存活率不足5％。蛋白质组学(proteomics)从整体的角度研究细胞内基因的表达状况，对研究肿瘤发生、发展、转移等起着重要作用。目前应用蛋白质组学技术，已鉴别出对结肠直肠癌、肺癌、乳腺癌等恶性肿瘤的诊断、预后有指导意义的特异性蛋白。但对肾细胞癌的研究报道甚少。本研究通过优化双向电泳技术体系，成功分离、检测到患者肾癌及正常肾组织的差异蛋白质，为疾病的早期诊断、转移机制研究及有效药物靶点的发现提供实验和理论依据。目的：建立肾癌及癌旁组织比较蛋白质组学双向电泳技术研究体系，寻找并鉴定肾癌患者癌组织的特异蛋白，为其发病机制提供线索，并为临床诊断和治疗提供依据。方法：取病理证实的肾癌及癌旁组织相互对照，研磨、超声裂解、抽提蛋白，采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离总蛋白质，凝胶经银染色后，Image Master 2D platinum5.0图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质，应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到相应的肽质量指纹图谱，然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点。结果：从双向电泳图谱上获得蛋白质斑点：肾癌组织1326±78个，癌旁组织1232±56个。筛选并鉴定出具有明显差异的蛋白质：氨基酰化酶等。结论：本研究分析这些差异蛋白有助于寻找具有普遍性意义的肾癌标志物，进而为肾癌的早期诊断和防治提供理论和实验依据；建立了多种生物物种标本的双向电泳技术平台，为蛋白质组学技术在生物学领域的广泛应用提供了支撑技术。
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