论文摘要
目的：在正常C57BL/6J和2型糖尿病（T2DM）KKAy小鼠上,以选择性CB1R拮抗剂利莫那班为阳性药,观察新型CB1R拮抗剂/反向激动剂MJ08的减肥作用以及对小鼠胰岛素敏感性的影响,根据实验中MJ08升高空腹血糖的现象,以肝组织为对象,深入探讨其反向激动作用对糖代谢途径的调节机制。方法：（1） C57BL/6J和KKAy小鼠各分三组,分别灌胃给予溶剂、10mg/kg利莫那班和10mg/kg MJ08,每天1次,共计26天。给药期间每天测定小鼠体重,定期监测空腹血糖,实验结束时测定血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TCH）；采用multiplex法测定血清中的胰岛素、胰高血糖素和瘦素的含量。（2） Western blot法检测各组动物肝组织大麻素受体1 （CB1R）、β2-1肾上腺素受体（ADRB2）、胰高血糖素受体（GlucR）、刺激型G蛋白a亚基（Gsa）、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）、葡萄糖-6-磷酸酶（G6Pase）蛋白的表达。（3）双波长荧光检测法测定肝脏中环磷酸腺苷（cAMP）含量。（4）蒽酮法测定肝糖原含量。（5） RT-PCR法检测PEPCK和G6Pase mRNA水平。结果：（1）SR141716在T2DMKKAy小鼠上有减肥降脂的作用,并可增加胰岛素敏感性,缓解高血糖症状；MJ08在C57BL/6J和KKAy小鼠上均有减重作用,且效果强于SR141716,同时MJ08可降低KKAy小鼠脂体系数、血清中TG,可缓解肥胖个体的脂质紊乱,对C57BL/6J小鼠影响较弱,MJ08可降低小鼠胰岛素敏感性,在C57BL/6J小鼠上表现的更为明显,主要是因为其升血糖作用引起的。（2） SR141716可抑制KKAy小鼠高胰岛素分泌,而不影响糖刺激下的胰岛素水平,在C57BL/6J小鼠上,SR141716不影响其基础胰岛素分泌水平,却降低糖刺激下的胰岛素加倍分泌；MJ08对KKAy小鼠基础和糖负荷下的胰岛素水平均无影响,在C57BL/6J小鼠上的作用与SR141716相同,但作用更为强烈。（3）MJ08上调GlucR的表达,激活Gsa,使cAMP含量升高,引起肝脏中PEPCK、G6Pase的基因及蛋白水平上调,糖输出增强,血糖升高。结论：MJ08具有显著的减肥作用,其反向激动作用更强,在血糖调节上表现的更加明显；MJ08激活了Gsa信号通路,上调糖异生途径,增加肝糖输出。