家兔心衰心肌细胞钙循环异常的细胞学基础及药物干预研究

论文摘要

目的探讨超容量负荷联合压力负荷制备家兔心衰模型的可行性,在家兔心衰心肌细胞研究钙循环异常的细胞学基础,并观察美托洛尔和氯沙坦对钙调控蛋白表达和活性的影响,从而更深入的了解心衰的分子机制。方法（1）实验分组:38只家兔随机分为四组:假手术组（n=11）、心衰组（n=11）、美托洛尔干预组（n=8, 5mg Bid）和氯沙坦干预组（n=8, 10mg qd）;（2）心衰模型的建立:心衰组和心衰干预组家兔先诱导主动脉瓣关闭不全,2周后缩窄腹主动脉,利用心脏多谱勒观察术前后家兔心脏结构和功能的变化,共观察6周;（3）钙调控蛋白活性的测定:采用常规酶解法分离心室肌细胞,Fluo-3/AM负载心肌细胞,利用激光共聚焦显微技术,观察咖啡因诱导的钙瞬变过程中细胞内钙浓度的动态变化,了解钙释放通道（RyR2）、肌浆网钙泵（SERCA2a）和钠钙交换体（NCX）的活性;（4）钙调控蛋白表达的测定:从左室心肌组织提取膜蛋白后,采用Western blot法测定钙调控蛋白表达水平,并应用UVIDoc成像仪进行蛋白表达半定量分析;（5）统计学分析:利用SPSS11.0统计软件进行数据处理,所有数据以x±s表示,多组间均数比较采用ANOVA方差分析以及两两均数比较采用LSD检验,率的比较采用χ2检验,P<0.05为统计学显著性差异。结果（1）心功能的比较:与假手术组相比,心衰组室间隔厚度（2.30±0.15mm vs. 1.82±0.12mm,p<0.01）、左室舒张末径（21.2±1.69mm vs. 14.1±1.56mm,p<0.001）、左室/体重比（3.4±0.5 vs. 1.1±0.07,p<0.01）明显增加,射血分数（EF）明显降低（45.7±3.00% vs.72.6±5.03%,p<0.001）,而美托洛尔和氯沙坦干预组EF较心衰组均明显增加（美托洛尔干预组:60.2±5.13% vs. 45.7±3.00%, p<0.001;氯沙坦干预组:62.5±3.43% vs. 45.7±3.00%,p<0.001）; （2）钙调控蛋白活性的比较:与假手术组相

论文目录

• 引言
• 第一部分 家兔心衰模型的建立
• 前言
• 第一节 材料与方法
• 第二节 结果
• 第三节 讨论
• 第四节 参考文献
• 第二部分 心衰心肌细胞钙循环异常的细胞学基础
• 第一章 家兔心衰心肌细胞钙瞬变的异常
• 前言
• 第一节 材料与方法
• 第二节 结果
• 第三节 讨论
• 第四节 参考文献
• 第二章 家兔心衰心肌细胞钙调控蛋白表达的异常
• 前言
• 第一节 材料与方法
• 第二节 结果
• 第三节 讨论
• 第四节 参考文献
• 第三部分 家兔心衰心肌细胞钙循环的药物干预
• 第一章 美托洛尔对家兔心衰心肌细胞钙循环的影响
• 前言
• 第一节 材料与方法
• 第二节 结果
• 第三节 讨论
• 第四节 参考文献
• 第二章 氯沙坦对家兔心衰心肌细胞钙调控蛋白表达的影响
• 前言
• 第一节 材料与方法
• 第二节 结果
• 第三节 讨论
• 第四节 参考文献
• 结论
• 致谢
• 附录1 英文缩略词对照表
• 附录2 近几年发表论文
• 附录3 综述钙循环与心力衰竭
• 详细摘要