犬脊柱IMRT和普通放疗对脊髓中Fas、HSP70的影响及意义

论文摘要

目的：观察成年比格犬脊柱三维适形调强放疗（IMRT）和普通放疗对犬脊髓中Fas、HSP70的影响及意义。方法：选用雄性成年比格犬16只,随机数字表法随机分成4组（IMRT组：50 Gy组4只,70 Gy组4只；普通放疗组：50 Gy组4只,70 Gy组4只）,模拟犬胸9-10椎体肿瘤,在20 d内对其胸9-10椎体给予放疗,并于放疗3个月后活杀取材,取各犬相同节段、相同部位（胸9-10）脊髓。采用蛋白组学方法筛选放疗前后犬脊髓中的差异蛋白,采用HE染色观察各组犬脊髓神经元的形态,采用TUNEL法定量测定各组犬脊髓中神经元凋亡情况,采用SABC免疫组织化学法测定各组犬脊髓中Fas、HSP70蛋白表达量,采用RT-PCR方法半定量测定各组犬脊髓中Fas、HSP70 mRNA表达量。结果：①蛋白组学方法筛选出Fas、HSP70蛋白为放疗前后的差异蛋白。②相同放疗剂量,比格犬行为学评分IMRT组优于普通放疗组。③HE染色结果提示放疗3个月后可观察到脊髓放疗后的迟发损伤,IMRT组脊髓神经元以可逆性损伤为主,而普通放疗组多以不可逆性凋亡性损伤为主。④相同放疗剂量,IMRT组脊髓神经元凋亡指数低于普通放疗组；相同放疗剂量,IMRT组凋亡促进蛋白Fas蛋白表达量、mRNA表达量明显低于普通放疗组,而凋亡抑制蛋白HSP70蛋白表达量、mRNA表达量明显高于普通放疗。⑤脊髓神经元凋亡指数与Fas/HSP70比值呈正相关。结论：①放疗3个月后脊髓中存在着明显的放疗迟发反应。②Fas、HSP70两个蛋白参与了放疗后脊髓神经元凋亡的过程,而且Fas/HSP70比值是决定放疗后神经元是否发生凋亡的主要因素之一。③脊柱IMRT的脊髓生物安全性远优于普通放疗。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 资料与方法
• 1.实验动物
• 2.主要设备和仪器
• 3.实验方法
• 3.1 分组及计划
• 3.2 放疗步骤
• 3.3 放疗后的护理
• 3.4 取材
• 3.5 双向凝胶电泳
• 3.6 HE染色
• 3.7 Tunel法对细胞凋亡指数的测定
• 3.8 免疫组织化学法
• 3.9 RT-PCR法
• 4.质量控制
• 5.统计方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文
• 导师评阅表