论文摘要
第一部分血管生成素-1在大鼠光气染毒所致急性肺损伤作用的研究目的：观察光气染毒大鼠血清血管生成素-1（Angiogenin-1, Ang-1）水平变化和评估急性肺损伤程度,探讨Ang-1在光气所致SD大鼠急性肺损伤发挥的作用,为研究光气急性肺损伤提供理论基础。方法：①选取健康成年雄性SD大鼠12只,随机分为实验组（光气组）和对照组（空气组）,每组6只。②各组实验鼠均分别给与不同气体处理（空气组吸入新鲜空气5分钟；光气组大鼠吸入纯度为100%的8.33mg/L光气5分钟）,吸入气体完毕后按常规方式饲养6小时。③6小时后测动脉血气,取各组SD鼠的肺组织行HE染色并做肺损伤评分,湿/干重比值检测,行支气管肺泡灌洗液白细胞计数和总蛋白浓度检测；ELISA法检测大鼠血清Ang-1水平。数据分析采用SPSS16.0统计软件,独立样本t检验,P<0.05。结果：组织病理切片显示光气组大鼠肺组织出现明显的损伤病理特征。光气组大鼠支气管肺泡灌洗液（broncho alveolar lavage fluid, BALF）,总蛋白浓度,白细胞计数升高；肺脏湿干比增高；ELISA检测结果显示,实验组大鼠血清Ang-1水平显著降低；且与空气组相比,差异具有显著的统计学意义,P<0.05。结论：大鼠吸入本浓时积光气后导致急性肺损伤,大鼠血清Ang-1较空气组明显降低。Ang-1表达减少可能与光气诱导急性肺脏损伤相关,具体机制和作用值得进一步研究探讨。第二部分血管生成素-2与血管生成素-1比值在大鼠光气急性肺损伤中的动态变化研究目的：观察吸入光气诱导的急性肺损伤的大鼠血清Ang-2与Ang-1比值水平变化和肺脏损伤指标（肺脏湿干比、BALF总蛋白浓度,BALF白细胞计数）的关系,探究光气所致大鼠急性肺损伤机制,为光气急性肺损伤防治提供实验理论基础。方法：①选取健康成年雄性SD大鼠84只随机分为光气组：13个光气染毒后观察组和1个空气组,每组6只。②各组大鼠给与不同气体处理：空气组大鼠放入染毒柜（没有光气只有新鲜空气）5分钟；光气组大鼠放入染毒柜中5分钟（染毒柜中光气纯度为100%的8.33mg/L）后从染毒柜中取出常规饲养。③常规饲养到预定时刻取各组大鼠肺脏,计算湿/干重量比值,BALF白细胞计数、总蛋白浓度检测；取血离心后,取上清液ELISA法检测大鼠血清Ang-1和Ang-2的含量,计算Ang-2比Ang-1数值。④数据统计分析采用SPSS.16.0,P<0.05。结果：①大鼠光气染毒后常规饲养48小时内血清Ang-2,肺脏湿/干重量比值,BALF白细胞计数、总蛋白浓度随着时间延长有升高趋势；血清Ang-1随着时间延长有降低趋势。②Ang-2与肺脏湿干比相关系数0.441,P<0.01.BALF总蛋白浓度相关系数0.283,P<0.01,BALF白细胞计数相关系数0.439,P<0.01。Ang-1与肺脏湿干比相关系数-0.286 P<0.01,BALF总蛋白浓度相关系数-0.198,P=0.071,BALF白细胞计数相关系数-0.362 P<0.05=0.001。Ang-2与Ang-1比值与肺脏湿干比相关系数0.683,P<0.01,BALF总蛋白浓度相关系数0.534,P<0.01,BALF白细胞计数相关系数0.710,P<0.01。结论：在本浓时积光气染毒后,Ang-2与Ang-1比值与肺脏损伤指标（肺脏湿干比、BALF总蛋白浓度,BALF白细胞计数）正相关,可作为大鼠光气急性肺损伤严重程度的早期重要指标。第三部分血管生成素-1在光气急性肺损伤作用机制研究目的：观察光气染毒所致大鼠急性肺损伤后Ang-1,NF-κB水平变化和评估光气急性肺损伤,探讨Ang-1在光气所致大鼠急性肺损伤中的作用机制,为研究光气急性肺损伤提供理论基础。方法：1、选取健康成年雄性SD大鼠84只（220±40g）随机分为光气组78只和空气组6只。2、选取健康成年雄性SD大鼠18只随机分为光气组6只、PDTC干预组6只和空气对照组6只。3、各组大鼠给与不同气体处理：空气组大鼠放入染毒柜（没有光气只有新鲜空气）5分钟；干预组和光气组放入染毒柜中5分钟（染毒柜中光气纯度为100%的8.33mg/L）；4、干预组大鼠吸入光气后30分钟给予PDTC 100 mg/kg一次性腹腔注射；光气组和空气组大鼠吸入光气或空气后30分钟给予生理盐水1 ml/kg一次性腹腔注射后常规饲养。5、常规饲养到预定时刻取各组大鼠肺脏并计算湿/干重量比值,检测BALF白细胞计数、总蛋白浓度；取血离心后取上清液ELISA法检测血清Ang-1水平。测动脉血气,蛋白印迹（Westernblot）和免疫组化检测肺脏组织Ang-1和NF-κB水平。结果：1、吸入光气组,①光气染毒后常规饲养48小时内大鼠血清Ang-1随着时间延长呈现降低趋势。②湿/干重量比值,BALF白细胞计数、总蛋白浓度随着时间呈现增高趋势。2、干预实验组：①光气组肺湿干比、BALF白细胞计数、肺损伤评分、动脉血二氧化碳分压、BALF总蛋白浓度与空气组比较均增高,差异有统计学意义（P<0.05）；②光气组血清Ang-1、动脉血氧分压与空气组比较均降低（P<0.05）；③光气组肺湿干比、BALF白细胞计数、肺损伤评分、动脉血二氧化碳分压、BALF总蛋白浓度与干预组比较均增高,差异有统计学意义（P<0.05）；④光气组血清Ang-1、动脉血氧分压与干预组比较均降低（P<0.05）。⑤肺组织Westernblot与免疫组化结果一致,结果显示：空气组Ang-1表达正常；光气组Ang-1表达明显减少；干预组与光气组相比Ang-1表达增高,与空气组相比表达减少。肺Westernblot和免疫组化结果显示：空气组NF-κB表达正常；光气组NF-κB表达明显增高；干预组与光气组相比NF-κB表达降低,与空气组相比表达增高。结论：1、大鼠光气吸入后48小时内随着时间延长,血清Ang-1水平降低,Ang-1与肺损伤程度呈负相关。2、血管生成素-1通过NF-κB信号传导通路,通过减轻炎症因子介导的炎症反应,可降低肺脏内皮通透性,减轻急性肺损伤。
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