论文摘要
目的探讨兔自体外周血间充质干细胞（MSCs）对前交叉韧带（ACL）重建后腱-骨界面愈合的影响。方法以粒细胞集落刺激因子作为外周血MSCs动员剂，体外分离、培养、扩增获得外周血MSCs。48只46月龄新西兰白兔按1-48编号，随机均分为A、B、C三组，以后肢右膝关节作为研究对象，采用趾长屈肌腱作为ACL重建移植物。A组兔将外周血间充质干细胞-生物蛋白胶（FG-MSCs）混合注入兔右膝ACL重建模型股骨道顶端间隙内；B组兔仅注射生物蛋白胶；C组兔交叉韧带重建后不做其他处理。分别在2周、4周、8周、12周各时间点每组各处死4只兔子进行解剖学观察，取材制成石蜡切片行苏木素-伊红染色（Hematoxylin-Eosin Staining,HE）、甲苯胺蓝染色（Toluidine Blue Staining,TB）、Masson三色染色（Masson trichrome staining）进行组织形态学观察，并进行腱-骨界面各时间点成纤维细胞计数及组织形态学Buark评分，以了解腱-骨界面愈合情况。结果（1）①A组：术后2周可见腱-骨界面间隙由疏松结缔组织填充，可见少量成纤维细胞，移植物与骨道之间分离；术后4周可见大量疏松结缔组织、成纤维细胞和少量类软骨细胞及胶原纤维，新生骨形成，腱-骨间隙已不可见；术后8周在腱-骨界面可见大量类软骨细胞，出现Sharpey纤维集结成束，胶原纤维合成增多,排列较规则；术后12周腱-骨间形成致密结缔组织，可见大量排列有序的Sharpey纤维以及纤维软骨、钙化软骨形成，未出现潮线。②B、C组：术后2周腱-骨界面仅见少量疏松结缔组织，少量成纤维细胞增生,未见胶原纤维，同时腱-骨界面明显分离；术后4周腱-骨间可见少量疏松结缔组织及少量新生骨细胞长入，散在分布的类软骨细胞和胶原纤维，且未见与骨道垂直连接；术后8周腱-骨界面为较多类软骨细胞及胶原纤维，Sharpey纤维散在分布；术后12周有较多排列无序的类软骨细胞出现，胶原纤维密集排列不规则，Sharpey纤维排列紊乱。（2）术后各时间点三组腱-骨界面高倍镜下（HE染色）成纤维细胞计数资料采用单向方差分析及SNK法检验：A组*与B组**和A组*与C组***在各时间点比较均有统计学意义（P＜0.05），而B组**与C组***在各时间点比较无统计学意义。（3）基于高倍镜下腱-骨界面的纤维血管组织和Sharpey纤维评定的组织形态学Buark评分统计学资料采用Wilcoxon秩和检验：12周内A组与B组组织形态学Buark评分中位数间的差异有统计学意义（P＜0.01），即A组组织形态学Buark评分较B组高。结论兔自体外周血MSCs通过顶端注射的方式能够促进腱-骨界面的愈合。
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