乙酰肝素酶与绒毛膜癌侵袭转移特性相关性研究

乙酰肝素酶与绒毛膜癌侵袭转移特性相关性研究

论文摘要

目的:(1)通过研究乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)蛋白在人绒毛膜癌高低转移细胞株及人正常早孕绒毛组织中的表达情况,探讨Hpa高度表达与绒毛膜癌侵袭转移的关系;(2)通过比较Hpa在不同侵袭力人绒毛膜癌细胞株与人正常孕早期滋养层细胞中蛋白表达差异,阐明Hpa与绒毛膜癌高侵袭转移特性的相关性,为Hpa抑制剂及Hpa反义寡核苷酸在绒毛膜癌诊治方面提供理论依据。方法:(1)应用Matrigel体外侵袭试验检测不同人绒毛膜癌细胞系JEG-3与JAR体外侵袭力差异;(2)应用免疫细胞化学及Western-blot方法检测Hpa蛋白在人正常早孕绒毛组织、不同侵袭力人绒毛膜癌细胞株JEG-3及JAR表达情况及差异。结果:(1)Matrigel体外侵袭试验显示JEG-3细胞穿膜数191±16.733,比JAR细胞穿膜数(106±12.572)明显增多,差异具有显著性(P<0.05);(2)免疫细胞化学方法表明Hpa蛋白在绒毛膜癌细胞中有表达且主要定位于胞浆,且JEG-3细胞中Hpa蛋白的表达明显强于JAR细胞;(3)Western-blot结果显示在人正常早孕绒毛组织、高侵袭性JEG-3细胞以及低侵袭性JAR细胞中均可检测到分子量为50kD的Hpa蛋白表达,将三组中Hpa的表达量进行两两比较,发现人绒毛膜癌细胞株中Hpa的表达量明显高于人正常早孕绒毛组织,而具有高侵袭性JEG-3细胞中Hpa的表达量又明显高于JAR细胞,差异具有显著性(P<0.05);(4)相关性分析显示Hpa蛋白表达水平与绒毛膜癌细胞侵袭力正相关。结论:(1)JEG-3细胞体外侵袭力高于JAR细胞;(2)Hpa蛋白在绒毛膜癌细胞中高度表达且定位于胞浆;(3)Hpa蛋白在滋养细胞中的表达与滋养细胞恶性侵袭程度呈正相关。

论文目录

  • 一、中文摘要
  • 二、英文摘要
  • 三、英文缩略语说明
  • 四、论文正文
  • 第一章 前言
  • 第二章 实验路线
  • 第三章 材料和方法
  • 3.1 材料
  • 3.1.1 细胞系
  • 3.1.2 标本采集
  • 3.2 主要试剂及配制
  • 3.3 主要仪器和设备
  • 3.4 研究方法
  • 3.4.1 细胞培养
  • 3.4.2 Matrigel体外侵袭试验
  • 3.4.3 免疫细胞化学
  • 3.4.4 Western-blot
  • 3.5 统计学处理
  • 第四章 结果
  • 4.1 Matrigel体外侵袭试验检测不同绒癌细胞株侵袭力结果分析
  • 4.2 免疫细胞化学技术检测不同绒癌细胞系Hpa蛋白表达情况
  • 4.3 Western-blot检测不同侵袭力绒癌细胞系及人正常早孕绒毛组织Hpa蛋白表达情况
  • 4.4 Hpa蛋白表达与绒癌细胞侵袭力相关性分析
  • 第五章 讨论
  • 5.1 Hpa研究背景
  • 5.2 Hpa结构和功能
  • 5.3 绒癌细胞侵袭转移
  • 5.4 Hpa过度表达与绒癌细胞侵袭转移
  • 第六章 结论
  • 第七章 展望
  • 参考文献
  • 五、综述
  • 六、致谢
  • 七、在读硕士期间发表的文章
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