热应激肉鸡金属硫蛋白的变化及皮质酮的介导作用

论文摘要

本论文以肉鸡为研究对象,通过急性和持续热应激两种模型,系统研究了热应激肉鸡金属硫蛋白（MT）的变化规律,探究了皮质酮的介导作用,为今后通过调节MT来缓解家禽热应激提供理论依据。本论文主要从以下三方面内容展开:1.急性热应激肉鸡金属硫蛋白的变化及皮质酮的介导作用选择生长发育良好、体重相当的35日龄AA肉用公鸡192只,随机进行如下4个处理:23℃常温组（Normal Temperature,NT）:注射玉米油;23℃常温+CORT（NT+CORT）:肌肉注射皮质酮（CORT）4mg/kg体重;35℃高温组（High Temperature,HT）:注射玉米油;35℃高温+糖皮质激素受体阻断剂RU486（HT+RU486）:皮下注射50mg/kg体重。每组6个重复,每个重复8只鸡。试验开始时,快速将高温组和高温+阻断剂组温度由23℃升至35℃,并持续3h。分别于处理后0h、0.5h、1h、1.5h、3h、6h、9h和12h采集样品。研究热应激肉鸡MT的动态变化规律及皮质酮的介导作用。结果显示:急性热应激导致肉鸡肝脏MT及MTmRNA发生显著变化:MT蛋白水平在0.5h显著下降（P<0.05）,1h、1.5h、3h显著上升（P<0.05）,并在1.5h达到峰值点;肝脏MTmRNA在0-3h内显著上升（P<0.05）,并在3h处达到峰值点,二者变化趋势高度吻合。常温外源注射CORT导致MT合成显著增加（P<0.05）,高温组肝脏MT与血浆皮质酮的变化趋势一致,高温注射糖皮质激素受体阻断剂RU486显著降低了高温组MT合成及MTmRNA的表达（P<0.05）。以上结果表明肝脏MT在肉鸡热应激情况下发生显著变化,并且肝脏MT的生物合成受转录水平调控,同时,皮质酮介导了急性热应激下肝脏MT的合成。2.持续热应激肉鸡金属硫蛋白的变化及皮质酮的介导作用选择生长发育良好、体重相当的35日龄AA肉用公鸡120只,随机进行如下4个处理:23℃常温组（Normal Temperature,NT）;23℃常温配对组（Paired-Feeding,PF）:按前1天高温组的采食量饲喂;33℃高温组（High Temperature,HT）:采用日变循环高温模式;23℃常温+CORT（NT+CORT）组:CORT按30mg/kg饲料添加。每组6个重复,每个重复5只鸡。日变循环高温采用23-33-23℃变化模式,每日循环,重复1周。分别于处理后0d、1d、3d、5d和7d采集样品。研究持续热应激肉鸡MT的变化规律及皮质酮的介导作用。结果显示:高温组肉鸡肝脏MT及MTmRNA在持续热应激0-3天显著升高（P<0.05）,5-7天显著下降（P<0.05）,与血浆皮质酮的变化趋势一致,而配对组MT及MTmRNA与常温组均无显著差异（P>0.05）;常温下,通过饲料添加皮质酮,肝脏MT蛋白水平以及MTmRNA表达量与血浆皮质酮的变化趋势高度吻合,在1d、3d、5d显著升高（P<0.05）。表明持续热应激可导致肝脏MT蛋白前期合成增加,后期合成减少,这一现象与热应激导致肉鸡采食量下降无关,皮质酮介导了持续热应激下肉鸡肝脏MT的产生。3.金属硫蛋白与超氧化物歧化酶（SOD）在热应激调节时间上的比较在已建立的急性和持续热应激模型基础上,以肝脏抗氧化酶SOD为参比对象,以肝脏丙二醛（MDA）为肝组织氧化损伤程度的衡量指标,初步探究MT与SOD是否在热应激调节时间上存在差异。结果显示:急性热应激情况下,MT在1h、1.5h显著升高,而SOD则在1h、1.5h几乎没有变化,在3h、6h显著升高（P<0.05）;注射糖皮质激素受体阻断剂RU486后,MT蛋白水平在1h、1.5h显著降低,SOD则在1h、1.5h、3h、6h都显著升高（P<0.05）。与急性试验结果相似,MT在持续热应激1d、3d显著升高,SOD在持续热应激5d、7d显著升高。以上结果表明MT与SOD可能在热应激调节时间上存在差异。综合上述研究结果,可以得出,在热应激情况下,肉鸡肝脏MT蛋白水平发生显著变化,肝脏MT的生物合成受转录水平调控;皮质酮介导了热应激下肉鸡肝脏MT的合成;MT与SOD在热应激调节时间上可能存在差异。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 研究目的和意义
• 1.2 MT 与应激反应国内外研究进展
• 1.2.1 MT 简介
• 1.2.2 MT 在应激反应中的产生及相关调控
• 1.2.3 MT 在应激反应中的作用
• 1.2.4 MT 的非保护性功能
• 1.2.5 小结
• 1.3 立题依据
• 1.3.1 热应激与MT
• 1.3.2 皮质酮对MT 的影响
• 1.3.3 问题与假设
• 1.4 研究内容和方法
• 1.4.1 研究内容
• 1.4.2 技术路线
• 第二章 急性热应激肉鸡金属硫蛋白的变化及皮质酮的介导作用
• 2.1 前言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 主要仪器和试剂
• 2.2.2 试验设计与日粮组成
• 2.2.3 样品采集与制备
• 2.2.4 测定指标与方法
• 2.2.5 数据统计
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 呼吸率和直肠温度
• 2.3.2 急性热应激对肝脏MT 及MTmRNA 的影响
• 2.3.3 皮质酮的介导作用
• 2.3.4 MT 与抗氧化酶SOD 在热应激调节时间上的比较
• 2.4 小结
• 第三章 持续热应激肉鸡金属硫蛋白的变化及皮质酮的介导作用
• 3.1 前言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 主要仪器和试剂
• 3.2.2 试验设计与日粮组成
• 3.2.3 样品采集与制备
• 3.2.4 指标测定及方法
• 3.2.5 数据统计
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 日变循环高温对肉鸡呼吸率和直肠温度的影响
• 3.3.2 日变循环高温对肉鸡肝脏MT 的影响
• 3.3.3 日变循环高温对肉鸡肝脏MTmRNA 的影响
• 3.3.4 日变循环高温对肉鸡血浆皮质酮的影响
• 3.3.5 常温下饲料添加CORT 对肉鸡肝脏MT 的诱导
• 3.3.6 MT 与抗氧化酶SOD 在热应激调节时间上的比较
• 3.4 小结
• 第四章 全文结论
• 4.1 论文主要结论
• 4.2 论文创新点
• 4.3 有待进一步研究的问题
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 作者简历