广西扁柑及部分地方柑橘种质资源调查和亲缘关系分析

论文摘要

扁柑（C. reticulata Blanco cv. Biangan）属芸香科（Rutaceae）、柑橘亚科（Aurantioideae）、柑橘属（Citrus）植物,是广西特有的柑橘品种,丰产稳产,果型美观,色泽鲜艳,耐贮藏。目前,扁柑资源仍未得到很好的开发利用,且该资源存在着同名异物或同物异名的现象,在分类上属于宽皮柑橘类的“柑”还是“桔”未得到证实,为了充分利用和保护扁柑优良种质资源,了解扁柑种质资源的现状、分类地位及亲缘关系,本研究对扁柑种质资源进行调查收集,同时进行了形态描述和染色体核型分析,并利用ISSR和SCoT分子标记分别对26份种质资源进行了遗传多样性分析。主要结果如下：1.通过实地调查,共收集了26份扁柑及其它柑橘资源,分别采自广西那陈镇、浦北县、大新县、金城江区、凭祥市、龙州市、上思县、百色及越南等地。2.调查发现一些扁柑单株表现无核率高、有脐、丰产、风味佳等优良性状。3.扁柑树冠扁圆形,叶卵状披针形,两性花,果实扁圆形,果色橙红,单果重65.66g～183g,可溶性固形物11%～14%,可食率70%,果肉色泽橙红色,中等化渣,有香气,平均瓤囊数11,桔络较多,白色,种子0～15粒,多胚,子叶绿色。4.进行了ISSR-PCR和SCoT-PCR反应体系及程序优化,建立了适合于扁柑资源的ISSR-PCR和SCoT-PCR的反应体系。5.扁柑亲缘关系ISSR和SCoT分析表明：在遗传系数为0.76水平处均能将27份资源分成了两大类,第1组包括：腊月柑1-4、腊月柑珠心苗、龙州本地柑、凭祥本地柑1-3、广柑、越南柑橘1-2、浦北扁柑无核、那陈扁柑1-2、那陈扁柑珠心苗、百色乌拉扁柑、百色六鸡扁柑、金城江扁柑、上思扁柑1-3、栟柑和南丰蜜桔；第2组包括：宫川早温和兴津早温。由以上亲缘关系分析,扁柑分类上应属于宽皮柑橘中的“桔”6.染色体观察及核型分析结果表明：扁柑为二倍体,2n=2x=18；核型为2B类型。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 前言
• 1.1 概述
• 1.2 相橘遗传多样性研究进展
• 1.3 分子标记研究进展
• 1.4 ISSR和SCoT分子标记概述
• 1.4.1 ISSR分子标记概述
• 1.4.2 SCoT分子标记概述
• 1.5 研究目的、意义及内容
• 1.5.1 研究目的、意义
• 1.5.2 研究内容
• 2 材料与方法
• 2.1 扁柑种质资源的调查与收集
• 2.1.1 调查地区的自然状况
• 2.1.2 方法
• 2.2 ISSR标记和SCoT标记研究
• 2.2.1 材料
• 2.2.2 主要生化试剂
• 2.2.3 主要仪器设备
• 2.2.4 实验设计
• 2.2.5 模板DNA的制备
• 2.2.6 DNA的浓度调整和质量检测
• 2.2.7 ISSR-PCR反应程序及体系的初始建立
• 2.2.8 SCoT-PCR反应程序及体系的初始建立
• 2.3 广西那陈扁柑种质资源的染色体观察
• 2.3.1 材料
• 2.3.2 方法
• 2.4 核型分析
• 3 结果与分析
• 3.1 扁柑种质资源的调查与收集
• 3.1.1 分布状况
• 3.1.2 植物学部分性状调查
• 3.1.3 形态学性状多样性研究
• 3.2 ISSR分子标记研究
• 3.2.1 基因组DNA的提取与检测
• 3.2.2 ISSR扩增体系的建立
• 3.2.3 ISSR引物的筛选及退火温度的确定
• 3.2.4 ISSR扩增结果
• 3.2.5 聚类分析
• 3.3 SCoT分子标记研究
• 3.3.1 SCoT扩增体系的建立
• 3.3.2 SCoT多态性分析
• 3.4 ISSR和SCoT实验数据的综合聚类分析
• 3.5 染色体分析
• 3.5.1 取材时间
• 3.5.2 根尖培养方式的对比
• 3.5.3 预处理的影响
• 3.5.4 酸解时间的对比
• 3.5.5 染色体数目的确定
• 3.6 核型分析
• 4 讨论与展望
• 4.1 讨论
• 4.1.1 影响DNA提取的因素
• 4.1.2 ISSR-PCR和SCoT-PCR反应体系的探索
• 4.1.3 引物筛选策略
• 4.1.4 形态学性状、ISSR分子标记、SCoT分子标记三种方法分析
• 4.1.5 ISSR标记和SCoT标记的应用前景
• 4.1.6 影响根尖染色体的因素
• 4.1.7 广西扁柑种质资源的开发、保护和利用
• 4.2 展望
• 5 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录A
• 附录B