论文摘要
目的:检测两组人群外周血淋巴细胞穿孔素mRNA的表达水平,探索儿童病毒性心肌炎发病机制与穿孔素的关系,以便有效地预防和治疗小儿病毒性心肌炎。方法:应用半定量逆转录-多聚酶链式反应（RT-PCR）方法对PFP基因进行扩增,以β-actin的扩增产物作为内对照,计算机凝胶图像分析系统对扩增条带进行拍照、扫描定量（密度=亮度/面积）,计算52例病毒性心肌炎患儿和40例随机选取的健康儿童的PFP产物的相对量,结果以均数±标准差表示,进行t检验。对两组数据进行统计学分析,以观察病例组与对照组的结果是否具有统计学意义。结果:（1）所有PFP及β-actin的扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,所示条带分别为369bp和599bp,符合设计片段的大小,因此可确定扩增产物分别为PFP和β-actin。（2）条带密度扫描及半定量分析显示:VMC组患儿PFP/β-actin为1.083±0.145,对照组为0.599±0.161,t=15.13,P<0.01。观察组外周血淋巴细胞PFPmRNA的表达水平较对照组显著增高,两组有显著性差异。结论:穿孔素mRNA水平的增高可能是病毒性心肌炎发病机制的一个重要方面,这一发现对小儿VMC的发生、发展、诊断、治疗、预后有重要意义。
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