云南链霉菌的发酵及其产物放线酮对烟草病害的防治研究

论文摘要

本研究对云南链霉菌YIM41004T培养基及摇瓶培养条件分别进行了筛选和优化;对其最适生长温度和最适产物合成温度,5L全自动发酵罐发酵条件等进行了研究,同时对其产物放线酮的平板抑菌效果及防治烟草黑胫病的效果进行了研究。主要研究结论如下:1.优化后的培养条件为:以4%接种量接种至500mL三角瓶中,装液量为75mL,初始pH值6.5,发酵温度为28℃,摇床培养96h;其发酵产物放线酮产量平均达到445.19ug/mL,比初始的放线酮产量提高422%（p＜0.01）。2.菌体生长及产物放线酮合成分为2个温度控制阶段,在48h前采用28℃进行培养;发酵48h后放线酮开始大量合成。3.采用200rpm搅拌速率和2.1L/min的通气量进行5L发酵罐发酵实验结果与摇瓶实验结果非常吻合。说明该条件适合放线酮的合成,随着发酵的进行,pH值逐渐降低、同时放线酮的合成持续进行。4.采用新的消泡剂后在30L放大发酵实验中获得较为理想的结果,30L放大发酵-中间流加糖实验结果表明,菌丝体量在24h之后就基本处于稳定状态;放线酮含量在24h时快速提高,在48h达到最高,72h后葡萄糖含量保持0.8%水平上;pH值在整个发酵过程中呈下降趋势,直到72h时才止跌回升;在发酵至48h时,菌丝大量出现独特的孢子链结构。5.不同浓度放线酮对烟草赤星病和黑胫病病原菌菌丝生长的抑制作用存在明显差异,1.3～8.0ppm的放线酮对赤星病病原菌的菌丝生长有一定的抑制作用,3个浓度的放线酮的抑制效果分别为23.8%、34.5%和44.7%;而1.3ppm的放线酮对黑胫病病原菌菌丝的生长抑制作用仅为31.9%,但4.0ppm和8.0ppm两个浓度的放线酮抑制效果明显,抑制率分别达到了84%和98.5%6.放线酮防治烟草黑胫病大田试验表明,采用放线酮浇根处理的能对烟草黑胫病起到较好的防治效果,平均防治率为69.7%;经放线酮处理的大田的产量和产值、上等烟和中上等烟比例均高于对照（清水）,在黑胫病的重发区,施用放线酮能取得较大的经济效益。

论文目录

• 摘要
• Abstracts
• 前言
• T培养基筛选及摇瓶培养条件的优化'>第一章 云南链霉菌YIM41004^T培养基筛选及摇瓶培养条件的优化
• 1 材料和方法
• 1.1 培养基
• 1.1.1 斜面培养基
• 1.1.2 液体种子培养基
• 1.1.3 发酵培养基原始配方
• 1.2 培养方法
• 1.2.1 斜面培养
• 1.2.2 液体种子培养
• 1.2.3 初始发酵条件
• 1.3 分析方法
• 1.3.1 云南放线酮含量测定
• 1.3.2 生物量测定
• 1.3.3 发酵液残糖的测定
• 1.3.4 pH测定
• 2 结果和分析
• T发酵培养基的优化'>2.1 YIM41004^T发酵培养基的优化
• T发酵过程的影响'>2.1.1 碳源对云南链霉菌YIM41004^T发酵过程的影响
• T发酵过程的影响'>2.1.2 氮源对云南链霉菌YIM41004^T发酵过程的影响
• 2.1.3 发酵培养基的优化
• T合成云南放线酮条件的优化'>2.2 YIM41004^T合成云南放线酮条件的优化
• 2.2.1 pH值、菌丝生物量及还原糖含量的时间历程
• 2.2.2 发酵温度
• 2.2.4 装液量
• 2.2.5 接种量
• 2.3 不同发酵条件对云南放线酮产量的影响
• 3 讨论
• 第二章 云南链霉菌最适生长温度与最适产物合成温度的研究
• 1 材料和方法
• 1.1 菌种
• 1.2 培养基
• 1.2.1 斜面培养基
• 1.2.2 液体种子培养基
• 1.2.3 发酵培养基
• 1.3 培养方法
• 1.3.1 斜面培养
• 1.3.2 液体种子培养
• 1.3.3 发酵条件
• 1.3.4 培养温度
• 1.4 分析方法
• 1.4.1 云南放线酮含量测定
• 1.4.2 菌丝生物量的测定
• 2 结果和分析
• 2.1 最适生长温度实验
• 2.2 最适产物合成温度实验
• 3 讨论
• T 5L和30L全自动发酵罐发酵条件的研究'>第三章 云南链霉菌菌株YIM41004^T5L和30L全自动发酵罐发酵条件的研究
• 1 材料和方法
• 1.1 发酵器
• 1.2 菌种
• 1.3 培养基
• 1.3.1 斜面培养基
• 1.3.2 液体种子培养基
• 1.3.3 发酵培养基配方
• 1.4 培养方法
• 1.4.1 斜面培养
• 1.4.2 液体种子培养
• 1.4.3 种子液按照4%比例通过火焰圈接种法接种发酵罐
• 1.5 分析方法
• 1.5.1 云南放线酮含量测定
• 1.5.2 pH的测定
• 1.5.3 菌丝体沉降体积测定
• 2 结果和分析
• 2.1 发酵搅拌转速和通气量的确定
• 2.2 调整通气量和搅拌速率后的发酵结果
• 2.3 发酵过程实验记录
• 2.4 各阶段放线酮含量及相关指标变化统计
• 2.5 各阶段放线酮含量及相关指标变化统计
• 3 讨论
• 第四章 放线酮平板抑菌效果的研究
• 1 材料与方法
• 1.1 放线酮溶液
• 1.2 平板制作
• 1.3 抑菌实验
• 1.4 观测
• 2 结果与分析
• 2.1 放线酮对赤星病病原菌的抑制
• 2.2 放线酮对黑胫病病原菌的抑制
• 第五章 放线酮防治对烟草黑胫病盆栽试验效果的研究
• 1 材料与方法
• 1.1 烤烟品种
• 1.2 试验地点
• 1.3 试验设计
• 1.4 菌谷准备
• 1.5 观察记载
• 2 结果与分析
• 2.1 2004年实验结果
• 2.2 2005年实验结果
• 2.3 放线酮的药敏实验结果
• 第六章 放线酮防治烟草黑胫病病大田试验效果的研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 供试药剂
• 1.1.2 供试品种
• 1.1.3 供试田地
• 1.2 方法
• 1.2.1 处理设置
• 1.2.2 施肥方法
• 1.2.3 调查方法
• 2 结果与分析
• 2.1 放线酮对烟草黑胫病的防治效果
• 2.2 放线酮对烤烟产质量的影响
• 3 讨论
• 第七章 全文结论与创新点
• 1 全文结论
• 2 创新点
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历